乌珠穆沁羊骨骼肌卫星细胞的培养及其分化过程中肌肉与肌内脂肪相关基因的表达变化
发布时间：2021-07-13 08:09
乌珠穆沁羊是中国著名的优良肉畜品种,为了研究其肌肉生长发育机制,建立体外培养模型,并研究如何提高该肉畜的产肉性能与肉质为本研究主要目的。骨骼肌卫星细胞（SMSCs）主要与骨骼肌生长和修复相关,因此本研究主要以SMSCs为模型,进行分离纯化,鉴定与培养特性分析,并诱导其成为脂肪细胞与骨骼肌细胞,同时探讨了SMSCs在分化过程中肌肉与肌内脂肪相关基因的表达变化。研究结果表明:通过改良传统的细胞分离方法—原代外植块培养法,结合改良的差速贴壁法分离得到了高纯度的乌珠穆沁羊骨骼肌卫星细胞,此方法所得细胞培养至18代均未出现衰退现象,细胞仍然能够保持较好的形态特征。将所得卫星细胞通过免疫组织化学实验结合RT-PCR方法进行鉴定,证明所分离得到的细胞确实为骨骼肌卫星细胞。培养特性研究结果表明,所得SMSCs在细胞汇合度符合要求的前提下,培养周期不能超过7天;最佳冷冻保护液配方为40%DMEM/F12+50%胎牛血清+10%DMSO。HE染色结果证明,所建立乌珠穆沁羊骨骼肌卫星细胞分离纯化方法适于建立该细胞稳定细胞系,且可继代培养至18代。成肌诱导后细胞的形态学变化表明,成肌诱导后的第12天开始形成大...
【文章来源】：内蒙古农业大学内蒙古自治区
【文章页数】：128 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
骨骼肌的构成
主要观察其对肉鸡胴体和鸡肉肉质的影响，结果发现Myf6 基因的野生型A 基因可以调节肌纤维的密度和直径，同时还能够提高胸肌重和腿肌重，并且降低肉鸡腹脂重和骨骼肌肌纤维密度的作用［64］。另在鸭肉中的研究例如朱春红等［63］的实验，其结果表明，在高邮鸭和金定鸭的胸肌与腿肌中均有Myf6 基因的表达，此结果表明Myf6 基因对鸭的骨骼肌肌肉发育有着举足轻重的作用。1.2.3 MyoD 基因概述MyoD 基因是位于MRFs 基因家族上游的调节因子，它是生肌调节因子家族中的重要成员。它不仅可促使静止时期的骨骼肌卫星细胞分化成为成肌细胞，而且能把其他许多类型的具有多能分化特性的细胞(比如成纤维细胞、脂肪细胞、软骨细胞、神经细胞) 转化为成肌细胞。而且，在促进肌肉特异性基因的转录调控中，MyoD 起着重要作用，它的作用可以被比喻为基因转录的总开关。其主要通过与肌细胞生成素（MyoG）、肌酸激酶（Creatine Kinase，CK） 、肌球蛋白以及结蛋白等基因启动子区结合之后发挥调控转录激活的作用，从而进一步促进骨骼肌肌纤维的形成（如图3所示）。
图 4 bHLH 结构域示意图Fig.4 Schematic diagram of bHLH domain畜养殖与培育过程中，应该将生长速度以及瘦肉率放在首要位置, 而肉能力主要与其在初生时所具备的肌纤维数量有着密切关系。且多项MyoG 基因在骨骼肌肌细胞的形成与增值过程中均起着中心调节作用G 基因的结构以及遗传变异等方面的研究对提高家畜生产力的胚胎物生产力的提高都有着不可或缺的理论意义和实践指导价值。TN 基因概述以来，人们对肉类食物性状的改良研究，主要集中在瘦肉率和肉质方量是肉畜的主要经济性状，其与畜牧业的经济效益是密不可分的。随发展，尤其是分子生物学技术的发展，研究人员培育出了大量经济效其共同特点是瘦肉率高，节省饲料，生长速度较普通品种快。科学家，在肉畜以上优良经济性状的主效控制基因当中，造成牛肌肉 “双肌也就是肌肉生长抑制素(MSTN)的影响是最大的。肌肉抑制素是转化生
