蒙古马睾丸精原干细胞体外分离培养与鉴定
发布时间：2021-07-24 10:48
马业由古老的产业向现代马术和赛马产业发展,已经成为当今重要的经济支柱,我国是养马大国,以蒙古马居多。蒙古马具有抗寒、抗病、耐粗饲的特点,在马的遗传资源中是一个及其珍贵的基因库。但是蒙古马的育种繁殖方面研究相对薄弱,从而影响了马匹改良进程。精原干细胞是雄性动物体内唯一能够进行有丝分裂,并且能把遗传信息传递给下一代的干细胞,然而在众多睾丸细胞中精原干细胞数量较少,为其后续分离纯化带来难度。迄今为止,模型动物精原干细胞的纯化培养体系日渐成熟,然而对于马属动物的精原干细胞的体外分离培养却仍然处于初级阶段。因此,本研究通过建立蒙古马睾丸精原干细胞体外分离培养体系,有利于对精原干细胞的长期培养和生长条件的进一步探索,不仅可以揭示蒙古马睾丸精原干细胞的体外增殖特点,还可以进一步探究蒙古马睾丸发育和精子产生机制,对蒙古马的改良以及育种有着重要意义。本实验以2岁蒙古马为研究对象,取其睾丸通过机械分离法和酶逐步消化法获得睾丸单细胞悬液,经过差速贴壁法进行分离纯化精原干细胞,然后接种于事先复苏好的支持细胞饲养层上,并采用碱性磷酸酶（AKP）染色、免疫荧光染色、qRT-PCR进行特异性标志基因鉴定。研究结果如...
【文章来源】：内蒙古农业大学内蒙古自治区
【文章页数】：57 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２睾丸曲细精管中精子生成过程??Ｆｉｇ?．２?Ｔｈｅ?ｐｒｏｃｅｓｓ?ｏｆ?ｓｐｅｒｍａｔｏｇｅｎｅｓｉｓ?ｉｎ?ｔｅｓｔｉｃｕｌａｒ?ｓｅｍｉｎｉｆｅｒｏｕｓ?ｔｕｂｕｌｅｓ??
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【参考文献】：
期刊论文
[1]精原干细胞体外培养方法及应用研究进展[J]. 李彩虹,李春义,许蓬,庞希宁. 中国性科学. 2020(01)
[2]精原干细胞龛境调控因子的研究进展[J]. 乔斌,唐志安. 中国性科学. 2020(01)
[3]绵羊睾丸支持细胞的分离鉴定及其在山羊痘病毒疫苗株培养中的应用[J]. 杜国玉,吴锦艳,尚振华,李玲霞,曹小安,刘永生,刘湘涛,尚佑军. 中国兽医科学. 2020(03)
[4]内蒙古马产业振兴发展战略研究[J]. 王怀栋. 北方经济. 2019(11)
[5]三个阶段牦牛睾丸发育过程中piRNA的鉴定及分析研究[J]. 殷实,秦文昌,王斌,周婧雯,杨柳青,李键. 畜牧兽医学报. 2019(11)
[6]睾丸发育与精子发生相关miRNAs的研究进展[J]. 白曼,孙丽敏,项露颉,贾超,李佳蓉,姜怀志. 中国畜牧杂志. 2017(06)
[7]内蒙古地区马业发展趋向[J]. 萨如拉,白东义,芒来. 畜牧与饲料科学. 2015(08)
[8]大鼠精原干细胞培养饲养层的制备[J]. 王振,张斌,李明国,康印东,王施广,张伟君,王养民. 解放军医药杂志. 2015(07)
[9]蒙古马种质资源保护及其技术措施刍议[J]. 阿娜尔,杨永平,黄金龙,芒来. 内蒙古科技与经济. 2013(04)
[10]小鼠睾丸支持细胞体外分离培养的研究[J]. 洪洁赟,李青旺,江中良,王翠玲,刘玉志,张欢欢. 黑龙江畜牧兽医. 2012(13)
博士论文
[1]小鼠精原细胞体外长期存活及增殖研究[D]. 李莲军.中国人民解放军军需大学 2002
硕士论文
[1]Gata4和Gata6在尼罗罗非鱼类固醇生成和配子发生中作用研究[D]. 何雪.西南大学 2015
[2]牦牛Sertoli细胞的纯化培养与生物学特性研究[D]. 张华.甘肃农业大学 2013
本文编号：3300505
【文章来源】：内蒙古农业大学内蒙古自治区
【文章页数】：57 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２睾丸曲细精管中精子生成过程??Ｆｉｇ?．２?Ｔｈｅ?ｐｒｏｃｅｓｓ?ｏｆ?ｓｐｅｒｍａｔｏｇｅｎｅｓｉｓ?ｉｎ?ｔｅｓｔｉｃｕｌａｒ?ｓｅｍｉｎｉｆｅｒｏｕｓ?ｔｕｂｕｌｅｓ??
