黄曲霉毒素适配体传感器检测方法建立及其稳定性研究

发布时间：2021-07-15 11:48

　　黄曲霉毒素B1（AFB1）是毒性最强的霉菌毒素之一，引起了全球在饲料和食品安全领域的关注。为了阻止污染的饲料和食品带来的食品安全恐慌和经济损失，开发AFB1快速，灵敏和特异性的检测方法显得极其重要。本文开发了一种简单，超灵敏和可靠的适配体传感器检测AFB1。该方法利用AFB1的适配体作为分子识别探针，与适配体互补的DNA作为实时定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）的模板产生信号。优化条件下，该方法的检测范围为5.0×10-5⁵.0ng·mL-1，极高的灵敏度为25fg·mL-1。本研究选择其他的八种霉菌毒素作为干扰物检测后Ct值没有明显的改变，表明适配体传感器对AFB1极好的特异性。同时该传感器也可以应用于实际样品羊草和婴幼儿米粉中AFB1的检测，获得满意的回收率分别为88%¹27%和94%¹19%。该方法在定量和高通量检测饲料和食品中的霉菌毒素方面有很大的潜在应用，并且检测的目标物还可以扩大到更大的范围。AFB1可以直接污染食品，或者间接污染饲料，动物采食AFB1后，在奶中产生代谢物黄曲霉毒素M1（AFM1）[1,2]... 

【文章来源】：新疆农业大学新疆维吾尔自治区

【文章页数】：52 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

生物传感器结构

引起荧光信号的变化，最终达到定量检测 OTA 的目的。该方法检测性范围为 2.0×10-8–1.0×10-5g·L-1，检出限 1.0×10-8g·L-1。相对标准偏差为 2.6 组平行检测 1×10-6g·L-1OTA）。同时，这个方法对于 OTA 有高度的选择性且操作。已经成功应用于实际样品中 OTA 的检测[36]。在应用适配体对目标物性的基础上，Ma 等（2012）用一种适配体传感器达到了对 OTA 的超灵敏检该方法利用适配体作为分子识别探针，与适配体互补 DNA 作为实时定量RT-qPCR)扩增的模板。结果表明检测范围从 5×10-6-5ng·mL-1，检出L-1。同时具有特异性好，操作简单，低成本的优点。图二展示了用这种生物传感器定量检测 OTA 的原理。利用目标物与适配体的结合引起适配体的变化，互补 DNA 的释放，通过 RT-PCR 检测荧光信号的变化间接反映出 的含量[13]。

图 1-3：相互竞争模式下检测赭曲霉毒素 A 的原理图[40]Wu 等（2012）开发了可折叠的电化学传感器识别超灵敏的一步检测赭曲 A。使用巯基和亚甲基蓝双重标记的适配体修饰金电极的一步电化学传感赭曲霉毒素 A（OTA）。对 OTA 特异的适配体共价结合在电极的表面，作 检测的识别探针，与 OTA 结合之后诱导适配体的折叠。在最佳条件下，到很大的线性检测范围从 0.1pg·mL-1到 1000pg·mL-1，检出限 LOD 为pg·mL-1，和通常的 OTA 检测方法相比，表现出高度的灵敏性。研究表明开电化学传感器可以作为一种有效的现场 OTA 检测方法应用于各种复杂的实品中[41]。 基于荧光信号的生物传感器基于荧光信号的生物传感器是应用各种传感器类型，依据实验过程中荧光


本文编号：3285646