抗微小隐孢子虫Apple、Ricin B结构域单克隆抗体的制备及初步定位

发布时间：2021-07-02 13:02

　　隐孢子虫（Cryptosporidium）是一种属于顶复门原虫的机会性寄生虫,可以侵入不同哺乳动物包括人类的小肠上皮细胞内。隐孢子虫病可导致剧烈的肠炎而引起水泻,在免疫缺陷的个体可导致死亡。隐孢子虫病是6种世界最常见腹泻病之一,该病分布广泛、危害严重。子孢子和裂殖子是隐孢子虫的侵入时期,首先通过虫体顶端的亚细胞结构（棒状体、微线体和致密颗粒）分泌的蛋白选择性的粘附在肠上皮细胞表面,使肠上皮细胞膜发生内陷形成纳虫空泡,从而使虫体进入细胞膜内并包裹在纳虫空泡内,可以逃避机体的免疫应答反应和药物作用。本实验为了发现更多微小隐孢子虫黏附相关蛋白,通过结构域检索确定包含Apple和Ricin B结构域基因,并对选定的结构域基因进行克隆及原核表达,以纯化后的GST-Apple和GST-RicinB重组蛋白为免疫原,对Balb/c小鼠进行免疫,将效价较高的小鼠利用杂交瘤技术制备单克隆抗体,并用Western blot鉴定其特异性。从而利用制备的高特异性单克隆抗体对微小隐孢子虫卵囊中的Apple和Ricin B结构域蛋白进行定位。通过条件摸索发现Apple和Ricin B结构域蛋白均用0.1mmol/... 

【文章来源】：吉林农业大学吉林省

【文章页数】：53 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
目录
英文缩写
前言
第一篇 文献综述
    第一章 微小隐孢子虫主要粘附蛋白研究进展
第二篇 研究内容
    第一章 微小隐孢子虫含Apple、Ricin B结构域基因的原核表达及纯化
        1.1 材料
        1.2 方法
        1.3 结果
        1.4 讨论
        1.5 小结
    第二章 抗微小隐孢子虫Apple、Ricin B结构域蛋白单克隆抗体的制备
        2.1 材料
        2.2 方法
        2.3 结果
        2.4 讨论
        2.5 小结
结论
参考文献
作者简介
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]弓形虫侵入宿主细胞的研究进展[J]. 李学瑞,王艳华,赵象忠,张德林.  中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2007(02)
[2]核糖体失活蛋白的研究进展[J]. 李建国.  分子植物育种. 2005(04)
[3]隐孢子虫病免疫学研究进展[J]. 菅复春,张龙现,宁长申,孙铭飞,闫文朝,邵兆霞.  动物医学进展. 2005(06)
[4]微小隐孢子虫子孢子表面抗原CP23融合蛋白在大肠杆菌的表达[J]. 何宏轩,张西臣,欧阳红生,尹继刚,李吉平,李建华,杨举.  中国人兽共患病杂志. 2003(03)
[5]微小隐孢子虫CP23基因真核表达载体的构建及表达[J]. 何宏轩,张西臣,欧阳红生,尹继刚,李建华.  寄生虫与医学昆虫学报. 2003(01)



本文编号：3260518