香芪汤对内毒素血症小鼠凝血因子的影响

发布时间：2017-04-24 16:15

  本文关键词：香芪汤对内毒素血症小鼠凝血因子的影响，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目前在兽医临床上,以大肠杆菌、沙门氏菌等革兰氏阴性杆菌为病原的家畜传染病占有相当大的比例。革兰氏阴性杆菌释放的内毒素可以进入血液循环,形成内毒素血症,进而诱发动物机体出现内毒素性休克、炎症反应综合征(systemic inflammatory response syndrome,SIS)、弥漫性血管内凝血(disseminated intravascular coagulation, DIC)等病理变化,可以影响家畜生长性能,进而影响家畜的经济价值。炎症反应与凝血/抗凝血反应息息相关,炎症可促发凝血反应;凝血反应可加重炎症反应；抗凝血反应也可拈抗炎症反应。香芪汤由香附(Rhizoma Cyperi)、黄芪(Astragalus membranaceus)、穿心莲(Andrographis paniculata)以4：3：3为比例组成的中药复方。前期研究表明其能减少大肠杆菌病鸡血清中TNF-α、sEPCR的表达,显示该方剂具有抗炎和抗凝血的功效。本研究以内毒素血症小鼠为模型,进一步研究香芪汤及其单味中药香附、黄芪、穿心莲对内毒素血症小鼠凝血因子表达的影响。主要研究方法、结果如下：1、建立内毒素血症小鼠模型：将无菌生理盐水按0.1 ml/10g体重腹腔注射给空白组小鼠；将LPS (0.25mg/ml)、LPS (0.5mg/ml)、LPS (1.0mg/ml)按0.1 m1/10g体重分别腹腔注射给低剂量组、中剂量组、高剂量组小鼠。发现各模型组小鼠在注射后1h均出现蜷缩、扎堆、闭目等现状,体温下降,眼周红、眼角湿润,粪便稀溏等症状。随着LPS浓度的增加,粪便不成形程度、皮毛松散程度增加,24 h后低剂量、中剂量小鼠恢复正常,36h后高剂量组小鼠恢复正常。各模型组小鼠IL-6、ICAM-1、 VCAM-1的表达量升高,EPCR的表达量显著减少。LPS浓度越高,EPCR的表达量越少。通过比较IL-6、ICAM-1、VCAM-1、EPCR的表达,确定内毒素血症小鼠模型所需LPS溶液的浓度为0.5 mg/ml。2、香芪汤及其单味中药对内毒素血症小鼠精神状态的观察：将无菌蒸馏水按0.1mm1/10g体重灌服给空白组、内毒素模型组,1次/d,连用7 d。将香附(0.1 g/m1)、黄芪(0.075 g/m1)、穿心莲(0.075 g/m1)、香芪汤(0.25 g/m1)按0.1 m1/10g体重分别灌服给香附组、黄芪组、穿心莲组、香芪汤组,1次/d,连用7 d。将无菌蒸馏水按0.1 mml/log体重灌服给地塞米松组,连用4 d,第5 d,换用醋酸地塞米松溶液(0.2mg/ml)灌服,连用3 d。第8 d,按0.1 ml/10g体重给空白组腹腔注射无菌生理盐水,其余各组按0.1 ml/10g体重均注射0.5 mg/ml LPS溶液。发现内毒素模型组小鼠在注射LPS1h后出现蜷缩、扎堆、闭目等现状,体温下降,眼周红、湿润,粪便稀溏等情况,24 h后恢复正常。用药各组小鼠在注射LPS溶液12h内出现蜷缩、扎堆,粪便湿润但有形等情况,12h后恢复正常。香附、黄芪、穿心莲及香芪汤能使内毒素血症小鼠体温在正常范围内。3、香芪汤及其单味中药对内毒素血症小鼠凝血因子影响的研究：Western Blot法检测可知,内毒素血症小鼠sAPP、TF、sEPCR的表达量明显升高,tPA的表达量明显降低。用香附、黄芪、穿心莲及香芪汤进行干预,均能不同程度降低sAPP、TF、 sEPCR的表达,不降低tPA的表达,起到保护血管内皮、保护PC抗凝途径、保护纤溶系统的作用。4、香芪汤及其单味中药对内毒素血症小鼠作用机理的初探：Western Blot法检测可知,内毒素血症小鼠AD AM17、MAPKs、PKC delta的表达量显著升高。用香附、黄芪、穿心莲及香芪汤进行干预,均能不同程度降低AD AM17、MAPKs、PKC delta的表达。结果表明,香芪汤及其单味中药能减少血管上MAPKs、PKC delta的表达,使ADAM17的活化受到抑制,进而使EPCR的脱落减少,起到保护血管内皮、增强机体抗凝的作用。
【关键词】：小鼠 内毒素血症 炎症 凝血 香芪汤
【学位授予单位】：四川农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S853.7
【目录】：

