PRRSV GP5与Fc融合蛋白的表达及其免疫原性研究
发布时间：2021-08-04 02:59
猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）由单股正链RNA病毒（PRRSV）引起，由于该病毒广泛的传播和高致病性，给养猪产业造成了巨大的经济损失。目前，针对PRRSV的疫苗并不能提供长期有效地防护。GP5是PRRSV主要的糖基化囊膜蛋白，在PRRSV的组装、入侵以及免疫应答过程中具有重要作用。该蛋白能诱导中和抗体的产生，是PRRS新型疫苗设计的良好靶标。先前的研究表明，天然的GP5糖蛋白免疫原性较低，不能使机体产生足够的免疫保护力。GP5蛋白表面的糖基化位点对中和表位具有覆盖作用，而且中和表位附近的非中和性表位具有免疫优势，影响了中和性抗体的产生。在以GP5蛋白为免疫原的亚单位疫苗的制作中，GP5蛋白的信号肽序列和3个跨膜区会影响该蛋白的表达量。因此，针对GP5蛋白的疫苗设计，需要对GP5蛋白进行优化改造，提高其免疫原性，增强中和抗体产生的能力。我们以高致病性PRRSV毒株为模板优化GP5蛋白，首先去除了GP5蛋白的信号肽和跨膜区，将胞外域和胞内域通过（GGGGS）3接头连接，再与Fc片段组成融合蛋白GP5-Fc。由于GP5的中和性表位位于胞外域上，我们还构建了胞外域直接与Fc融合的蛋白GP5N-...
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：50 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
PRRSV粒子的结构
PRRSV 粒子的低温电子断层成像（Don tomography of the individual PRRSV vir学研究概况 15kb，包含至少 9 个开放阅读框（（SHFV）以及乳酸脱氢酶增高症病相似（den Boon et al. 1991; Conzelm7; Snijder and Meulenberg 1998; Gorb因组结构从 5′端开始依次为：5′末ORF1b）、结构蛋白编码区（ORF尾巴（polyA）。该基因组比较复杂之间还有部分重叠现象。白大的编码框，长约 12kb，由 ORF
过程和蛋白结构上非常相似（den Boon et al. 1991; Conzelmann et al. 1993; Meulenbergal. 1993; Cavanagh 1997; Snijder and Meulenberg 1998; Gorbalenya et al. 2006）。PRRSV基因组是多顺反子，基因组结构从 5′端开始依次为：5′末端非编码区(5′-UTR)、非结蛋白编码区（ORF1a、ORF1b）、结构蛋白编码区（ORF2-ORF7）、3′末端非编码区′-UTR) 以及多聚腺苷酸尾巴（polyA）。该基因组比较复杂，每个阅读框连接地相当凑，而且相邻的阅读框之间还有部分重叠现象。.1 PRRSV 的非结构蛋白ORF1 是 PRRSV 中最大的编码框，长约 12kb，由 ORF1a 和 ORF1b 构成，约占病基因组的 75%，其结构模式图如下（图 1-3）。ORF1a 和 ORF1b 分别编码多聚蛋白 pp1a pp1ab，这两个多聚蛋白在翻译的过程中又被水解成 14 个非结构蛋白（nsps），其中1a 产生 10 个非结构蛋白（nsp1a、nsp1b、nsp2-8），pp1ab 产生 4 个非结构蛋白nsp9-nsp12），这 14 个非结构蛋白中含有蛋白酶（nsp1a、nsp1b、nsp2 和 nsp4），RNA合酶（nsp9），RNA 解旋酶（nsp10）和核酸内切酶（nsp11）（den Boon et al. 1995; vanebuhr et al. 2000; Aken et al. 2006）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]PRRSV GP5基因的原核表达及其免疫性分析[J]. 扈鸿霞,方维焕,刘建华,冉多良. 动物医学进展. 2008(05)
[2]从疑似PRRS流产胎儿分离PRRSV的研究[J]. 郭宝清,陈章水,刘文兴,崔益洙. 中国畜禽传染病. 1996(02)
硕士论文
[1]重庆市部分地区猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5基因的遗传变异分析[D]. 陈静.西南大学 2009
本文编号：3320865
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：50 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
PRRSV粒子的结构
PRRSV 粒子的低温电子断层成像（Don tomography of the individual PRRSV vir学研究概况 15kb，包含至少 9 个开放阅读框（（SHFV）以及乳酸脱氢酶增高症病相似（den Boon et al. 1991; Conzelm7; Snijder and Meulenberg 1998; Gorb因组结构从 5′端开始依次为：5′末ORF1b）、结构蛋白编码区（ORF尾巴（polyA）。该基因组比较复杂之间还有部分重叠现象。白大的编码框，长约 12kb，由 ORF
过程和蛋白结构上非常相似（den Boon et al. 1991; Conzelmann et al. 1993; Meulenbergal. 1993; Cavanagh 1997; Snijder and Meulenberg 1998; Gorbalenya et al. 2006）。PRRSV基因组是多顺反子，基因组结构从 5′端开始依次为：5′末端非编码区(5′-UTR)、非结蛋白编码区（ORF1a、ORF1b）、结构蛋白编码区（ORF2-ORF7）、3′末端非编码区′-UTR) 以及多聚腺苷酸尾巴（polyA）。该基因组比较复杂，每个阅读框连接地相当凑，而且相邻的阅读框之间还有部分重叠现象。.1 PRRSV 的非结构蛋白ORF1 是 PRRSV 中最大的编码框，长约 12kb，由 ORF1a 和 ORF1b 构成，约占病基因组的 75%，其结构模式图如下（图 1-3）。ORF1a 和 ORF1b 分别编码多聚蛋白 pp1a pp1ab，这两个多聚蛋白在翻译的过程中又被水解成 14 个非结构蛋白（nsps），其中1a 产生 10 个非结构蛋白（nsp1a、nsp1b、nsp2-8），pp1ab 产生 4 个非结构蛋白nsp9-nsp12），这 14 个非结构蛋白中含有蛋白酶（nsp1a、nsp1b、nsp2 和 nsp4），RNA合酶（nsp9），RNA 解旋酶（nsp10）和核酸内切酶（nsp11）（den Boon et al. 1995; vanebuhr et al. 2000; Aken et al. 2006）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]PRRSV GP5基因的原核表达及其免疫性分析[J]. 扈鸿霞,方维焕,刘建华,冉多良. 动物医学进展. 2008(05)
[2]从疑似PRRS流产胎儿分离PRRSV的研究[J]. 郭宝清,陈章水,刘文兴,崔益洙. 中国畜禽传染病. 1996(02)
硕士论文
[1]重庆市部分地区猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5基因的遗传变异分析[D]. 陈静.西南大学 2009
本文编号：3320865
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