发酵当归补血汤对肉鸡生长性能和肠道微生物菌群多样性的影响研究
发布时间：2021-07-02 14:02
当归补血汤（DBT）是中医药经典方剂之一,具有一定的补气补血和免疫增强等功效。但DBT在兽医临床应用较少,且效果不明确,尤其对DBT中药发酵产物作为饲料添加剂研究尚处空白。本论文拟开展枯草芽孢杆菌（B.subtilis）发酵DBT的工艺研究,利用高效液相色谱（HPLC）法测定DBT发酵前、后相关活性成分含量变化,明确DBT发酵产物对肉鸡生长、免疫、抗氧化性能和小肠绒毛形态的影响,以及对SD大鼠肠道菌群多样性的调控作用,旨在为DBT发酵产物作为新型饲料添加剂提供理论依据。1.B.subtilis发酵DBT的工艺参数优化。采用单因素和Box-Behnken中心组合试验考察了发酵培养基组分、菌液接种量和发酵时间对多糖提取率的影响。最终确定最佳发酵工艺条件为葡萄糖添加量0.95%,蛋白胨添加量1.52%,接种量2.92%,发酵时间35.8 h。该条件下多糖提取率达到9.23±0.067%,高于未发酵组（4.6±0.057%）。2.HPLC法测定DBT发酵前、后相关活性成分的含量变化。采用HPLC-DAD法测定阿魏酸和毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量,使用Agilent ZORBAX Eclipse X...
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：69 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
发酵菌种生长曲线图
中国农业科学院硕士学位论文第二章响应面法优化DBT液体发酵工艺11图2-1发酵菌种生长曲线图Fig.2-1Growthcurveoffermentationbacterias2.4.2发酵菌种及DBT添加量的筛选结果图2-2不同发酵菌种及DBT添加量对多糖提取率的影响Fig.2-2EffectofdifferentfermentationstrainsandtheamountofDBTaddedontheextractionrateofpolysaccharide.由图2-2（a）可知,B.subtilis发酵DBT的多糖提取率达到了6.80%，优于植物乳杆菌和产朊假丝酵母的发酵效果。因此，选择B.subtilis作为以下试验中的发酵菌种。由图2-2（b）可知DBT多糖提取率随DBT添加量的增加呈现先升高后降低的趋势，当DBT提取率为6%时最高，为7.00%。因此，选择6%作为发酵优化中DBT的最佳添加量。
中国农业科学院硕士学位论文第二章响应面法优化DBT液体发酵工艺122.4.3标准曲线的建立利用DNS法测定还原糖，以吸光度为纵坐标，葡萄糖浓度(g/L)为横坐标分别绘制标准曲线，得到y=0.7754x+0.0513，R2=0.9999，线性关系良好，可用于还原糖含量测定；苯酚硫酸法测定总糖，以吸光度为纵坐标，葡萄糖浓度(g/L)为横坐标绘制标准曲线，得到y=3.8586x+0.0662，R2=0.9987，线性关系良好，用于总糖含量测定。2.4.4单因素试验由图2-3(a)、2-3(b)可知，葡萄糖和蛋白胨添加量分别在0.5%~1.0%和0.5%~1.5%之间时，多糖提取率随着添加量的增加而增大，在1.0%和1.5%时达到最大，多糖提取率分别为7.7%和8.2%，当葡萄糖和蛋白胨添加量分别大于1.0%和1.5%时，随着添加量的增加，多糖提取率呈现下降趋势。因此，培养基中葡萄糖和蛋白胨最适添加量分别为1.0%和1.5%。由图2-3(c)、2-3(d)可知，最适接种量和最佳发酵时间分别为3%和36h时，多糖提取率达到最大。图2-3葡萄糖、蛋白胨添加量，接种量及发酵时间对DBT多糖提取率的影响Fig.2-3Effectofglucoseandpeptoneaddition,inoculumvolume,andfermentationtimeontheextractionrateofDBTpolysaccharide