【参考文献】：
期刊论文
[1]骨骼肌卫星细胞增殖与成肌分化过程中关键信号通路的作用[J]. 郑琪,睢梦华,凌英会. 畜牧兽医学报. 2017(11)
[2]溶血磷脂酸在成体干细胞中的作用研究[J]. 赵晓静,徐喜媛,乌日娜,常欣欣,赵丽琪,杨敬平. 临床肺科杂志. 2017(11)
[3]山东省地方品种羊先天性免疫指标主成分聚类分析及与抗病力的相关性[J]. 周建波,胡莉萍,张忠花,王建民,马宁宁,董雯雯,朱丽君,魏凯,朱瑞良. 中国兽医学报. 2017(10)
[4]乌珠穆沁羊骨骼肌中脂肪酸的组成与相关基因表达量分析[J]. 张冬梅,梁图雅,苏和,格日勒图. 中国食品学报. 2017(06)
[5]乌珠穆沁羊Myostatin基因的分子克隆及序列分析[J]. 齐志欣,斯琴其木格,苏和,格日勒图. 中国食品学报. 2017(04)
[6]成体干细胞在泌尿系统疾病修复与重建中的应用[J]. 花永亮,杜宏,金承俊,赵维明,修有成. 现代生物医学进展. 2017(11)
[7]骨骼肌卫星细胞的研究进展[J]. 仝昕炜. 当代体育科技. 2017(04)
[8]骨骼肌卫星细胞成肌化机制研究进展[J]. 李江,方克伟. 医学研究生学报. 2016(09)
[9]新疆地方绵羊品种遗传资源保护与利用[J]. 托合塔森·皮达巴依. 新疆畜牧业. 2016(S1)
[10]国内外养羊业发展趋势、问题和对策[J]. 赵有璋. 现代畜牧兽医. 2015(09)
博士论文
[1]鲁西黄牛胚胎骨骼肌卫星细胞分离培养及生物学特性研究[D]. 边艳超.内蒙古农业大学 2013
硕士论文
[1]肉羊骨骼肌卫星细胞的培养及MRFs基因表达量的分析[D]. 冯青辉.内蒙古农业大学 2017
[2]绵羊骨骼肌卫星细胞的体外培养和诱导分化[D]. 吴海青.内蒙古大学 2012
[3]鸡Myf5和Myf6基因的SNP多态性及其与屠宰性状和肉质性状的相关性分析[D]. 孙文浩.四川农业大学 2008
[4]猪AMPD1、MYF6基因的多态性及其与部分经济性状相关性研究[D]. 任斌.湖南农业大学 2008
本文编号：3281696
【文章来源】：内蒙古农业大学内蒙古自治区
【文章页数】：128 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
骨骼肌的构成
主要观察其对肉鸡胴体和鸡肉肉质的影响，结果发现Myf6 基因的野生型A 基因可以调节肌纤维的密度和直径，同时还能够提高胸肌重和腿肌重，并且降低肉鸡腹脂重和骨骼肌肌纤维密度的作用［64］。另在鸭肉中的研究例如朱春红等［63］的实验，其结果表明，在高邮鸭和金定鸭的胸肌与腿肌中均有Myf6 基因的表达，此结果表明Myf6 基因对鸭的骨骼肌肌肉发育有着举足轻重的作用。1.2.3 MyoD 基因概述MyoD 基因是位于MRFs 基因家族上游的调节因子，它是生肌调节因子家族中的重要成员。它不仅可促使静止时期的骨骼肌卫星细胞分化成为成肌细胞，而且能把其他许多类型的具有多能分化特性的细胞(比如成纤维细胞、脂肪细胞、软骨细胞、神经细胞) 转化为成肌细胞。而且，在促进肌肉特异性基因的转录调控中，MyoD 起着重要作用，它的作用可以被比喻为基因转录的总开关。其主要通过与肌细胞生成素（MyoG）、肌酸激酶（Creatine Kinase，CK） 、肌球蛋白以及结蛋白等基因启动子区结合之后发挥调控转录激活的作用，从而进一步促进骨骼肌肌纤维的形成（如图3所示）。
