uPA与uPAR对体外培养牛卵母细胞核成熟的影响

发布时间：2021-06-25 04:01

　　为了探明尿激酶型纤溶酶原激活剂（uPA）与其特异性受体uPAR对体外牛卵母细胞核成熟的可能作用,本研究采用免疫组织化学染色技术探讨了未成熟的牛卵丘-卵母细胞复合体（cumulus-oocyte complexes,COCs）中uPA和uPAR的蛋白定位与表达;采用地衣红染色技术研究了体外成熟培养3h、6h与12h后uPA对牛卵母细胞核成熟进程的可能影响;采用竞争性酶联免疫吸附技术检测了体外成熟培养6h后uPA、Amiloride（uPA活性抑制剂）与uPAR一抗对牛COCs和牛卵母细胞中cAMP水平变化的可能调节作用。结果表明:（1）uPAR在牛卵丘与卵母细胞上均有表达,而uPA仅在卵丘细胞上表达。（2）与对照组相比较,添加外源uPA分别处理3h、6h与12h后,牛卵母细胞核成熟进程均被显著延迟（P<0.05）;该作用可以被uPA活性抑制剂Amiloride抵消。（3）体外成熟6h后,添加外源uPA能够提升牛COCs与卵母细胞中cAMP水平,与对照组相比差异显著（P<0.05）;同时利用Amiloride抑制uPA活性与uPAR抗体阻断受体信号后,uPA对cAMP的促进作用... 

【文章来源】：内蒙古农业大学内蒙古自治区

【文章页数】：46 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

卵母细胞的形成

图 2 环腺苷酸的分子结构Fig.2 The molecular structure of cAMP[76]AMP 在卵母细胞发育及卵泡发生中的作用细胞成熟的前提条件是卵母细胞具有恢复被卵泡环境阻滞在 GV的能力。研究发现，卵泡细胞中的 cAMP 是维持卵母细胞减数分[58]。卵母细胞中高水平的 cAMP 会使卵母细胞维持在核网期，而平会使其具有第一次减数分裂恢复能力[45]。卵母细胞中由 cAMP同调控其含量，且这两种酶又同时受到它们上游其他分子、激素作用[59]。cAMP 不仅能够影响卵母细胞和卵泡的发育，而且在卵起到极为重要的作用。研究发现，在排卵前 LH 峰的作用下，使P 水平骤升，从而促进卵母细胞减数分裂的恢复[58,60]；然而，在在高水平 cAMP 的前提下才可以实现维持卵母细胞减数分裂停滞减数分裂恢复过程中的卵母细胞内低水平 cAMP 与其周围卵丘P 同时存在。

uPA和uPAR蛋白在牛卵丘-卵母细胞复合体中的表达Fig.3ExpressionofuPAanduPARproteinsinonebovinecumulus-oocytecomplex


本文编号：3248450