酵母β葡聚糖纳米乳佐剂的研制及其免疫效应研究
发布时间：2021-07-30 16:26
疫苗佐剂（Vaccine Adjuvants）是指与抗原结合后能非特异性增强机体对抗原的免疫应答或改变其免疫反应类型,而本身无免疫原性的一类物质。酵母p葡聚糖（Yeast β-glucan）为一种天然来源的免疫多糖,绿色、安全、无毒,同时具有免疫刺激活性,能诱导并增强机体的细胞免疫和体液免疫,作为一种免疫增强剂可提高机体的免疫反应。纳米乳佐剂（Nanoemulsion adjuvant）是利用纳米技术获得的乳滴直径在纳米尺度（20-500nm）范围的乳剂,它不仅在提高疫苗的稳定性和免疫效果上优势明显,还能改善传统矿物油佐剂存在的不足。为实现以上两种佐剂的协同加强效应,本研究将酵母p葡聚糖与纳米乳载体结合,采用纳米技术和水油亲和平衡技术,通过将酵母p葡聚糖增溶于纳米乳中,首次成功研制了一种安全、有效的水包油（O/W）型酵母p葡聚糖纳米乳佐剂,并对其物理性状、安全性、免疫效应进行评估,为酵母p葡聚糖纳米乳佐剂的后期临床应用研究提供了依据。研究的具体内容如下：1.酵母β葡聚糖纳米乳佐剂的配方筛选本研究通过查阅有关资料,设计不同的纳米乳佐剂配方,分别采用水滴定法判断能否形成纳米乳,不同温度下考...
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：66 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
缩略词表(ABBREVIATION)
1 文献综述
1.1 疫苗佐剂的研究进展
1.1.1 疫苗佐剂的概述
1.1.2 疫苗佐剂的分类
1.1.3 疫苗佐剂的作用机理
1.1.4 主要疫苗佐剂及应用现状
1.2 纳米佐剂的研究进展
1.2.1 纳米技术在医学领域中的研究
1.2.2 纳米佐剂的概述
1.2.3 纳米佐剂的分类
1.2.4 纳米佐剂的免疫效应研究
1.3 酵母β葡聚糖的免疫学研究
1.3.1 酵母β葡聚糖的概述
1.3.2 酵母β葡聚糖的免疫机理研究
1.3.3 酵母β葡聚糖的应用研究
2 目的与意义
3 材料与方法
3.1 材料
3.1.1 毒株、细胞、灭活抗原及疫苗
3.1.2 主要试剂
3.1.3 培养基及相关溶液的配制
3.1.4 主要仪器
3.1.5 实验动物
3.2 方法
3.2.1 空白纳米乳配方的筛选
3.2.2 酵母β葡聚糖纳米乳佐剂配方的确定及制备
3.2.3 酵母β葡聚糖纳米乳佐剂的物理性状评价
3.2.4 酵母β葡聚糖纳米乳佐剂的安全性评价
3.2.5 酵母β葡聚糖纳米乳佐剂的免疫效应研究
4 结果与分析
4.1 空白纳米乳配方的筛选
4.1.1 油相及表面活性剂的筛选
4.1.2 助表面活性剂的筛选
4.1.3 表面活性剂复配比的筛选
4.1.4 K_m值的筛选
4.2 酵母β葡聚糖纳米乳佐剂配方的确定及制备
4.3 酵母β葡聚糖纳米乳佐剂的物理性状评价
4.3.1 CMG-NE佐剂的外观性状
4.3.2 CMG-NE佐剂的结构类型
4.3.3 CMG-NE佐剂的粒径分布及微观形态
4.3.4 CMG-NE佐剂的黏度测定
4.3.5 CMG-NE佐剂的稳定性研究
4.4 酵母β葡聚糖纳米乳佐剂的安全性评价
4.4.1 小鼠急性毒性试验
4.4.2 热原试验
4.4.3 肌肉刺激性试验
4.5 酵母β葡聚糖为佐剂的猪伪狂犬病疫苗的免疫效果研究
4.5.1 酵母β葡聚糖对免疫小鼠PRV ELISA抗体水平的影响
4.5.2 酵母β葡聚糖对免疫小鼠PRV中和抗体水平的影响
4.5.3 酵母β葡聚糖对免疫小鼠脾淋巴细胞增殖活性的影响
4.6 酵母β葡聚糖纳米乳为佐剂的猪圆环病毒2型灭活苗的免疫效果研究
4.6.1 CMG-NE佐剂PCV-2灭活苗的制备
4.6.2 CMG-NE佐剂PCV-2灭活苗的质量评价
4.6.3 CMG-NE佐剂PCV-2灭活苗的安全性试验
4.6.4 CMG-NE佐剂PCV-2灭活苗的免疫试验
5 讨论
6 结论
参考文献
附录
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]酵母葡聚糖对金葡菌灭活苗免疫新西兰兔效果的影响[J]. 王成龙,王英珍,李引乾,孙英峰,张健,池晶晶,王东,李秀丽,任卫科. 西北农业学报. 2011(09)
