Treg细胞在布鲁氏菌M5-90弱毒诱导机体免疫应答中的作用
发布时间:2021-07-28 06:48
布鲁氏菌病(Brucellosis)由布鲁氏菌(Bruce1la)侵入机体引起,以流产、不育和弛张热为临床特征的人兽共患病。该病在人畜间广泛流行,世界170个国家和地区均有该病的发生,在我国新疆和青海两省尤为突出,给畜牧业生产和人类健康带来了严重的危害。布鲁氏菌是典型的胞内寄生菌,主要以细胞免疫为主,T细胞在其诱导的免疫应答中发挥着重要作用。CD4+CD25+T细胞(Treg)对免疫应答具有调节功能,主要表现为免疫无反应性和免疫抑制性,可以通过下调机体的免疫应答来维持机体稳定和免疫耐受,当Treg细胞数量低下和功能紊乱可导致多种疾病的发生。Foxp3(Forkheadboxp3)是特异性表达在Treg细胞上的一类转录因子,Foxp3的活化对Treg细胞发育和转化有较大的影响。对Treg细胞的免疫调控研究将有助于对布鲁氏菌免疫机制的理解及防治新策略的制定。目前Treg细胞是否参与了绵羊对布鲁氏菌M5-90弱毒的免疫反应调控尚不清楚,为了探讨Treg细胞在布鲁氏菌M5-90弱毒疫苗诱导机体免疫应答中的作用,本项目主要开展了以下研究工作:1、外周血...
【文章来源】:石河子大学新疆维吾尔自治区 211工程院校
【文章页数】:59 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
中文摘要
Abstract
英文缩略语
第一章 文献综述
第二章 实验研究
实验一 外周血 CD4 ~+、 CD8 ~+T 、 CD4 ~+CD25 ~+Treg 在绵羊接种布鲁氏菌 M5- 90 弱毒疫苗后的动态变化
摘要
1 材料与方法
1.1 试剂
1.2 实验动物
1.3 免疫程序的制定
1.4 流式细胞术检测
1.5 数据统计与分析
2 结果
2.1 流式细胞检测数据
2.2 CD4 ~+T 淋巴细胞亚群的动态变化
2.3 CD8 ~+T 淋巴细胞亚群的动态变化
2.4 CD25~+T 淋巴细胞亚群动态变化
2.5 CD4~+CD25 ~+Treg 的动态变化
3 讨论
实验二 绵羊接种布鲁氏菌 M5- 90 弱毒疫苗后 IL- 1β、 IL- 6 及抗体水平检测研究
摘要
1 材料与方法
1.1 菌株、主要试剂与材料
1.2 实验动物的检测与 M5- 90 疫苗株的免疫程序制定
1.3 抗体水平的测定
1.4 小鼠抗羊 IL - 1β、兔抗羊 IL -6 、酶标二抗最佳工作浓度的确定
1.5 间接 ELISA操作程序
1.6 SPSS 统计分析
2 结果
2.1 抗体水平检测
2.2 一抗、酶标二抗最佳工作浓度的确定
2.3 间接 ELISA检测结果
3 讨论
实验三 绵羊接种布鲁氏菌 M5- 90 后 Treg 细胞中 Foxp3 基因表达的检测研究
摘要
1 材料与方法
1.1 试剂与仪器
1.2 培养基
1.3 PBMC 的获得
1.4 细胞计数
1.5 PBMC 的冻存与复苏
1.6 提取 RNA 反转录
1.7 引物设计
1.8 RT-PCR 检测 Foxp3 的表达
2 结果
2.1 淋巴细胞的分离计数
2.2 Foxp3 的表达检测
3 讨论
全文总结
参考文献
附录
致谢
作者简介
在学校期间参与的研究课题
发表论文
附件
【参考文献】:
期刊论文
[1]bp26对布鲁氏菌疫苗株M5免疫应答和免疫保护性的影响[J]. 曲勍,汪舟佳,甄清,黄留玉,于雅琴,陈泽良. 吉林农业大学学报. 2009(04)
[2]布鲁氏菌BP26基因标记疫苗株的构建及鉴别PCR方法的建立[J]. 汪舟佳,甄清,乔凤,王玉飞,杜昕颖,钟志军,赵瑾,于雅琴,黄留玉,孙岩松,陈泽良. 微生物学报. 2009(03)
[3]大肠癌中白细胞介素6与p-Stat3表达的关系[J]. 叶霖,王国斌,陶凯雄. 腹部外科. 2008(05)
[4]大肠癌患者白细胞介素-6和自身抗体的检测及临床意义[J]. 于高生,郑瑞平. 中华普通外科学文献(电子版). 2008(04)
[5]CD4+CD25nt/hiCD127lo调节性T细胞对HIV感染者免疫状态及病程进展的影响[J]. 周明奎,薛以乐,宫菊丽,周磊明,郑晓虹,盖晶,沈方伟,张玮,宁镇,岳清,卢伟,潘启超,康来仪,钟平,朱文斯,王盈. 中国免疫学杂志. 2007(12)
