一氧化氮/非对称性二甲基精氨酸在布鲁氏菌侵染过程中的响应特征
发布时间：2021-08-06 06:24
目的:本实验以小鼠和小鼠巨噬细胞为材料,使用布鲁氏菌疫苗株M5对其进行侵染,在不同的时间对小鼠的巨噬细胞、血清以及不同组织中的一氧化氮（NO）和非对称性二甲基精氨酸（ADMA）含量进行检测,比较不同时间和不同组织内NO和ADMA含量的的差异,探讨NO和ADMA在此过程中所起的作用,以及NO与ADMA之间在时间和空间上的响应关系。最后进行CFU计数观察,为进一步研究其引起吞噬细胞免疫应答的开始和布病预防寻求新途径提供一定依据和理论支持。方法:1.收集培养至对数期的布鲁氏菌疫苗株M5菌液,离心重悬后用麦氏比浊法将菌液稀释至所需的浓度,用布鲁氏菌疫苗株M5侵染小鼠巨噬细胞,侵染时细菌和细胞比例为100:1,在0.5h、6h、12h、24h和48h时分别取细胞培养液和细胞裂解物,采用Griess试剂法和酶联免疫吸附法（ELISA）检测细胞内外的NO和ADMA含量,而后对各个侵染时间段进行CFU计数观察。把检测结果输入到EXCEL中,实验结果统计分析使用SPSS 17.0。2.用1中的方法培养布鲁氏菌疫苗株M5,用布鲁氏菌M5和PBS缓冲液分别对侵染组和对照组小鼠进行腹腔注射,注射剂量为0.2 ...
【文章来源】：石河子大学新疆维吾尔自治区 211工程院校
【文章页数】：55 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
英文缩略词表
引言
第一章 文献综述
1.1 布鲁氏菌简介
1.1.1 布鲁氏菌的历史
1.1.2 布鲁氏菌病的流行状况
1.1.3 布鲁氏菌的生物分类
1.1.4 布鲁氏菌胞内寄生
1.1.5 布鲁氏菌M5
1.1.6 布鲁氏菌的致病机制
1.1.7 人畜共患传染病
1.1.8 布鲁氏菌病
1.2 一氧化氮（NO）
1.2.1 NO的发现和生物学特性
1.2.2 NO的合成
1.2.3 NO的研究进展
1.3 非对称性二甲基精氨酸（ADMA）
1.3.1 ADMA的合成
1.3.2 ADMA的代谢
1.3.3 ADMA的研究现状
1.4 研究目的和意义
1.5 技术路线
第二章 布鲁氏菌M5侵染小鼠巨噬细胞的NO与ADMA检测
2.1 实验材料和仪器
2.1.1 菌种和细胞系
2.1.2 主要试剂和仪器
2.2 方法
2.2.1 试剂配制
2.2.2 小鼠巨噬细胞培养
2.2.3 布鲁氏菌M5侵染小鼠巨噬细胞
2.2.4 LPS最适浓度测定
2.2.5 NO、ADMA含量检测与计算
2.2.6 布鲁氏菌侵染小鼠巨噬细胞M5的CFU（colony-forming unit)计数
2.2.7 数据分析
2.3 结果
2.3.1 小鼠巨噬细胞计数和布鲁氏菌侵染前菌量
2.3.2 LPS最适浓度测定结果
2.3.3 NO检测结果
2.3.4 ADMA测定结果
2.3.5 CFU计数观察结果
2.4 结论
第三章 布鲁氏菌M5侵染小鼠的NO与ADMA检测
3.1 材料和仪器
3.1.1 菌种和实验动物
3.1.2 主要试剂和仪器
3.2 方法
3.2.1 布鲁氏菌的培养和菌量计数
3.2.2 实验动物免疫
3.2.3 样品采集和处理
3.2.4 标准试管凝集试验(SAT)
3.2.5 虎红平板凝集试验(RBPT)
3.2.6 NO、ADMA含量检测与计算
3.2.7 小鼠肝脏和脾脏的CFU计数
3.2.8 M5的CFU菌落鉴定
3.2.9 数据分析
3.3 结果
3.3.1 试管凝集试验
3.3.2 虎红平板凝集试验
3.3.3 NO检测结果
3.3.4 ADMA检测结果
3.3.5 小鼠肝脾CFU计数
3.3.6 CFU单菌落PCR鉴定
3.4 结论
第四章 总结与展望
参考文献
致谢
作者简介
导师评阅表
【参考文献】：
期刊论文
[1]非对称性二甲基精氨酸生物学特性[J]. 刘俊,王洪巨. 岭南心血管病杂志. 2007(04)
[2]当前奶牛布氏杆菌病防控工作存在的问题及对策[J]. 王俊江,张岚. 中国畜牧兽医. 2007(03)
[3]布氏杆菌病疫苗的应用和研究现状[J]. 丁家波,毛开荣,程君生,戴志红,蒋玉文. 微生物学报. 2006(05)
[4]一氧化氮与病毒感染研究进展[J]. 孙雷,孔小明. 动物医学进展. 2003(01)
[5]中国布鲁氏菌病防治科研50年[J]. 尚德秋. 中华流行病学杂志. 2000(01)
[6]布鲁氏菌病流行病学研究现况[J]. 尚德秋. 中华流行病学杂志. 1998(02)
[7]一氧化氮的生物医学[J]. 王逸民. 临床检验杂志. 1998(01)
[8]值得注意的布氏菌病疫情发展趋势[J]. 尚德秋. 中国地方病学杂志. 1995(04)
