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IRF3/7介导的先天性免疫对HY12肠道病毒复制的影响

发布时间:2021-07-11 10:07
  牛肠道病毒(Bovine enterovirus,BEV)与柯萨奇病毒(Coxsackievirus,CA)、肠道病毒71型(Enterovirus,EV)、脊髓灰质炎病毒(Poliovirus,PV)等同属于小RNA病毒科(Picornaviridae)肠道病毒属(Enterovirus)中的成员。BEV感染主要引起牛的消化道和呼吸道症状,严重威胁养牛业的健康发展。2012年本实验室从吉林省某牛场伴有咳嗽、腹泻等临床症状的病牛体内分离到国内首株E种肠道病毒,命名为HY12。由于BEV感染是国内新发传染病,有关其致病机理及宿主抗病毒反应的免疫机制等众多问题仍不清楚。本研究以HY12病毒感染RAW264.7细胞和ICR小鼠为研究模型,通过免疫学、分子生物学、组织病理学、免疫组织化学等方法对HY12病毒感染后IFNs、IRF3、IRF7、主要TLRs的表达情况进行了检测。体内和体外实验结果表明,HY12病毒感染可以诱导IFN-I(IFN-α和IFN-β)的产生,且IFN-I的表达呈时间依赖性。进一步探究IFN-I产生的分子机制,发现HY12病毒感染后TLR3和TLR7的表达与IFN-α和I... 

【文章来源】:吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:79 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

IRF3/7介导的先天性免疫对HY12肠道病毒复制的影响


Toll样受体介导的信号转导

病毒感染,细胞,时间依赖性,蛋白表达


2.1 HY12 病毒感染 RAW264.7 细胞 IFN-I mRNA 表达** P<0.01。图 2.2 Western blot 检测 IFNs 表达情况与 HY12 病毒感染 8 h 的细胞 IFNs 蛋白表达结果; B: I与 -tubulin 蛋白的比值(** P<0.01)。素的产生呈时间依赖性

病毒感染,蛋白表达,细胞,蛋白


图 2.2 Western blot 检测 IFNs 表达情况常细胞与 HY12 病毒感染 8 h 的细胞 IFNs 蛋白表达结果; B: IFNs 蛋白与 -tubulin 蛋白的比值(** P<0.01)。 I 型干扰素的产生呈时间依赖性为了进一步确定 HY12 病毒感染后,IFNs 产生的规律。我们分别提取2 病毒不同时间点(2、4、8、12 和 24 hpi)细胞的 RNA 及蛋白用于检测达。qRT-PCR 结果可见(如图 2.3),与未感染细胞(0 h)相比,IFβ 的表达在感染后 2 h 显著增加,8 h 达到高峰,12 h 降至正常水平,2零(低于正常水平)。而 IFN-II 在 HY12 病毒感染不同时间点后,细胞无显著变化。此外,我们通过 Western blot 方法进一步验证了上述结果4 所示,在 HY12 病毒感染后,细胞内不同时间点 IFNs 的蛋白表达与 趋势一致。

【参考文献】:
期刊论文
[1]山东省某地区牛、羊肠道病毒感染的流行病学调查[J]. 李欣,胡俊英,林倩,王旭,郑博伟,张泽财,胡莉萍,王新平.  中国兽医学报. 2019(02)
[2]The Scorpion Venom Peptide Smp76 Inhibits Viral Infection by Regulating Type-Ⅰ Interferon Response[J]. Zhenglin Ji,Fangfang Li,Zhiqiang Xia,Xingchen Guo,Minjun Gao,Fang Sun,Yuting Cheng,Yingliang Wu,Wenxin Li,Syed Abid Ali,Zhijian Cao.  Virologica Sinica. 2018(06)
[3]牛肠道病毒的病原学特征及检测技术研究进展[J]. 庄金秋,梅建国,刘吉山,张颖,莫玲,沈志强.  中国奶牛. 2018(06)
[4]一株牛肠道病毒的分离与鉴定[J]. 宋文凤,向文杰,林俊,李德栋,陈瑞红,朱远茂,薛飞.  中国动物传染病学报. 2018(03)
[5]牛肠道病毒北京株的分离鉴定及全基因组分析[J]. 张姗,李晓轩,侯绍华,鑫婷,林湛椰,袁万哲,孙继国.  中国兽医科学. 2018(07)
[6]MyD88非依赖性信号通路在枸杞多糖抑制糖尿病小鼠肿瘤坏死因子α中的作用[J]. 刘婷婷,王凌霄,杨晓辉,姚智卿,蔡慧珍.  浙江大学学报(医学版). 2018(01)
[7]牛肠道病毒3D抗体与感染相关性研究[J]. 周萍萍,张海丽,安东,廉乐乐,李嘉,高明春,王君伟.  黑龙江畜牧兽医. 2018(03)
[8]吉林省不同地区牛肠道病毒遗传变异分析[J]. 刘亚静,李欣,张群,赵又霓,贾英琪,鲁海冰,郭昌明,朱利塞,王新平.  中国兽医学报. 2018(01)
[9]干扰素调节因子的研究进展[J]. 沈金花,吕印,刘庆华.  中南民族大学学报(自然科学版). 2014(02)
[10]从吉林省肉牛场新发疫病分离出E种肠道病毒[J]. 邢泽黎,朱利塞,王新平,李苏靖,郭昌明,杨丽.  中国兽医学报. 2014(03)

博士论文
[1]E种肠道病毒HY12准种与进化及VP1基因突变对病毒复制的影响[D]. 朱利塞.吉林大学 2017

硕士论文
[1]吉林省牛肠道病毒遗传多样性及与羊肠道病毒抗原性比较分析研究[D]. 刘亚静.吉林大学 2018
[2]牛肠道病毒2A和3C蛋白酶通过负调控MAVS抑制牛β干扰素表达的研究[D]. 安东.东北农业大学 2017
[3]E种肠道病毒HY12的分离鉴定与双抗体夹心ELISA检测病毒抗原方法的建立及其应用[D]. 邢泽黎.吉林大学 2016
[4]BEV-3D-ELISA的建立及其在牛肠道病毒阳性个体筛选中的应用[D]. 周萍萍.东北农业大学 2016
[5]褐牙鲆干扰素调节因子3(IRF-3)和干扰素调节因子7(IRF-7)的全长cDNA克隆与表达分析[D]. 尹湘艳.中国海洋大学 2010



本文编号:3277883

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