阴道毛滴虫诱导THP-1细胞产生胞外陷阱的研究

发布时间：2021-06-29 22:00

　　阴道毛滴虫在世界范围内分布广泛感染率较高,可能是最常见的通过性传播的人兽共患原虫。阴道毛滴虫一般寄生在人体内,也可以感染猴等动物。人感染阴道毛滴虫后,会产生阴道炎及尿道炎等症状,并且阴道毛滴虫感染与艾滋病病毒、乳头瘤病毒、单纯疱疹病毒的感染有关^[1]。胞外陷阱对机体抵御病原入侵具有重要作用,已有研究发现牛艾美尔球虫、新孢子虫、弓形虫等原虫刺激免疫细胞产生了胞外陷阱。胞外陷阱可以捕获入侵的原虫,并且有些胞外陷阱对原虫具有杀伤作用^[2]。贾第虫也可刺激免疫细胞产生胞外陷阱^[3],但是同为鞭毛虫的阴道毛滴虫是否能刺激细胞产生胞外陷阱并释放活性氧（ROS）等物质阻碍病原入侵,目前尚未见报道。THP-1细胞是人外周血单核细胞系,本试验应用扫描电子显微镜观察了阴道毛滴虫刺激THP-1细胞产生的胞外陷阱;应用激光共聚焦检测了阴道毛滴虫刺激THP-1细胞产生的胞外陷阱的成分;应用活性氧检测试剂盒检测了阴道毛滴虫刺激THP-1细胞产生胞外陷阱时ROS的水平;应用乳酸脱氢酶（LDH）检测试剂盒检测了阴道毛滴虫刺激THP-1细胞产生胞外陷阱时... 

【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：86 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

阴道毛滴虫诱导产生的胞外陷阱扫描电子显微镜检测结果

第二篇 研究内容 第 1 章 阴道毛滴虫刺激 THP-1 细胞产生胞外陷阱的检测.2 阴道毛滴虫诱导产生的胞外陷阱激光共聚焦检测结果胞外陷阱的基本成分包括 DNA、MPO、H3。为了进一步证明阴道毛滴激 THP-1 细胞产生了胞外陷阱，我们用阴道毛滴虫：THP-1：2:1 的比例刺HP-1 细胞 1 小时。随后使用抗组蛋白 H3 的单克隆抗体作为一抗，使用带色荧光标签的抗体分别标记 H3 和 MPO。最后用带有红色荧光标签的 DN料 SYTOX Orange 进行染色，并在激光共聚焦显微镜下分别进行 H3、M DNA 的共定位。如图可知，通过 MPO 与 DNA 的共定位，可以观察到 TH胞释放胞外陷阱捕获了阴道毛滴虫（图 1.2a，2b，2c），通过 H3 与 DNA定位，可以观察到 THP-1 细胞释放的细长的胞外陷阱（图 1.2d，2e，2f）。

e merges;活性氧（ROS）的检测为了检测阴道毛滴虫刺激 THP-1 细胞产生胞外陷阱时是否产生了活验采用 ROS 检测试剂盒对其进行了检测。将 DCFH-DA 探针装载至 T后洗去没有装载上的探针，以 THP-1：阴道毛滴虫：2:1 的比例刺激 T 1h，然后在荧光酶标仪上检测荧光强度。酵母聚糖（Zymosan）与佛蔻乙酸酯（PMA）是目前公认的诱导胞外陷阱产生的阳性刺激物，本酵母聚糖（Zymosan）作为诱导产生胞外陷阱的阳性刺激物。结果表滴虫刺激组和酵母聚糖（Zymosan）刺激组的 ROS 产生量显著提高，照组相比差异显著。这说明阴道毛滴虫刺激 THP-1 细胞产生胞外陷阱 ROS（图 1.3）。

【参考文献】：
期刊论文
[1]抗阴道毛滴虫AP33单克隆抗体的制备及其功能初探[J]. 黄慧聪,俞石芳,蔡敏,谭峰,郑晓云,潘长旺.  中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2007(02)



本文编号：3257240