欧洲型PRRSV基因工程疫苗的构建及其实验免疫研究

发布时间：2021-07-23 19:54

　　猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）是以怀孕母猪繁殖障碍和猪呼吸系统疾病为特征的传染性疾病。PRRSV具有较强的变异性，亚洲许多国家和地区均出现了高致病性的美洲型PRRSV，而且东欧地区也出出现了致病力和传染性力更强的欧洲型毒株。随着PRRSV的传播打破原有的地域限制，中国不仅存在高致病性美洲型PRRSV，同时也出现了欧洲型PRRSV，导致该病的防控更加复杂。为了更好的防控欧洲型PRRSV，本研究以欧洲型代表株LV株ORF3、ORF5基因为研究对象，构建了ORF3和ORF5基因的原核表达质粒pET-28a-ORF3、pGEX-4T-ORF5和3个重组真核表达质粒pVAX-ORF3、pVAX-ORF5和pVAX-ORF3-ORF5，并对其表达产物进行小鼠及猪的免疫评价。将LV株ORF3、ORF5基因分别构建了原核表达质粒pET-28a-ORF3、pGEX-4T-ORF5，经IPTG诱导表达，显示目的蛋白能够以包涵体形式正确表达。免疫印迹实验表明，目的蛋白均具有良好的反应原性。ORF3和ORF5亚单位疫苗免疫仔猪实验表明，ORF3和ORF5蛋白均能刺激仔猪产生特异性抗体。细胞因子水平方面能诱导机... 

【文章来源】：吉林农业大学吉林省

【文章页数】：73 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
前言
第一篇 文献综述
    第一章 猪繁殖与呼吸综合征研究进展
        1 PRRSV 研究进展
        2 PRRSV 的流行病学
        3 致病机制研究
        4 PRRSV 免疫学研究进展
        5 PRRSV 疫苗的研究进展
        6 本研究的目的与意义
第二篇 研究内容
    第一章 欧洲型 PRRSV ORF3 和 ORF5 基因的原核表达及亚单位疫苗制备
        1 实验材料
        2 实验方法
        3 结果与分析
        4 讨论
        5 小结
    第二章 核酸疫苗的构建及小鼠免疫试验
        1 实验材料
        2 实验方法
        3 结果与分析
        4 讨论
        5 小结
    第三章 核酸疫苗和亚单位疫苗的猪免疫试验研究
        1 实验材料
        2 实验方法
        3 结果与分析
        4 讨论
        5 小结
结论
参考文献
作者简介
附录
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗研究进展[J]. 吴佳俊,遇秀玲,蒋桃珍,田克恭.  中国预防兽医学报. 2010(08)
[2]高致病性PRRSV Nsp2变异株Power SYBR Green real time RT-PCR检测方法的建立[J]. 郭杨,陈世界,林华,郭万柱,徐志文,颜其贵.  中国兽医科学. 2009(05)
[3]猪繁殖与呼吸综合征和猪2型圆环病毒病二联核酸疫苗的构建及其免疫效力[J]. 隋慧,杨金生.  安徽农业科学. 2009(11)
[4]猪繁殖与呼吸综合征病毒HB-3（cz）株ORF5基因序列分析及原核表达[J]. 刘涛,陈赛娟,曹洪战,刘子伟,朱子杰,苏霞,孙继国.  中国兽医杂志. 2008(12)
[5]猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白介导的E蛋白假型鼠白血病病毒的构建[J]. 夏平安,党占国,周斌,陈溥言,崔保安,邱璜,卢高峰.  病毒学报. 2008(05)
[6]高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离鉴定及其分子流行病学分析[J]. 童光志,周艳君,郝晓芳,田志军,仇华吉,彭金美,安同庆.  中国预防兽医学报. 2007(05)
[7]猪生殖与呼吸综合征病毒HN6株ORF5基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达[J]. 郭爱英,吴发兴,陈杰,郑喜邦,李晓成,张燕霞,黄保续.  中国兽医科学. 2007(04)
[8]表达PRRSV M蛋白重组腺病毒的构建及其免疫特性研究[J]. 汤景元,姜平,蒋文明,马苏,李玉峰.  中国病毒学. 2005(06)
[9]猪繁殖和呼吸综合征组织灭活苗的研制[J]. 赵坤,张慧辉,郭东升.  安徽农业科学. 2005(07)
[10]猪生殖与呼吸综合征ORF5基因疫苗的构建及其安全性和免疫原性检测[J]. 程安春,汪铭书,希尼尼根,豆文波,陈希文,陈孝跃.  中国兽医科技. 2005(01)



本文编号：3299932