图 4 bHLH 结构域示意图Fig.4 Schematic diagram of bHLH domain畜养殖与培育过程中，应该将生长速度以及瘦肉率放在首要位置, 而肉能力主要与其在初生时所具备的肌纤维数量有着密切关系。且多项MyoG 基因在骨骼肌肌细胞的形成与增值过程中均起着中心调节作用G 基因的结构以及遗传变异等方面的研究对提高家畜生产力的胚胎物生产力的提高都有着不可或缺的理论意义和实践指导价值。TN 基因概述以来，人们对肉类食物性状的改良研究，主要集中在瘦肉率和肉质方量是肉畜的主要经济性状，其与畜牧业的经济效益是密不可分的。随发展，尤其是分子生物学技术的发展，研究人员培育出了大量经济效其共同特点是瘦肉率高，节省饲料，生长速度较普通品种快。科学家，在肉畜以上优良经济性状的主效控制基因当中，造成牛肌肉 “双肌也就是肌肉生长抑制素(MSTN)的影响是最大的。肌肉抑制素是转化生
【参考文献】：
期刊论文
[1]骨骼肌卫星细胞增殖与成肌分化过程中关键信号通路的作用[J]. 郑琪,睢梦华,凌英会. 畜牧兽医学报. 2017(11)
[2]溶血磷脂酸在成体干细胞中的作用研究[J]. 赵晓静,徐喜媛,乌日娜,常欣欣,赵丽琪,杨敬平. 临床肺科杂志. 2017(11)
[3]山东省地方品种羊先天性免疫指标主成分聚类分析及与抗病力的相关性[J]. 周建波,胡莉萍,张忠花,王建民,马宁宁,董雯雯,朱丽君,魏凯,朱瑞良. 中国兽医学报. 2017(10)
[4]乌珠穆沁羊骨骼肌中脂肪酸的组成与相关基因表达量分析[J]. 张冬梅,梁图雅,苏和,格日勒图. 中国食品学报. 2017(06)
[5]乌珠穆沁羊Myostatin基因的分子克隆及序列分析[J]. 齐志欣,斯琴其木格,苏和,格日勒图. 中国食品学报. 2017(04)
[6]成体干细胞在泌尿系统疾病修复与重建中的应用[J]. 花永亮,杜宏,金承俊,赵维明,修有成. 现代生物医学进展. 2017(11)
[7]骨骼肌卫星细胞的研究进展[J]. 仝昕炜. 当代体育科技. 2017(04)
[8]骨骼肌卫星细胞成肌化机制研究进展[J]. 李江,方克伟. 医学研究生学报. 2016(09)
[9]新疆地方绵羊品种遗传资源保护与利用[J]. 托合塔森·皮达巴依. 新疆畜牧业. 2016(S1)
[10]国内外养羊业发展趋势、问题和对策[J]. 赵有璋. 现代畜牧兽医. 2015(09)
博士论文
[1]鲁西黄牛胚胎骨骼肌卫星细胞分离培养及生物学特性研究[D]. 边艳超.内蒙古农业大学 2013
硕士论文
[1]肉羊骨骼肌卫星细胞的培养及MRFs基因表达量的分析[D]. 冯青辉.内蒙古农业大学 2017
[2]绵羊骨骼肌卫星细胞的体外培养和诱导分化[D]. 吴海青.内蒙古大学 2012
[3]鸡Myf5和Myf6基因的SNP多态性及其与屠宰性状和肉质性状的相关性分析[D]. 孙文浩.四川农业大学 2008
[4]猪AMPD1、MYF6基因的多态性及其与部分经济性状相关性研究[D]. 任斌.湖南农业大学 2008
本文编号：3281696
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