【参考文献】：
期刊论文
[1]阿魏酸通过修复线粒体分裂-融合失衡机制改善Aβ诱导的AD模型小鼠学习记忆障碍[J]. 王倩,秦伟伟,张杰文. 中国药学杂志. 2019(09)
[2]补中益气汤发酵制剂对肉鸡血清生化指标及抗氧化性能的影响[J]. 张桂枝,靳双星,王学强,张潇. 中国家禽. 2019(07)
[3]冷应激对兔波氏杆菌感染传播的影响[J]. 刘燕,袁律峰,季权安,韦强,肖琛闻,李科,黄叶娥,鲍国连. 农业生物技术学报. 2019(02)
[4]HPLC-UV-ELSD法同时测定黄芪中黄芪皂苷和黄酮类成分[J]. 史鑫波,唐志书,刘妍如,宋忠兴,陈衍斌,苏瑞,许刚,王升. 天然产物研究与开发. 2019(03)
[5]微生物发酵中草药及其活性物质的研究进展[J]. 艾素,汤伟,郭若琳,李纪前,杨梧,何增国. 中国中药杂志. 2019(06)
[6]响应面优化黄芪多糖的提取工艺[J]. 梁子敬,张景艳,冯海鹏,张凯,王磊,王旭荣,张康,李建喜. 食品研究与开发. 2018(21)
[7]中药对肠道菌群的调节作用[J]. 于岚,邢志凯,米双利,吴霞. 中国中药杂志. 2019(01)
[8]黄芩苷发酵转化成黄芩素和千层纸素A的黄芩内生真菌的筛选及鉴定[J]. 马宗敏,刘佳,段绪红,孙国强,黄璐琦,裴林. 中国实验方剂学杂志. 2019(09)
[9]中药复方多糖对不同MHC B-Lβ Ⅱ基因型蛋鸡免疫活性的影响[J]. 刘晓婷,朱晓庆,杨莉,马昭,乔彦杰,张保军,谷新利,商云霞. 西北农业学报. 2018(09)
[10]长期服用人参提取物对大鼠肠道菌群结构的影响[J]. 孙艺凡,张霞,王晓艳,贾伟. 中国中药杂志. 2018(19)
硕士论文
[1]植物乳杆菌发酵中药复方工艺优化及对小鼠肠道菌群的作用研究[D]. 赵唐.兰州大学 2019
[2]益生菌发酵中药产抗氧化美白成分[D]. 李瑜.江南大学 2018
[3]百菌清水解脱氯酶（Chd）的枯草芽孢杆菌分泌表达、发酵优化及应用[D]. 孟超.南京农业大学 2015
[4]黄芪多糖的发酵提取工艺优化及其对小鼠树突状细胞体外成熟的影响[D]. 尚利明.中国农业科学院 2014
[5]益生菌发酵健胃消食片药渣及其对脾虚小鼠肠道调整功能的初步研究[D]. 李祖旭.南昌大学 2012
本文编号：3260603
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：69 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
发酵菌种生长曲线图
中国农业科学院硕士学位论文第二章响应面法优化DBT液体发酵工艺11图2-1发酵菌种生长曲线图Fig.2-1Growthcurveoffermentationbacterias2.4.2发酵菌种及DBT添加量的筛选结果图2-2不同发酵菌种及DBT添加量对多糖提取率的影响Fig.2-2EffectofdifferentfermentationstrainsandtheamountofDBTaddedontheextractionrateofpolysaccharide.由图2-2（a）可知,B.subtilis发酵DBT的多糖提取率达到了6.80%，优于植物乳杆菌和产朊假丝酵母的发酵效果。因此，选择B.subtilis作为以下试验中的发酵菌种。由图2-2（b）可知DBT多糖提取率随DBT添加量的增加呈现先升高后降低的趋势，当DBT提取率为6%时最高，为7.00%。因此，选择6%作为发酵优化中DBT的最佳添加量。