[6]急慢性乙型肝炎患者外周血调节性T细胞鉴定与临床意义分析[J]. 福军亮,徐东平,赵平,陈黎明,张晖,周春保,姚金霞,荣义辉,王福生. 中华医学杂志. 2006(22)
[7]市场经济下布鲁氏菌病防治工作的新思路[J]. 王茂武,宫新生,尚德秋,张士义,王大力. 疾病监测. 2004(08)
[8]乙型肝炎患者血清白细胞介素6和血小板源生长因子水平与肝纤维化关系[J]. 彭小斌,张国安,刘小朋,陈紫榕,施水兰. 中国现代医学杂志. 2000(06)
本文编号:3307445
【文章来源】:石河子大学新疆维吾尔自治区 211工程院校
【文章页数】:59 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
中文摘要
Abstract
英文缩略语
第一章 文献综述
第二章 实验研究
实验一 外周血 CD4 ~+、 CD8 ~+T 、 CD4 ~+CD25 ~+Treg 在绵羊接种布鲁氏菌 M5- 90 弱毒疫苗后的动态变化
摘要
1 材料与方法
1.1 试剂
1.2 实验动物
1.3 免疫程序的制定
1.4 流式细胞术检测
1.5 数据统计与分析
2 结果
2.1 流式细胞检测数据
2.2 CD4 ~+T 淋巴细胞亚群的动态变化
2.3 CD8 ~+T 淋巴细胞亚群的动态变化
2.4 CD25~+T 淋巴细胞亚群动态变化
2.5 CD4~+CD25 ~+Treg 的动态变化
3 讨论
实验二 绵羊接种布鲁氏菌 M5- 90 弱毒疫苗后 IL- 1β、 IL- 6 及抗体水平检测研究
摘要
1 材料与方法
1.1 菌株、主要试剂与材料
1.2 实验动物的检测与 M5- 90 疫苗株的免疫程序制定
1.3 抗体水平的测定
1.4 小鼠抗羊 IL - 1β、兔抗羊 IL -6 、酶标二抗最佳工作浓度的确定
1.5 间接 ELISA操作程序
1.6 SPSS 统计分析
2 结果
2.1 抗体水平检测
2.2 一抗、酶标二抗最佳工作浓度的确定
2.3 间接 ELISA检测结果
3 讨论
实验三 绵羊接种布鲁氏菌 M5- 90 后 Treg 细胞中 Foxp3 基因表达的检测研究
摘要
1 材料与方法
1.1 试剂与仪器
1.2 培养基
1.3 PBMC 的获得
1.4 细胞计数
1.5 PBMC 的冻存与复苏
1.6 提取 RNA 反转录
1.7 引物设计
1.8 RT-PCR 检测 Foxp3 的表达
2 结果
2.1 淋巴细胞的分离计数
2.2 Foxp3 的表达检测
3 讨论
全文总结
参考文献
附录
致谢
作者简介
在学校期间参与的研究课题
发表论文
附件
【参考文献】:
期刊论文
[1]bp26对布鲁氏菌疫苗株M5免疫应答和免疫保护性的影响[J]. 曲勍,汪舟佳,甄清,黄留玉,于雅琴,陈泽良. 吉林农业大学学报. 2009(04)
[2]布鲁氏菌BP26基因标记疫苗株的构建及鉴别PCR方法的建立[J]. 汪舟佳,甄清,乔凤,王玉飞,杜昕颖,钟志军,赵瑾,于雅琴,黄留玉,孙岩松,陈泽良. 微生物学报. 2009(03)
[3]大肠癌中白细胞介素6与p-Stat3表达的关系[J]. 叶霖,王国斌,陶凯雄. 腹部外科. 2008(05)
[4]大肠癌患者白细胞介素-6和自身抗体的检测及临床意义[J]. 于高生,郑瑞平. 中华普通外科学文献(电子版). 2008(04)
[5]CD4+CD25nt/hiCD127lo调节性T细胞对HIV感染者免疫状态及病程进展的影响[J]. 周明奎,薛以乐,宫菊丽,周磊明,郑晓虹,盖晶,沈方伟,张玮,宁镇,岳清,卢伟,潘启超,康来仪,钟平,朱文斯,王盈. 中国免疫学杂志. 2007(12)
[6]急慢性乙型肝炎患者外周血调节性T细胞鉴定与临床意义分析[J]. 福军亮,徐东平,赵平,陈黎明,张晖,周春保,姚金霞,荣义辉,王福生. 中华医学杂志. 2006(22)
[7]市场经济下布鲁氏菌病防治工作的新思路[J]. 王茂武,宫新生,尚德秋,张士义,王大力. 疾病监测. 2004(08)
[8]乙型肝炎患者血清白细胞介素6和血小板源生长因子水平与肝纤维化关系[J]. 彭小斌,张国安,刘小朋,陈紫榕,施水兰. 中国现代医学杂志. 2000(06)
本文编号:3307445
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