４?蒙古马睾丸精原干细胞体外分离培养与鉴定???，ｄ＞ｕｍ，ｎａｈ?ｌ??？｛??《办）?ｍｙｏｉｄ?ｃｅｌｌ?ｂｉｏｏｄ?ｖｅｓｓｅｌ?＾??Ａ?／Ｊ??ｃｓｆ－１?＾?？?〇ｒ?Ｉ??丨?，Ｎ??ｔｏｆ?＿?ＧＤＮＦ?ｌｅｓｔｏｓｉｃｒｏｎｃ?（?？）??＜Ｌ?ｌｅ，ｕ＿?［ｍ??Ｓｅｒｔｏｌｉ?ｃ？Ｉｌ?ＬｅｙｄｉｇｃｅＨ??图３生精小管微环境??Ｆｉｇ?．３?Ｍｉｃｒｏｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ?ｏｆ?ｓｅｍｉｎｉｆｅｒｏｕｓ?ｔｕｂｕｌｅｓ??１．３?精原干细胞（ｓｐｅｒｍａｔｏｇｏｎｉａｌ?ｓｔｅｍ?ｃｅｌｌｓ?ＳＳＣｓ）??１．３．１精原干细胞简介??精原干细胞（Ｓｐｅｒｍａｔｏｇｏｎｉａ?Ｓｔｅｍ?Ｃｅｌ丨ｓ，ＳＳＣｓ）位于曲精细管基膜上既能自我更??新维持自身数量恒定，又能定向分化产生精母细胞的一类原始精原细胞。由于雄性动??物的生长发育，原始生殖细胞向生殖母细胞进行转变，并分化为精原干细胞。睾丸中??的精原千细胞（ＳＳＣｓ）具有独特的自我更新和分化的能力，在动物遗传学、育种学和繁??
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【参考文献】：
期刊论文
[1]精原干细胞体外培养方法及应用研究进展[J]. 李彩虹,李春义,许蓬,庞希宁. 中国性科学. 2020(01)
[2]精原干细胞龛境调控因子的研究进展[J]. 乔斌,唐志安. 中国性科学. 2020(01)
[3]绵羊睾丸支持细胞的分离鉴定及其在山羊痘病毒疫苗株培养中的应用[J]. 杜国玉,吴锦艳,尚振华,李玲霞,曹小安,刘永生,刘湘涛,尚佑军. 中国兽医科学. 2020(03)
[4]内蒙古马产业振兴发展战略研究[J]. 王怀栋. 北方经济. 2019(11)
[5]三个阶段牦牛睾丸发育过程中piRNA的鉴定及分析研究[J]. 殷实,秦文昌,王斌,周婧雯,杨柳青,李键. 畜牧兽医学报. 2019(11)
[6]睾丸发育与精子发生相关miRNAs的研究进展[J]. 白曼,孙丽敏,项露颉,贾超,李佳蓉,姜怀志. 中国畜牧杂志. 2017(06)
[7]内蒙古地区马业发展趋向[J]. 萨如拉,白东义,芒来. 畜牧与饲料科学. 2015(08)
[8]大鼠精原干细胞培养饲养层的制备[J]. 王振,张斌,李明国,康印东,王施广,张伟君,王养民. 解放军医药杂志. 2015(07)
[9]蒙古马种质资源保护及其技术措施刍议[J]. 阿娜尔,杨永平,黄金龙,芒来. 内蒙古科技与经济. 2013(04)
[10]小鼠睾丸支持细胞体外分离培养的研究[J]. 洪洁赟,李青旺,江中良,王翠玲,刘玉志,张欢欢. 黑龙江畜牧兽医. 2012(13)
博士论文
[1]小鼠精原细胞体外长期存活及增殖研究[D]. 李莲军.中国人民解放军军需大学 2002
硕士论文
[1]Gata4和Gata6在尼罗罗非鱼类固醇生成和配子发生中作用研究[D]. 何雪.西南大学 2015
[2]牦牛Sertoli细胞的纯化培养与生物学特性研究[D]. 张华.甘肃农业大学 2013
本文编号：3300505
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