泌乳奶牛乳腺上皮细胞转录组对硬脂酸的应答

发布时间：2021-06-16 13:52

　　硬脂酸（SA）是研究饱和长链脂肪酸的理想模型。本研究的目的是确定外源添加的SA能否改变泌乳奶牛乳腺上皮细胞（DBMEC）中与乳成分合成相关的转录组,并构建应答SA的基因调控网络。首先,使用RT-PCR技术检测与乳成分合成相关基因的表达,SA能够显著上调参与脂肪酸转运（CD36）、细胞内运输（FABP3, FABP4）、细胞内长链脂肪酸激活（ACSL1）、去饱和（SCD）、甘油三酯合成（AGPAT6, GPAM, DGAT1, DGAT2, Lpinl）及脂生成转录调节（PPARG）的基因的表达,编码乳蛋白（CSN1S1, CSN1S2, CSN2, CSN3, MGLB, LALBA）、调控乳蛋白转录（JAK2）及与乳糖合成相关的基因（beta-1,4-GT1）表达也发生上调,而参与脂肪酸从头合成（FASN, ACACA）、其他脂代谢转录调节因子（SREBF1）以及乳蛋白合成翻译过程的基因（EIF4E-BP1, mTOR, S6K）的表达发生下调。SA增加了细胞及培养基中TG和乳糖含量,并使≥16C与<16C脂肪酸的比例、非饱和与饱和脂肪酸的比例显著上升,酪蛋白的含量显著减少。结... 

【文章来源】：中国农业科学院北京市

【文章页数】：95 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
Abstract
图表清单
第一章 ：绪论
    1. 乳脂的组成及来源
        1.1 乳脂的组成
        1.2 乳脂脂肪酸的组成及来源
    2. 脂肪酸对乳脂合成的调节
    3. MICRORNA与脂类代谢
        3.1 MicroRNAs对脂类代谢的影响
        3.2 脂肪酸对microRNA的调控
    4. 研究内容
第二章 ：泌乳相关转录组对硬脂酸的应答
    1. 前言
    2. 材料和方法
        2.1 样本制备
        2.2 乳主要成分分析
        2.3 乳成分合成相关基因表达与分析
        2.4 基因网络构建
        2.5 数据处理与分析
    3. 结果
        3.1 硬脂酸对甘油三酯合成的影响
        3.2 硬脂酸对乳蛋白合成的影响
        3.3 硬脂酸对乳糖合成的影响
        3.4 应答硬脂酸的乳合成相关基因网络
        3.5 蛋白质水平验证
    4. 讨论
        4.1 硬脂酸对甘油三酯合成的影响
        4.2 硬脂酸对葡萄糖利用及乳糖合成的影响
        4.3 硬脂酸对乳蛋白合成的影响
        4.4 基因网络与乳成分合成
    5. 小结
第三章 ：泌乳奶牛乳腺上皮细胞MICRORNAS的分析与鉴定
    1. 前言
    2. 材料和方法
        2.1 样本制备
        2.2 文库构建及测序
        2.3 PCR验证
    3. 结果与讨论
    4. 小结
第四章 ：硬脂酸改变泌乳奶牛乳腺上皮细胞MICRORNA表达谱
    1. 前言
    2. 材料和方法
        2.1 样本制备
        2.2 定制芯片检测
        2.3 PCR验证
        2.4 靶基因预测及GO、KEGG注释
        2.5 数据处理与分析
    3. 结果与讨论
    4. 小结
第五章 ：结论
参考文献
致谢
个人简介


【参考文献】：
期刊论文
[1]PTEN in liver diseases and cancer[J]. Marion Peyrou,Lucie Bourgoin,Michelangelo Foti.  World Journal of Gastroenterology. 2010(37)
[2]MicroRNA signatures in liver diseases[J]. Xian-Ming Chen, Department of Medical Microbiology and Immunology, Creighton University Medical Center, CrissⅡ Room 529, 2500 California Plaza, Omaha, NE 68178,United States.  World Journal of Gastroenterology. 2009(14)



本文编号：3233190