三种宿主蛋白的酶活抑制剂抗日本脑炎病毒感染的研究
发布时间：2021-06-15 14:01
日本脑炎病毒（Japanese encephalitis virus, JEV）可经蚊虫传播引起严重的人畜共患疾病。JEV属于黄病毒科黄病毒属家族,其基因组只有一个开放阅读框,可编码3个结构蛋白,衣壳蛋白（C）,膜蛋白（M）,囊膜糖蛋白（E）和7个非结构蛋白（NS1,NS2A, NS2B, NS3, NS4A, NS4B, NS5）。本研究中,（1）分析了JEV感染细胞不同时间点脂肪酸合成途径中相关酶类mRNA水平上的变化；（2）选择针对乙酰辅酶A羧化酶1（ACC1）和脂肪酸合成酶（FAS）的抑制剂,对其抑制JEV感染活性进行研究,结果证明这两个酶在病毒感染过程中具有重要作用；（3）针对宿主细胞DEAD-boxRNA解旋酶DDX3的抑制剂抑制JEV感染的活性研究,筛选得到3个能够抑制病毒感染的化合物。主要研究内容分为以下4个部分：1.JEV感染对宿主细胞内脂肪酸生物合成过程中相关酶的影响设计针对13个宿主细胞脂肪酸生物合成过程相关酶/蛋白的实时荧光定量PCR引物,甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GADPH）作为内参。收集感染病毒12、24和48 h的细胞,通过实时定量PCR方法检测脂肪酸合成相...
【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：79 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 日本脑炎病毒的研究进展
1 日本脑炎发展历史及地理分布
2 日本脑炎的流行病学研究进展
2.1 易感宿主、传染源、传播途径
2.2 流行特点
2.3 敏感动物与细胞
3 JEV的病原学特性
3.1 分类及理化性质
3.2 生物学性状
4 JEV的自然变异和分型
5 发病机理
6 JEV分子生物学研究进展
6.1 JEV基因结构特征
6.2 JEV蛋白的结构与功能
6.3 JEV的吸附与入胞机制
6.4 JEV的复制
7 抗病毒药物的研究进展
7.1 抑制病毒感染
7.2 干扰素
7.3 抗体
7.4 抑制宿主细胞的酶类
参考文献
第二章 宿主细胞脂肪酸生物合成相关蛋白/酶在JEV感染过程中的RNA水平变化
1 材料和方法
1.1 材料
1.2 方法
2 结果
2.1 扩增曲线和融解曲线
2.2 数据分析
3 讨论
参考文献
第三章 体外下调脂肪酸生物合成途径而抑制JEV的感染
1 材料和方法
1.1 材料
1.2 方法
2 结果
2.1 抑制剂细胞毒性的测定
2.2 抑制剂对JEV感染的抑制作用
2.3 细胞内FAS与JEV NS3、NS5及RNA的共定位
3 讨论
参考文献
第四章 体内下调脂肪酸生物合成途径而抑制JEV的感染
1 材料和方法
1.1 材料
1.2 方法
2 结果
2.1 腹腔接种JEV的半数致死量
2.2 脑腔接种JEV的半数致死量
2.3 C75和TOFA的体内抗病毒试验
2.4 EGCG的体内抗病毒试验
3 讨论
参考文献
第五章 宿主蛋白DDX3的酶活抑制剂体外抑制JEV感染的研究
1 材料和方法
1.1 材料
1.2 方法
2 结果
2.1 DDX3酶活抑制剂的化学结构(专利保护)
2.2 DDX3酶活抑制剂细胞毒性的测定
2.3 DDX3酶活抑制剂抗JEV感染效果的筛选
2.4 DDX3酶活抑制剂抗病毒效果剂量依赖性的研究
2.5 DDX3酶活抑制剂对抗JEV感染的半数抑制浓度
3 讨论
参考文献
全文总结
致谢
发表论文及专利
【参考文献】：
期刊论文
[1]脂肪酸合成酶基因的研究进展[J]. 罗建学,李春风,初晓辉,谷大海,黎小青,徐志强. 中国畜牧兽医. 2011(06)