[9]布氏杆菌羊种M5—90弱毒菌苗对新疆孕绵羊的安全性试验[J]. 宋之先,朱鹤赐,胡振武,武志强,方金城,王学智,陈少平. 中国畜禽传染病. 1988(06)
[10]布氏杆菌羊种M5-90菌苗对山西土种黄牛二年免疫期试验[J]. 施宏武,赫崇礼,陈乃昌,武志强,刘玉梅,胡振武,王志国,郝福文,刁富杰,段志昌,王维生,郭志勤,王金堂. 中国畜禽传染病. 1988(02)
博士论文
[1]非对称二甲基精氨酸（ADMA）对糖尿病红细胞变形能力及胰岛素抵抗的影响[D]. 杨芝春.中南大学 2009
本文编号：3325250
【文章来源】：石河子大学新疆维吾尔自治区 211工程院校
【文章页数】：55 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
英文缩略词表
引言
第一章 文献综述
1.1 布鲁氏菌简介
1.1.1 布鲁氏菌的历史
1.1.2 布鲁氏菌病的流行状况
1.1.3 布鲁氏菌的生物分类
1.1.4 布鲁氏菌胞内寄生
1.1.5 布鲁氏菌M5
1.1.6 布鲁氏菌的致病机制
1.1.7 人畜共患传染病
1.1.8 布鲁氏菌病
1.2 一氧化氮（NO）
1.2.1 NO的发现和生物学特性
1.2.2 NO的合成
1.2.3 NO的研究进展
1.3 非对称性二甲基精氨酸（ADMA）
1.3.1 ADMA的合成
1.3.2 ADMA的代谢
1.3.3 ADMA的研究现状
1.4 研究目的和意义
1.5 技术路线
第二章 布鲁氏菌M5侵染小鼠巨噬细胞的NO与ADMA检测
2.1 实验材料和仪器
2.1.1 菌种和细胞系
2.1.2 主要试剂和仪器
2.2 方法
2.2.1 试剂配制
2.2.2 小鼠巨噬细胞培养
2.2.3 布鲁氏菌M5侵染小鼠巨噬细胞
2.2.4 LPS最适浓度测定
2.2.5 NO、ADMA含量检测与计算
2.2.6 布鲁氏菌侵染小鼠巨噬细胞M5的CFU（colony-forming unit)计数
2.2.7 数据分析
2.3 结果
2.3.1 小鼠巨噬细胞计数和布鲁氏菌侵染前菌量
2.3.2 LPS最适浓度测定结果
2.3.3 NO检测结果
2.3.4 ADMA测定结果
2.3.5 CFU计数观察结果
2.4 结论
第三章 布鲁氏菌M5侵染小鼠的NO与ADMA检测
3.1 材料和仪器
3.1.1 菌种和实验动物
3.1.2 主要试剂和仪器
3.2 方法
3.2.1 布鲁氏菌的培养和菌量计数
3.2.2 实验动物免疫
3.2.3 样品采集和处理
3.2.4 标准试管凝集试验(SAT)
3.2.5 虎红平板凝集试验(RBPT)
3.2.6 NO、ADMA含量检测与计算
3.2.7 小鼠肝脏和脾脏的CFU计数
3.2.8 M5的CFU菌落鉴定
3.2.9 数据分析
3.3 结果
3.3.1 试管凝集试验
3.3.2 虎红平板凝集试验
3.3.3 NO检测结果
3.3.4 ADMA检测结果
3.3.5 小鼠肝脾CFU计数
3.3.6 CFU单菌落PCR鉴定
3.4 结论
第四章 总结与展望
参考文献
致谢
作者简介
导师评阅表
【参考文献】：
期刊论文
[1]非对称性二甲基精氨酸生物学特性[J]. 刘俊,王洪巨. 岭南心血管病杂志. 2007(04)
[2]当前奶牛布氏杆菌病防控工作存在的问题及对策[J]. 王俊江,张岚. 中国畜牧兽医. 2007(03)
[3]布氏杆菌病疫苗的应用和研究现状[J]. 丁家波,毛开荣,程君生,戴志红,蒋玉文. 微生物学报. 2006(05)
[4]一氧化氮与病毒感染研究进展[J]. 孙雷,孔小明. 动物医学进展. 2003(01)
[5]中国布鲁氏菌病防治科研50年[J]. 尚德秋. 中华流行病学杂志. 2000(01)
[6]布鲁氏菌病流行病学研究现况[J]. 尚德秋. 中华流行病学杂志. 1998(02)
[7]一氧化氮的生物医学[J]. 王逸民. 临床检验杂志. 1998(01)
[8]值得注意的布氏菌病疫情发展趋势[J]. 尚德秋. 中国地方病学杂志. 1995(04)
[9]布氏杆菌羊种M5—90弱毒菌苗对新疆孕绵羊的安全性试验[J]. 宋之先,朱鹤赐,胡振武,武志强,方金城,王学智,陈少平. 中国畜禽传染病. 1988(06)
[10]布氏杆菌羊种M5-90菌苗对山西土种黄牛二年免疫期试验[J]. 施宏武,赫崇礼,陈乃昌,武志强,刘玉梅,胡振武,王志国,郝福文,刁富杰,段志昌,王维生,郭志勤,王金堂. 中国畜禽传染病. 1988(02)
博士论文
[1]非对称二甲基精氨酸（ADMA）对糖尿病红细胞变形能力及胰岛素抵抗的影响[D]. 杨芝春.中南大学 2009
本文编号：3325250
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/dongwuyixue/3325250.html
