水貂阿留申病分子流行病学调查和间接ELISA检测方法的建立
发布时间：2021-08-06 23:39
水貂阿留申病（Aleutian Mink Disease, AD）是由细小病毒科（Parvoviridae）细小病毒亚科（Parvovirinae）阿留申病毒属（Amdovirus）水貂阿留申病毒（Aleutian Mink Disease Virus, AMDV）引起的慢性传染病。该病能够导致感染动物肾小球肾炎、动脉血管炎和代谢异常,广泛存在于世界各水貂养殖国家,造成重大的经济损失,是水貂养殖业的三大疫病之一。近年来,由于我国水貂养殖规模的扩大和养殖密度的提高,养殖方式较为原始及AD的防范力度不够等原因,导致AD在我国水貂养殖地区广泛流行且有扩大的趋势。国内缺乏AD流行病学的详细研究资料,致使AD的致病机理等研究滞后。目前还没有预防AD的疫苗,国际上普遍使用对流免疫电泳（Counterimmunoelectrophoresis, CIEP）技术来定期检测筛查AD并淘汰病貂净化貂群。但CIEP法繁琐,很难在短时间内完成大量样品的筛查。随着基层养殖市场对AD筛查的逐渐重视,急需建立一种高通量、高灵敏度的AD诊断方法。本研究首先对国内主要水貂养殖地区进行AD分子流行病学调查。共收集五个主要...
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：64 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
样品采集养殖场所在区域
AMM-Utah-1-kit S 1.. 19<i2图2. 2 DNAStar软件对34株序列的氨基酸对比分析，只显示出不同的氨基酸位点。Fig.2.2 Alignment of the amino acid sequences of the AMDV VP2 protein found in 34 AMDV samples. Only theamino acids that differ from the consensus sequence are shown.2.3.3系统分析
图3.7表达产物的Western-blot检测Fig3.7 Westem-blot test for expressed proteinHis标签单抗为一抗，HRP标记的山羊抗小鼠的IgG为二抗；B:以感染水紹阿留申病毒的病紹阳性血清为，以HRP标记的兔抗紹的丨gG为二抗；M:预染的蛋白质分子量标准；1:重组杆状病毒感染的sf9细胞的蛋白；2:阿留申病毒商业抗原；3:正常sf9细胞蛋白；Immunoblot analysis with Anti-His Tag mouse monoclonal antibody and goat anti-mouse IgG-HRP; B: Immunoblotysis with a pool of infected mink by ADV and rabbit anti-mink IgG-HRP as antibody; M: molecular weight markers: Total lysates of sf9 cells infected recombinant baculovirus: 2: Commercial antigen of ADV; 3: uninfected sf9 cells8重组蛋白与商业抗原的CIEP对比试验用表达蛋白作为检测抗原进行CIEP试验，分别以水紹的AMDV阳性血清（60份），AMDV血清（20份），以及AMDV阴性MEV阳性血清（20份）为检测对象，与AMDV商业抗原对比，每组均设重复。对重组蛋白与商此抗原的特异性、重复性和敏感性及稳定性进行验证。。8. 1重组蛋白与商业抗原的特异性和重复性试验将重组蛋白作为检测抗原进行CIEP试验，分别以水紹的AMDV阳性血清（60份），AMDV
本文编号：3326704
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：64 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
样品采集养殖场所在区域
AMM-Utah-1-kit S 1.. 19<i2图2. 2 DNAStar软件对34株序列的氨基酸对比分析，只显示出不同的氨基酸位点。Fig.2.2 Alignment of the amino acid sequences of the AMDV VP2 protein found in 34 AMDV samples. Only theamino acids that differ from the consensus sequence are shown.2.3.3系统分析
图3.7表达产物的Western-blot检测Fig3.7 Westem-blot test for expressed proteinHis标签单抗为一抗，HRP标记的山羊抗小鼠的IgG为二抗；B:以感染水紹阿留申病毒的病紹阳性血清为，以HRP标记的兔抗紹的丨gG为二抗；M:预染的蛋白质分子量标准；1:重组杆状病毒感染的sf9细胞的蛋白；2:阿留申病毒商业抗原；3:正常sf9细胞蛋白；Immunoblot analysis with Anti-His Tag mouse monoclonal antibody and goat anti-mouse IgG-HRP; B: Immunoblotysis with a pool of infected mink by ADV and rabbit anti-mink IgG-HRP as antibody; M: molecular weight markers: Total lysates of sf9 cells infected recombinant baculovirus: 2: Commercial antigen of ADV; 3: uninfected sf9 cells8重组蛋白与商业抗原的CIEP对比试验用表达蛋白作为检测抗原进行CIEP试验，分别以水紹的AMDV阳性血清（60份），AMDV血清（20份），以及AMDV阴性MEV阳性血清（20份）为检测对象，与AMDV商业抗原对比，每组均设重复。对重组蛋白与商此抗原的特异性、重复性和敏感性及稳定性进行验证。。8. 1重组蛋白与商业抗原的特异性和重复性试验将重组蛋白作为检测抗原进行CIEP试验，分别以水紹的AMDV阳性血清（60份），AMDV
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