[2]黄病毒科病毒编码的非结构蛋白及其功能[J]. 周鹏程,陈建国,丁明孝. 微生物学免疫学进展. 1999(02)
[3]儿茶素衍生物对人免疫缺陷病毒逆转录酶及DNA聚合酶的抑制作用[J]. 陶佩珍,章天,周萍,王淑琴,程书钧,蒋景仪,郭巨涛,陈鸿珊. 中国医学科学院学报. 1992(05)
博士论文
[1]乙型脑炎病毒分子流行病学、诊断及重组疫苗研究[D]. 刘昊.吉林大学 2013
硕士论文
[1]猪细小病毒分离株感染母猪及胎猪的体内组织分布及病理变化[D]. 苗岚飞.东北农业大学 2009
本文编号：3231187
【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：79 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 日本脑炎病毒的研究进展
1 日本脑炎发展历史及地理分布
2 日本脑炎的流行病学研究进展
2.1 易感宿主、传染源、传播途径
2.2 流行特点
2.3 敏感动物与细胞
3 JEV的病原学特性
3.1 分类及理化性质
3.2 生物学性状
4 JEV的自然变异和分型
5 发病机理
6 JEV分子生物学研究进展
6.1 JEV基因结构特征
6.2 JEV蛋白的结构与功能
6.3 JEV的吸附与入胞机制
6.4 JEV的复制
7 抗病毒药物的研究进展
7.1 抑制病毒感染
7.2 干扰素
7.3 抗体
7.4 抑制宿主细胞的酶类
参考文献
第二章 宿主细胞脂肪酸生物合成相关蛋白/酶在JEV感染过程中的RNA水平变化
1 材料和方法
1.1 材料
1.2 方法
2 结果
2.1 扩增曲线和融解曲线
2.2 数据分析
3 讨论
参考文献
第三章 体外下调脂肪酸生物合成途径而抑制JEV的感染
1 材料和方法
1.1 材料
1.2 方法
2 结果
2.1 抑制剂细胞毒性的测定
2.2 抑制剂对JEV感染的抑制作用
2.3 细胞内FAS与JEV NS3、NS5及RNA的共定位
3 讨论
参考文献
第四章 体内下调脂肪酸生物合成途径而抑制JEV的感染
1 材料和方法
1.1 材料
1.2 方法
2 结果
2.1 腹腔接种JEV的半数致死量
2.2 脑腔接种JEV的半数致死量
2.3 C75和TOFA的体内抗病毒试验
2.4 EGCG的体内抗病毒试验
3 讨论
参考文献
第五章 宿主蛋白DDX3的酶活抑制剂体外抑制JEV感染的研究
1 材料和方法
1.1 材料
1.2 方法
2 结果
2.1 DDX3酶活抑制剂的化学结构(专利保护)
2.2 DDX3酶活抑制剂细胞毒性的测定
2.3 DDX3酶活抑制剂抗JEV感染效果的筛选
2.4 DDX3酶活抑制剂抗病毒效果剂量依赖性的研究
2.5 DDX3酶活抑制剂对抗JEV感染的半数抑制浓度
3 讨论
参考文献
全文总结
致谢
发表论文及专利
【参考文献】：
期刊论文
[1]脂肪酸合成酶基因的研究进展[J]. 罗建学,李春风,初晓辉,谷大海,黎小青,徐志强. 中国畜牧兽医. 2011(06)
[2]黄病毒科病毒编码的非结构蛋白及其功能[J]. 周鹏程,陈建国,丁明孝. 微生物学免疫学进展. 1999(02)
[3]儿茶素衍生物对人免疫缺陷病毒逆转录酶及DNA聚合酶的抑制作用[J]. 陶佩珍,章天,周萍,王淑琴,程书钧,蒋景仪,郭巨涛,陈鸿珊. 中国医学科学院学报. 1992(05)
博士论文
[1]乙型脑炎病毒分子流行病学、诊断及重组疫苗研究[D]. 刘昊.吉林大学 2013
硕士论文
[1]猪细小病毒分离株感染母猪及胎猪的体内组织分布及病理变化[D]. 苗岚飞.东北农业大学 2009
本文编号：3231187
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/dongwuyixue/3231187.html
