MyoD调控山羊CDRlas表达的分子机制研究
发布时间：2021-07-14 22:45
随着高通量测序技术的广泛应用,肌肉组织中大量环状RNA（circRNAs）被发现。已有报道circRNA-FC/T10、circRNA-WDR77、circ-ZNF09与肌肉的生长发育密切相关。作为目前研究最为深入的环状RNA,CDR1as可竞争性结合miR-7调控靶基因IGF1R和Sp1的表达。同时发现CDR1as促进山羊骨骼肌卫星细胞的分化。此外,生肌决定因子MyoD是肌卫星细胞活化的标志物,可以调控肌肉特异性基因的表达促进成肌分化,并且在全基因组范围内具有广泛的调控作用。故推测,在肌细胞分化过程中,MyoD可能直接或间接地调控肌肉相关的circRNAs表达,但迄今为止尚未见报道。因此,本研究旨在探讨MyoD对CDR1as基因表达的调控作用及其机制。具体结果如下:1.利用RT-qPCR分析了 CDR1as及MyoD基因在胎儿期120 d母山羊的不同肌肉组织及SMSCs分化过程中的表达模式;发现CDR1as在腓肠肌中表达最高,其次为背最长肌,半腱肌中最低。而与MyoD、MyH 和MyoGmRNA的表达变化趋于一致。此外,CDR1as与MyoD基因在SMSCs分化过程中均呈先上升后下降...
【文章来源】：四川农业大学四川省 211工程院校
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－１环状ＲＮＡ的生物起源网??
２．１试验材料??２．１．１样品采集??试验动物来源于四川南江黄羊原种场。在胎儿期１２０日龄各采集３只母山羊的不同??肌肉组织，包括同上肌（ｘＳｗｐｍｓｐ／ｗａｔｅ），背最长肌、半膜肌??（＆腿？騰、半腱肌、腰大肌（Ｒｙａａｙｍｑ／ｏｒ）和腓肠肌??（Ｇｆｌ对ｒａｃｗｅｍ／ｗ＊ｓＯ，样品置液氮中速冻，随后保存于＿８０°Ｃ。??２．１．２试验细胞??本试验所用山羊骨骼肌卫星细胞，小鼠Ｃ２Ｃ１２及人ＨｅＬａ细胞均来自实验室冻存。??２．１．３试验载体??（１）?ＰＭＤ１９－Ｔ载体购于北京擎科（ＴＳＩＮＧＫＥ）。??（２）构建过表达的载体为ｐＥＧＦＰ－Ｎｌ，购于Ｐｒｏｍｅｇａ公司产品。其结构图如下??
Ｆｉｇ．?２－２?Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆ?ｐＧＬ３－Ｂａｓｉｃ?ｖｅｃｔｏｒ??２２２３?ＢａｍＨ?Ｉ．?ｏｒｉ?＼??ＳＶ４０?ｌａｔｅ?＼??Ｐ〇＿?Ｖ??１９７１?Ｉ－Ｗ?＾?■＂ｅ３／ＩＭ??＼?＼?（４〇４５ｂｐ）?ｍ??＾＾ＶｈＳＶＴＫ??＼＼?＼?ｊ７?Ｐｒｏｍｏｔｅｒ??＼＾Ｓ＾＼＾ｏｍｃｉｔｅｉｒ?Ｋ??Ｉ?６４９??＾－Ｈｉｎｄ?Ｈｉ?７６０??（１０４０）?Ｃｓｐ４５?Ｉ?＾Ｎｈｅ?＼?１０２４??图２－３ｐＲＬ－ＴＫ载体结构图??Ｆｉ．?２－３?Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆＲＬ－ＴＫ?ｖｅｃｔｏｒ??
本文编号：3285036
【文章来源】：四川农业大学四川省 211工程院校
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－１环状ＲＮＡ的生物起源网??
２．１试验材料??２．１．１样品采集??试验动物来源于四川南江黄羊原种场。在胎儿期１２０日龄各采集３只母山羊的不同??肌肉组织，包括同上肌（ｘＳｗｐｍｓｐ／ｗａｔｅ），背最长肌、半膜肌??（＆腿？騰、半腱肌、腰大肌（Ｒｙａａｙｍｑ／ｏｒ）和腓肠肌??（Ｇｆｌ对ｒａｃｗｅｍ／ｗ＊ｓＯ，样品置液氮中速冻，随后保存于＿８０°Ｃ。??２．１．２试验细胞??本试验所用山羊骨骼肌卫星细胞，小鼠Ｃ２Ｃ１２及人ＨｅＬａ细胞均来自实验室冻存。??２．１．３试验载体??（１）?ＰＭＤ１９－Ｔ载体购于北京擎科（ＴＳＩＮＧＫＥ）。??（２）构建过表达的载体为ｐＥＧＦＰ－Ｎｌ，购于Ｐｒｏｍｅｇａ公司产品。其结构图如下??
Ｆｉｇ．?２－２?Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆ?ｐＧＬ３－Ｂａｓｉｃ?ｖｅｃｔｏｒ??２２２３?ＢａｍＨ?Ｉ．?ｏｒｉ?＼??ＳＶ４０?ｌａｔｅ?＼??Ｐ〇＿?Ｖ??１９７１?Ｉ－Ｗ?＾?■＂ｅ３／ＩＭ??＼?＼?（４〇４５ｂｐ）?ｍ??＾＾ＶｈＳＶＴＫ??＼＼?＼?ｊ７?Ｐｒｏｍｏｔｅｒ??＼＾Ｓ＾＼＾ｏｍｃｉｔｅｉｒ?Ｋ??Ｉ?６４９??＾－Ｈｉｎｄ?Ｈｉ?７６０??（１０４０）?Ｃｓｐ４５?Ｉ?＾Ｎｈｅ?＼?１０２４??图２－３ｐＲＬ－ＴＫ载体结构图??Ｆｉ．?２－３?Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆＲＬ－ＴＫ?ｖｅｃｔｏｒ??
本文编号：3285036
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/dongwuyixue/3285036.html
