弯曲菌噬菌体的分离筛选及其在家禽生产中的探索应用

发布时间：2021-07-23 03:36

　　弯曲菌是世界范围内最常见的人兽共患食源性病原菌之一,常引发人类肠道疾病。在弯曲菌的流行传播中,家禽作为其最常见的宿主,发挥着重要的作用。为了应对家禽生产中的弯曲菌污染,已有多种抗菌制剂被用于防控研究。其中,噬菌体作为细菌病毒,能够特异性识别并裂解弯曲菌,有望成为新型的抗菌制剂。然而,噬菌体的宿主专噬特性通常会导致其裂解谱狭窄,因此需要对噬菌体进行筛选组合,形成噬菌体鸡尾酒组合,以满足应用需求。本研究首先对弯曲菌噬菌体进行了分离筛选并组合出噬菌体鸡尾酒,之后从定性研究、定量研究和分子流行病学研究的角度探究了家禽养殖与屠宰环节中弯曲菌的流行变化情况,并利用噬菌体进行了养殖环节弯曲菌的防控应用,为弯曲菌的防控提供新思路。一、弯曲菌噬菌体的分离及其鸡尾酒组合的筛选2017年9月至2018年6月,在江苏和山东等地采集鸡粪便样品495份,总计检测出180份弯曲菌噬菌体阳性样品,分离到弯曲菌噬菌体205株。分离结果表明,家禽市场样品的噬菌体阳性率（53.33%）显著高于养殖场（6.67%）。在噬菌体的筛选中,使用29株不同ST型、PFGE型的弯曲菌作为测试菌株初步筛选出24株噬菌体。之后,利用筛选出... 

【文章来源】：扬州大学江苏省

【文章页数】：100 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１－１标准滴度测定方法??Ｆｉｇｕｒｅｌ－ｌ?Ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｓｔａｎｄａｒｄ?ｐｈａｇｅ?ｔｉｔｅｒ??

５?（９４／２２９）?８６．４６?（１９８／２２９）?７７．７８?（７７／９９）?９３．９４?（９３／９９）??２．４．２鸡尾酒噬菌体的形态鉴定??用于组合噬菌体鸡尾酒的三株噬菌体Ｐ８１，?Ｐ１５２和Ｐａ６，透射电镜结果见图卜２。三株??噬菌体均为正２０面体头部，并带有尾部结构，均属于有尾噬菌体目。三株噻菌体的头部直??径约８０ｎｍ，其中Ｐ８１和Ｐ１５２有一?１２０ｎｍ的长尾，属于长尾嗤菌体科，而Ｐａ６有一长约??９０?＿的伸缩型尾部，属于肌尾噬菌体科。??？Ｉ??１００?ｎｍ??图１－２弯曲菌噬菌体透射电镜图??Ｆｉｇｕｒｅｌ－２?ＴＥＭ?ｉｍａｇｅｓ?ｏｆ?Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ?ｐｈａｇｅ??３讨论与小结??随着国内外家禽养殖过程中抗生素的逐步禁用，寻找新的弯曲菌防控手段迫在眉睫。??基于此，近年来利用噬菌体进行弯曲菌防控的研宄开始兴起。目前，国外己有部分学者对??家禽养殖和屠宰加工过程进行了噬菌体防控弯曲菌的初步应用［３Ｑ，５６］，但是至今为止仍未有??２０??

?扬州大学硕士学位论文???采样隨日龄样品类型样品数冑醜阳性率??分割?２１６?４１?１９?３２?１８．９８％??环境样?１３３?２９?８?３０?２１．８０％??总计?２８８９?５５８?３４９?２８８?１９．３１％??★?★?★??ｓｏ％］?＿＊＊＊＿Ｚ３ＨＺ??４０％－?■??１?Ｉ??ｆ?１?ｌｌｌｌｌｌｌ??…：ｐ＜０．００１??图２－１养殖屠宰环节弯曲菌阳性率变化情况??Ｆｉｇｕｒｅ２－１?Ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ?ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ?ｉｎ?ｒｅａｒｉｎｇ?ａｎｄ?ｓｌａｕｇｈｔｅｒｉｎｇ??２．１．１不同规模养殖场鸡群弯曲菌阳性率分布情况??根据流行病学资料，对７家养殖场进行了分类。其中４家养殖场家禽养殖数量在５百??到２万之间，划分为中型养殖场；３家养殖场家禽养殖数量在２万以上，划分为大型养殖??场（规模化养殖场）。检测结果表明，中型养殖场平均阳性率极显著高于大型养殖场（ｐ＜??０．００１），具体见表２－５和图２－２。在２８日龄，中型养殖场鸡群弯曲菌阳性率为３９．３３％，而??大型养殖场鸡群弯曲菌阳性率仅为１．２５％；在３５日龄，中型养殖场阳性率上升至５１．１８％，??而大型养殖场仅上升至１２．５０％；４２日龄时，中型养殖场阳性率出现小幅度的下降（４１．３８％），??但仍高于同日龄的大型养殖场（２５．００％）。??３２??


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