牛种布鲁氏菌ClpS基因突变株的构建及其对毒力的影响

发布时间：2021-08-03 00:34

　　试验旨在探究ClpS基因在布鲁氏菌中的作用,分析比较ClpS基因突变对布鲁氏菌毒力的影响。利用同源重组技术,构建布鲁氏菌ClpS基因突变株,通过检测细菌生长曲线、细菌LPS合成能力及其在巨噬细胞内的存活能力和小鼠模型中的毒力,比较亲本株2308和突变株ΔClpS两者之间的差异。结果显示,在相同的培养条件下,亲本株2308和突变株ΔClpS的细菌浓度无明显差异,且两者提取的LPS银染结果基本一致,表明ClpS基因突变不影响布鲁氏菌生长速度,不影响细菌LPS合成;在细胞感染模型中,突变株ΔClpS在感染后72 h的胞内存活能力极显著低于亲本株2308（P<0.01）;小鼠感染试验显示,在感染后1周,亲本株2308感染组和突变株ΔClpS感染组小鼠脾脏重量及细菌含量无显著差异,但在感染后4周,突变株ΔClpS感染组的小鼠脾脏细菌含量为10^3.93 CFU/g脾脏,显著低于亲本株2308(10^6.68 CFU/g脾脏,P<0.01),且突变株ΔClpS感染组的小鼠脾脏肿胀程度极显著低于亲本株2308（P<0.01）。综上所述,布鲁氏... 

【文章来源】：中国畜牧兽医. 2020,47(11)北大核心

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【部分图文】：

ClpS基因突变株的构建及鉴定

由图2可知,在正常TSB培养环境下,突变株ΔClpS的细菌浓度略低于亲本株2308,但差异不显著(P>0.05)。结果表明ClpS基因不参与调控细菌生长周期,ClpS基因突变不影响细菌生长速度。2.3 细菌LPS银染检测

为研究ClpS基因突变是否与牛种布鲁氏菌的LPS合成相关,提取2株细菌的LPS,经12.5% SDS-PAGE电泳和银染显色。由图3可知,突变株ΔClpS与亲本株2308一致,仍然保留有光滑型细菌特有的O抗原,而粗糙型细菌则表现为O抗原缺失。因此,ClpS蛋白突变不影响布鲁氏菌LPS的合成。2.4 细胞感染试验


本文编号：3318578