野猪粪便中乳酸菌的分离鉴定及特性研究

发布时间：2021-06-16 05:47

　　【目的】筛选安全的、具有优良特性的乳酸菌菌株,进一步研发益生制剂,为饲料添加剂等动物相关产品提供资源。【方法】从我国黑龙江省大兴安岭地区采集野猪粪便样品13份,编号后置于4℃保温箱迅速运回实验室,利用MRS培养基分离纯化乳酸菌。使用细菌基因组DNA提取试剂盒提取分离菌株的基因组DNA,利用细菌16S rDNA通用引物进行PCR鉴定,将扩增得到的序列测序后在NCBI上使用BLAST与GenBank数据库中序列进行对比分析,确定各菌株的分类学地位。将鉴定后的乳酸菌菌株分别接种于酸性（pH 3.0）和含胆盐（0.3%）的MRS培养基,在不同条件下评价乳酸菌菌株的耐酸、耐胆盐特性。将过夜培养的乳酸菌于室温条件下静置,在不同时间测定其OD600nm,进行自凝集能力评价;过夜培养的菌株分别与致病性埃希氏大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和鼠伤寒沙门氏菌3种致病菌混合后于室温静置,进行共凝集能力检测。在体外,分别进行乳酸菌菌株对Caco-2细胞和IPEC-J2细胞的黏附能力测定,评价不同菌株的黏附能力。通过测定乳酸菌菌株对致病性埃希氏大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和鼠伤寒沙门氏菌3种致病菌的抑菌环直径,评价分离菌株... 

【文章来源】：中国农业科学. 2020,53(14)北大核心CSCD

【文章页数】：10 页

【部分图文】：

3株乳酸菌自凝集能力及其与致病菌的共凝集能力

溶血性试验结果显示，金黄色葡萄球菌（ATCC6538P）划线的血平板上菌落周围形成完全透明的溶血环（β型溶血），模式菌株嗜酸乳杆菌（ATCC 4356）和3株乳酸菌菌株划线的血平板上菌落周围无溶血现象，表明3株乳酸菌均无溶血性（图3）。食物来源的肠球菌存在单一或多重毒力因子，尽管其在益生性肠球菌中的发生率较低，另外，也有关于乳杆菌中存在毒力因子的报导，因此仍需对本试验中分离的两株肠球菌和一株黏膜乳杆菌进行毒力因子的分析，以评估其安全性。在本研究中，以乳酸菌分离株基因组DNA为模板，使用多对毒力因子相应引物进行PCR扩增，均未检测到毒力因子（图4）。图3 乳酸菌分离株的溶血性

乳酸菌分离株的溶血性

【参考文献】：
期刊论文
[1]大兴安岭地区野生动物养殖业的机遇、挑战与应对措施[J]. 郭玉荣,王利利,金煜.  野生动物. 2006(05)



本文编号：3232490