[2]氢氧化铝纳米颗粒对鸡新城疫抗原的免疫佐剂效应[J]. 汤承,黄兴,杨发龙,李明义,范根成,岳华. 中国兽医科学. 2008(12)
[3]酵母β-葡聚糖对断奶仔猪猪瘟抗体水平的影响[J]. 潘树德,李学俭,边连全,段丽娟,萨立富,张飞. 畜牧与兽医. 2005(12)
[4]水包油型微乳形成因素的考察[J]. 吴顺芹,李三鸣,郎轶咏,刘华,刘洪卓. 沈阳药科大学学报. 2005(02)
本文编号：3311739
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：66 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
缩略词表(ABBREVIATION)
1 文献综述
1.1 疫苗佐剂的研究进展
1.1.1 疫苗佐剂的概述
1.1.2 疫苗佐剂的分类
1.1.3 疫苗佐剂的作用机理
1.1.4 主要疫苗佐剂及应用现状
1.2 纳米佐剂的研究进展
1.2.1 纳米技术在医学领域中的研究
1.2.2 纳米佐剂的概述
1.2.3 纳米佐剂的分类
1.2.4 纳米佐剂的免疫效应研究
1.3 酵母β葡聚糖的免疫学研究
1.3.1 酵母β葡聚糖的概述
1.3.2 酵母β葡聚糖的免疫机理研究
1.3.3 酵母β葡聚糖的应用研究
2 目的与意义
3 材料与方法
3.1 材料
3.1.1 毒株、细胞、灭活抗原及疫苗
3.1.2 主要试剂
3.1.3 培养基及相关溶液的配制
3.1.4 主要仪器
3.1.5 实验动物
3.2 方法
3.2.1 空白纳米乳配方的筛选
3.2.2 酵母β葡聚糖纳米乳佐剂配方的确定及制备
3.2.3 酵母β葡聚糖纳米乳佐剂的物理性状评价
3.2.4 酵母β葡聚糖纳米乳佐剂的安全性评价
3.2.5 酵母β葡聚糖纳米乳佐剂的免疫效应研究
4 结果与分析
4.1 空白纳米乳配方的筛选
4.1.1 油相及表面活性剂的筛选
4.1.2 助表面活性剂的筛选
4.1.3 表面活性剂复配比的筛选
4.1.4 K_m值的筛选
4.2 酵母β葡聚糖纳米乳佐剂配方的确定及制备
4.3 酵母β葡聚糖纳米乳佐剂的物理性状评价
4.3.1 CMG-NE佐剂的外观性状
4.3.2 CMG-NE佐剂的结构类型
4.3.3 CMG-NE佐剂的粒径分布及微观形态
4.3.4 CMG-NE佐剂的黏度测定
4.3.5 CMG-NE佐剂的稳定性研究
4.4 酵母β葡聚糖纳米乳佐剂的安全性评价
4.4.1 小鼠急性毒性试验
4.4.2 热原试验
4.4.3 肌肉刺激性试验
4.5 酵母β葡聚糖为佐剂的猪伪狂犬病疫苗的免疫效果研究
4.5.1 酵母β葡聚糖对免疫小鼠PRV ELISA抗体水平的影响
4.5.2 酵母β葡聚糖对免疫小鼠PRV中和抗体水平的影响
4.5.3 酵母β葡聚糖对免疫小鼠脾淋巴细胞增殖活性的影响
4.6 酵母β葡聚糖纳米乳为佐剂的猪圆环病毒2型灭活苗的免疫效果研究
4.6.1 CMG-NE佐剂PCV-2灭活苗的制备
4.6.2 CMG-NE佐剂PCV-2灭活苗的质量评价
4.6.3 CMG-NE佐剂PCV-2灭活苗的安全性试验
4.6.4 CMG-NE佐剂PCV-2灭活苗的免疫试验
5 讨论
6 结论
参考文献
附录
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]酵母葡聚糖对金葡菌灭活苗免疫新西兰兔效果的影响[J]. 王成龙,王英珍,李引乾,孙英峰,张健,池晶晶,王东,李秀丽,任卫科. 西北农业学报. 2011(09)
[2]氢氧化铝纳米颗粒对鸡新城疫抗原的免疫佐剂效应[J]. 汤承,黄兴,杨发龙,李明义,范根成,岳华. 中国兽医科学. 2008(12)
[3]酵母β-葡聚糖对断奶仔猪猪瘟抗体水平的影响[J]. 潘树德,李学俭,边连全,段丽娟,萨立富,张飞. 畜牧与兽医. 2005(12)
[4]水包油型微乳形成因素的考察[J]. 吴顺芹,李三鸣,郎轶咏,刘华,刘洪卓. 沈阳药科大学学报. 2005(02)
本文编号：3311739
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