牛初级卵泡体外培养体系的建立和miR-27a在小鼠颗粒细胞中的功能的研究

发布时间：2021-07-16 16:24

　　体外培养145-170gm牛腔前卵泡能够形成卵泡腔已有人报道,但体外培养50-70μm的牛初级卵泡能否发育成腔仍没有报道。为了建立适合牛初级卵泡体外生长发育的培养体系,同时进一步揭示牛腔前卵泡体外发育的相关机制,本实验以屠宰场获取的牛卵巢为材料,以机械分离法获取直径50-70μm的牛初级卵泡,以α-MEM为基础培养基,调整不同浓度促卵泡素（FSH）、促黄体素（LH）和雌二醇（E2）激素配比以及优化碱性成纤维生长因子（bFGF）和表皮生长因子（EGF）添加量等试验,使用胶原包被的三维培养方法对牛初级卵泡进行体外培养13或21天（d）,观察卵泡直径以及成腔的变化,并用Real-Time PCR检测卵泡发育及成熟相关基因：芳香化酶（CYP19A1）、抗缪勒激素（AMH）、生长分化因子9（GDF-9）、骨形成蛋白15（BMP-15）以及m型转化生长因子p受体（TGFβR3）的表达。结果发现,以α-MEM为基础培养基,0.25μg/mL FSH+5IU/mL LH+0.1μg/mL E2+50ng/mL bFGF组以及FSH+LH+E2+bFGF和25ng/mL EGF联合处理组卵泡直径在体外培... 

【文章来源】：中国农业大学北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：104 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
Abstract
目录
缩略词表
第一篇 文献综述
    前言
    第一章 哺乳动物腔前卵泡体外培养研究进展
        1 卵泡和卵母细胞体内发育概述
        2 卵泡和卵母细胞的体外培养研究进展
    第二章 miRNA在卵巢中的研究进展
        1 miRNA概述
        2 miRNA在卵巢中的功能
第二篇 研究论文
    第一章 牛初级卵泡体外培养体系的建立
        1 引言
        2 材料与方法
        3 实验结果
        4 讨论
    第二章 miR-27a在小鼠颗粒细胞中的功能的研究
        1 引言
        2 材料和方法
        3 实验结果
        4 讨论
结论与展望
参考文献
致谢
个人简介


【参考文献】：
期刊论文
[1]卵巢早衰microRNA的差异表达及其作用[J]. 周莹,朱英哲,张素华,王红梅,王树玉,杨晓葵.  中国优生与遗传杂志. 2011(05)



本文编号：3287345