• 摘要5-7
• Abstract7-10
• 缩写词表10-13
• 第一篇 选题背景与文献综述13-23
• 第一章 选题背景13-14
• 第二章 文献综述14-23
• 1 内毒素血症的研究进展14-18
• 1.1 内毒素血症的分类14-15
• 1.2 内毒素的作用机制15-16
• 1.3 内毒素血症的治疗方法16-18
• 2 凝血反应的研究进展18-21
• 2.1 炎症反应促发凝血反应18-21
• 2.2 凝血反应加重炎症反应21
• 2.3 抗凝血反应拮抗炎症反应21
• 3 香芪汤及组成其单味中药的研究近况21-23
• 3.1 香附21-22
• 3.2 黄芪22
• 3.3 穿心莲22-23
• 第二篇 研究内容23-53
• 第一章 内毒素血症模型的建立23-35
• 1 材料与方法23-29
• 1.1 试验动物23
• 1.2 主要仪器23-24
• 1.3 主要试剂24
• 1.4 试验方法24-29
• 2 试验结果29-33
• 2.1 小鼠一般情况29
• 2.2 LPS对小鼠直肠体温的影响29
• 2.3 LPS对小鼠脏器指数的影响29-31
• 2.4 LPS对小鼠炎性因子表达的影响31-32
• 2.5 LPS对小鼠胸主动脉EPCR表达的影响32-33
• 3 分析与讨论33-34
• 小结34-35
• 第二章 香芪汤及其单味中药对内毒素血症小鼠凝血因子的影响35-45
• 1 材料与方法35-39
• 1.1 试验动物35
• 1.2 主要试剂与药品35-36
• 1.3 试验方法36-39
• 2 试验结果39-42
• 2.1 小鼠一般情况39
• 2.2 香芪汤及其单味中药对内毒素血症小鼠直肠体温的影响39-40
• 2.3 香芪汤及其单味中药对内毒素血症小鼠sAPP表达的影响40
• 2.4 香芪汤及其单味中药对内毒素血症小鼠TF、sEPCR、tPA表达的影响40-42
• 3 分析与讨论42-44
• 小结44-45
• 第三章 香芪汤及其单味中药对内毒素血症小鼠作用机理初探45-53
• 1 材料与方法45-46
• 1.1 试验动物45
• 1.2 主要试剂45
• 1.3 试验方法45-46
• 2 试验结果46-50
• 2.1 香芪汤及其单味中药对内毒素血症小鼠ADAM17表达的影响46-47
• 2.2 香芪汤及其单味中药对内毒素血症小鼠MAPKs表达的影响47-49
• 2.3 香芪汤及其单味中药对内毒素血症小鼠PKC delta表达的影响49-50
• 3 分析与讨论50-52
• 小结52-53
• 第三篇 结论与创新性53-54
• 参考文献54-64
• 致谢64-65
• 附图65-74

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