猫杯状病毒GX2019的分离鉴定及全基因克隆遗传进化分析

发布时间：2021-07-04 04:05

　　从南宁某宠物医院疑似感染猫杯状病毒（Feline calicivirus,FCV）猫鼻咽拭子中,利用F81细胞分离1株FCV后,RT-PCR和电镜鉴定,测定TCID₅₀和理化性质。同时利用RT-PCR分段扩增病毒全基因序列,进行同源性及遗传进化分析。结果显示,FCV GX2019分离株的TCID₅₀为1×10^-8.67/0.1 mL,基因组全长为7 687 bp,与FCV CH-JL4（长春株）毒株核苷酸序列相似性最高,为85.3%,属于同一分支。氨基酸分析表明,与国内FCV疫苗株255、国外FCV疫苗株F9、FCV跛行综合征株2280及FCV GX01分离株氨基酸变异率分别为46.7%、26.7%、53.3%、40.0%,其中B细胞抗原识别表位中氨基酸位点发生了改变。 

【文章来源】：中国兽医科学. 2020,50(07)北大核心CSCD

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

病变的F81细胞

将处理过的样品分别接种F81细胞、Vero细胞及BHK细胞，盲传3代，发现F81细胞出现变圆、拉丝、脱落、细胞聚集在一起呈葡萄串样（见图1、图2）。当病变达到80%以上时，将病变细胞反复冻融后，利用表1中鉴定引物对FCV-JDF1+FCV-JDR1进行RT-PCR扩增，结果可扩增出大小约924 bp的片段，与预期结果相符。将测序结果进行BLAST比对，结果与FCV其他参考株同源性高达80%以上，确定分离株为FCV，命名为GX2019。图2 病变的F81细胞

FCV VP1基因序列系统进化树

【参考文献】：
期刊论文
[1]猫杯状病毒的分离鉴定及其对理化因素抵抗力的研究[J]. 黄倩倩,刘家森,田进,孔德生,曲连东.  中国兽医科学. 2015(04)
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[3]猎豹与虎猫杯状病毒的分离及其超变区基因比较研究[J]. 高玉伟,夏咸柱,扈荣良,黄耕,徐春忠,王铁东.  中国预防兽医学报. 2003(03)
[4]老虎感染猫传染性鼻-结膜炎病毒的研究[J]. 范泉水,夏咸柱,邱薇,黄耕,何洪彬,张建滨,乔军,余春,邹啸环,李金钟,武银莲,殷震.  中国病毒学. 2000(04)



本文编号：3263995