一株牛源短小芽孢杆菌的分离鉴定及抑菌活性的检测

发布时间：2021-07-25 12:15

　　为了分离、鉴定来源于犊牛创口的分离菌,并对其抑菌作用进行检测和评估,试验采用细菌分离培养、染色镜检、动物试验、药敏试验、生化鉴定等方法对所分离的菌株进行综合性鉴定,同时对分离菌株进行16S rRNA测序,并建立系统进化树,分析分离菌株亲缘关系。通过琼脂扩散法,以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏杆菌为指示菌种,检测所分离菌株对它们的抑菌作用。结果表明:分离培养得到1株革兰氏阳性杆菌并有芽孢,命名为LG-1。LG-1致病性较弱;仅对头孢噻肟耐药,对其余药物敏感或中度敏感;LG-1 16S rRNA基因PCR扩增产物序列与GenBank已经上传的短小芽孢杆菌相似性达100%;对大肠杆菌、沙门氏杆菌、金黄色葡萄球菌均有抑制作用,且上清液的抑菌作用相对较好。说明犊牛创口感染的菌株LG-1为短小芽孢杆菌,其有望成为抑制大肠杆菌、沙门氏杆菌、金黄色葡萄球菌的抗菌物质。 

【文章来源】：黑龙江畜牧兽医. 2020,(22)北大核心

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

16S rRNA基因PCR扩增结果

目前随着抗生素的滥用,耐药细菌逐渐增多,微生态制剂和天然植物成为抑菌药物的研究热点[9-11]。芽孢杆菌是目前发现的具有开发应用前景的菌种之一,其中短小芽孢杆菌可以产生抗菌素及抗菌蛋白等颉颃性物质,抑菌范围广,对多种病原菌都有抑制作用[12-13]。本研究通过分离培养、染色镜检、16S rRNA基因测序、遗传进化树的建立与分析,确定所分离菌株LG-1为短小芽孢杆菌。抑菌试验结果表明,LG-1对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏杆菌均具有不同程度的抑制作用,这与文献报道中分离于驴[6]、藏绵羊[7]及鸡[14]的短小芽孢杆菌菌株对致病菌的抑制作用相符合。本研究分离的短小芽孢杆菌LG-1属于牛源芽孢杆菌,后续将对该菌株抑菌机制进行进一步研究。表3 LG-1对指示菌抑菌效果 菌种 菌液 上清液 菌体沉淀 抑菌圈直径/mm 判定结果 抑菌圈直径/mm 判定结果 抑菌圈直径/mm 判定结果 大肠杆菌 6.55 低度敏感 10.11 中度敏感 5.37 低度敏感 金黄色葡萄球菌 21.05 高度敏感 23.22 高度敏感 15.43 高度敏感 沙门氏杆菌 11.87 中度敏感 13.50 中度敏感 9.97 中度敏感

此外,一些研究发现,短小芽孢杆菌在免疫调节、胃肠道微生物平衡、动物营养等方面有良好的效果,LG-1菌株的发现将为这些方面的研究提供新的候选菌株。图2 分离菌革兰氏染色镜检结果(100×)

【参考文献】：
期刊论文
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[3]短小芽孢杆菌BA06的比较基因组分析[J]. 刘云山,田应明,李校.  四川大学学报(自然科学版). 2018(06)
[4]2株鸡源芽孢杆菌的分离鉴定与药敏试验[J]. 陈永亮,高尚,王彦红.  江苏农业科学. 2018(19)
[5]一株藏绵羊源短小芽孢杆菌的分离鉴定及生物学特性研究[J]. 郭政宏,周彪,严亨秀.  中国畜牧兽医. 2016(06)
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[7]猪复合微生态制剂菌株的筛选及对仔猪生产性能的影响[J]. 王亚芳,肖群平,吕慧源,王秀敏.  中国畜牧杂志. 2014(04)
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[9]微生态制剂在动物生产中的应用[J]. 张响英,唐现文.  饲料博览. 2000(11)
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本文编号：3302013