中国农业科学院硕士学位论文第二章响应面法优化DBT液体发酵工艺122.4.3标准曲线的建立利用DNS法测定还原糖，以吸光度为纵坐标，葡萄糖浓度(g/L)为横坐标分别绘制标准曲线，得到y=0.7754x+0.0513，R2=0.9999，线性关系良好，可用于还原糖含量测定；苯酚硫酸法测定总糖，以吸光度为纵坐标，葡萄糖浓度(g/L)为横坐标绘制标准曲线，得到y=3.8586x+0.0662，R2=0.9987，线性关系良好，用于总糖含量测定。2.4.4单因素试验由图2-3(a)、2-3(b)可知，葡萄糖和蛋白胨添加量分别在0.5%~1.0%和0.5%~1.5%之间时，多糖提取率随着添加量的增加而增大，在1.0%和1.5%时达到最大，多糖提取率分别为7.7%和8.2%，当葡萄糖和蛋白胨添加量分别大于1.0%和1.5%时，随着添加量的增加，多糖提取率呈现下降趋势。因此，培养基中葡萄糖和蛋白胨最适添加量分别为1.0%和1.5%。由图2-3(c)、2-3(d)可知，最适接种量和最佳发酵时间分别为3%和36h时，多糖提取率达到最大。图2-3葡萄糖、蛋白胨添加量，接种量及发酵时间对DBT多糖提取率的影响Fig.2-3Effectofglucoseandpeptoneaddition,inoculumvolume,andfermentationtimeontheextractionrateofDBTpolysaccharide
【参考文献】：
期刊论文
[1]阿魏酸通过修复线粒体分裂-融合失衡机制改善Aβ诱导的AD模型小鼠学习记忆障碍[J]. 王倩,秦伟伟,张杰文. 中国药学杂志. 2019(09)
[2]补中益气汤发酵制剂对肉鸡血清生化指标及抗氧化性能的影响[J]. 张桂枝,靳双星,王学强,张潇. 中国家禽. 2019(07)
[3]冷应激对兔波氏杆菌感染传播的影响[J]. 刘燕,袁律峰,季权安,韦强,肖琛闻,李科,黄叶娥,鲍国连. 农业生物技术学报. 2019(02)
[4]HPLC-UV-ELSD法同时测定黄芪中黄芪皂苷和黄酮类成分[J]. 史鑫波,唐志书,刘妍如,宋忠兴,陈衍斌,苏瑞,许刚,王升. 天然产物研究与开发. 2019(03)
[5]微生物发酵中草药及其活性物质的研究进展[J]. 艾素,汤伟,郭若琳,李纪前,杨梧,何增国. 中国中药杂志. 2019(06)
[6]响应面优化黄芪多糖的提取工艺[J]. 梁子敬,张景艳,冯海鹏,张凯,王磊,王旭荣,张康,李建喜. 食品研究与开发. 2018(21)
[7]中药对肠道菌群的调节作用[J]. 于岚,邢志凯,米双利,吴霞. 中国中药杂志. 2019(01)
[8]黄芩苷发酵转化成黄芩素和千层纸素A的黄芩内生真菌的筛选及鉴定[J]. 马宗敏,刘佳,段绪红,孙国强,黄璐琦,裴林. 中国实验方剂学杂志. 2019(09)
[9]中药复方多糖对不同MHC B-Lβ Ⅱ基因型蛋鸡免疫活性的影响[J]. 刘晓婷,朱晓庆,杨莉,马昭,乔彦杰,张保军,谷新利,商云霞. 西北农业学报. 2018(09)
[10]长期服用人参提取物对大鼠肠道菌群结构的影响[J]. 孙艺凡,张霞,王晓艳,贾伟. 中国中药杂志. 2018(19)
硕士论文
[1]植物乳杆菌发酵中药复方工艺优化及对小鼠肠道菌群的作用研究[D]. 赵唐.兰州大学 2019
[2]益生菌发酵中药产抗氧化美白成分[D]. 李瑜.江南大学 2018
[3]百菌清水解脱氯酶（Chd）的枯草芽孢杆菌分泌表达、发酵优化及应用[D]. 孟超.南京农业大学 2015
[4]黄芪多糖的发酵提取工艺优化及其对小鼠树突状细胞体外成熟的影响[D]. 尚利明.中国农业科学院 2014
[5]益生菌发酵健胃消食片药渣及其对脾虚小鼠肠道调整功能的初步研究[D]. 李祖旭.南昌大学 2012
本文编号：3260603
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