大豆球蛋白对仔猪小肠上皮细胞机械屏障功能的影响

发布时间：2021-06-19 12:08

　　本论文以纯化的大豆球蛋白（Glycinin）为试验材料,以体外培养的仔猪小肠上皮细胞为模型,研究纯化的大豆球蛋白对仔猪小肠上皮细胞活性、细胞通透性、细胞间紧密连接蛋白的分布及相关基因表达量的影响。试验一：仔猪小肠上皮细胞原代分离培养。采用组织块接种培养法和胶原酶Ⅳ消化法相结合进行原代分离培养,用相差贴壁法和相差消化法进行纯化,传代培养后用角蛋白8免疫组化方法进行鉴定。试验结果表明:使用组织块接种培养法和胶原酶Ⅳ消化法相结合可分离获得大量高活性的仔猪小肠上皮细胞,1-2天细胞贴壁且少量迁出,5～7天明显增殖,9-10天细胞汇合成单层,17-20天细胞呈“铺路石”状。经过形态学观察及免疫组化方法鉴定,95%以上细胞呈阳性。试验二：大豆球蛋白对仔猪小肠上皮细胞活性及通透性的影响。本试验比较了五个不同浓度大豆球蛋白添加水平（0mg/mL、0.5mg/mL、1.0mg/mL、2.0mg/mL、4.0mg/mL）对仔猪小肠上皮细胞活性和通透性的影响。不同处理组细胞同时培养24小时后,用MTT比色法检测不同浓度大豆球蛋白对仔猪小肠上皮细胞活性的影响。通过检测细胞跨膜电阻值（TEER）的变化和细胞培养... 

【文章来源】：吉林农业大学吉林省

【文章页数】：49 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
目录
前言
第一篇 文献综述
    第一章 大豆抗原蛋白研究进展
        1.1 大豆抗原蛋白的定义
        1.2 大豆抗原蛋白的分类及生物学特性
        1.3 大豆抗原蛋白的抗营养作用
        1.4 大豆抗原蛋白对肠道细胞的影响
    第二章 肠黏膜机械屏障的研究进展
        2.1 紧密连接蛋白的定义、分类及功能
        2.2 肠上皮细胞机械屏障中紧密连接的功能及作用
    第三章 细胞培养技术研究进展
        3.1 小肠上皮细胞分离培养方法的建立
        3.2 小肠上皮细胞的应用
第二篇 研究内容
    第一章 仔猪小肠上皮细胞体外分离培养
        1.1 材料与方法
        1.2 结果与分析
        1.3 讨论
        1.4 小结
    第二章 大豆球蛋白对仔猪小肠上皮细胞活性及通透性的影响
        2.1 材料与方法
        2.2 结果与分析
        2.3 讨论
        2.4 小结
    第三章 大豆球蛋白对仔猪肠上皮细胞紧密连接Z0-1和Occludin分布及基因表达的影响
        3.1 材料与方法
        3.2 结果与分析
        3.3 讨论
        3.4 小结
结论
参考文献
作者简介
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]急性肝内胆汁淤积大鼠小肠上皮紧密连接蛋白ZO-1和Occludin表达的变化[J]. 刘圣烜,黄志华,林莉.  实用儿科临床杂志. 2011(01)
[2]大豆抗原蛋白对小鼠肠上皮细胞的影响[J]. 徐君,王之盛,周安国.  饲料研究. 2010(06)
[3]早期断奶对仔猪肠通透性和肠上皮紧密连接蛋白Occludin mRNA表达的影响[J]. 刘海萍,胡彩虹,徐勇.  动物营养学报. 2008(04)
[4]鲫肠道上皮细胞原代培养方法的研究[J]. 宋增福,吴天星,潘晓东.  淡水渔业. 2008(01)
[5]大豆抗原蛋白的生物学特性及其对仔猪的过敏反应[J]. 游金明,王自蕊,瞿明仁,黎观红,潘珂.  饲料工业. 2007(21)
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[8]大豆抗原蛋白与水生动物肠道功能的关系[J]. 郭林英,周小秋.  水利渔业. 2006(01)
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[10]大豆抗原及其对仔猪和犊牛的影响[J]. 孙泽威,秦贵信,娄玉杰.  动物营养学报. 2005(01)

硕士论文
[1]新生山羊小肠上皮细胞系的建立[D]. 匡伟.扬州大学 2007
[2]肾小管上皮细胞原代培养及氧化应激凋亡模型的建立[D]. 廖晓星.江西医学院 2003



本文编号：3237783