1株猪源2009/H1N1流感病毒反向遗传系统的建立

发布时间：2021-06-20 18:13

　　为建立1株猪源2009/H1N1流感病毒A/swine/Heilongjiang/44/2009（HLJ44）的反向遗传系统,利用双向表达质粒p HW2000,分别构建了该病毒株8个基因节段的重组质粒,将其共转染于293T和MDCK混合培养的细胞,拯救出重组病毒R-HLJ44。测序结果表明,R-HLJ44与亲本病毒HLJ44的核苷酸序列完全一致;二者在细胞上具有相似的增殖特性;抗原性未发生变化;分别以106TCID50的剂量鼻腔感染BALB/c小鼠,结果显示R-HLJ44与亲本HLJ44在小鼠脏器中的复制滴度也基本一致。以上结果表明拯救的重组病毒保持了与亲本病毒一致的生物学特性。该病毒反向遗传系统的建立,为进一步研究H1N1亚型流感病毒的致病分子机制及新型疫苗研制等奠定了基础。 

【文章来源】：畜牧与兽医. 2017,49(01)北大核心

【文章页数】：4 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 病毒株和质粒
    1.2 主要试剂与材料
    1.3 引物设计
    1.4 重组质粒的构建
    1.5 病毒拯救
    1.6 拯救病毒的序列测定
    1.7 拯救病毒的TCID50测定
    1.8 拯救病毒的抗原性分析
    1.9 病毒感染小鼠的致病性试验
2 结果
    2.1 重组病毒的拯救
    2.2 病毒的滴度测定
    2.3 病毒的抗原性分析
    2.4 病毒对小鼠的致病性测定
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]反向遗传学技术在流感病毒研究和防控中的应用[J]. 李呈军,陈化兰.  中国科学:生命科学. 2015(10)
[2]一株类禽型H1N1亚型猪流感病毒的反向遗传系统的建立[J]. 孟沙沙,乔传玲,陈艳,杨焕良,刘丽萍,尹航,辛晓光,陈化兰.  中国预防兽医学报. 2013(02)



本文编号：3239686