促产蛋核酸制剂的改造及对其安全性初步评价
发布时间：2021-08-09 00:30
核酸制剂作为一种新兴的生物制品,在感染性疾病、遗传病和肿瘤等疾病的预防和治疗以及促进动物生长繁殖方面具有很大潜力。根据国际规定的标准,核酸制剂大规模生产使用以前首先需要对其进行严格的安全性评价。其中制剂与宿主染色体DNA是否会发生整合成为一个公众和研究者最为关注的问题。本实验室在早期的研究工作中开发了一种可以有效改善丝毛乌骨鸡产蛋性能的核酸制剂，我们应用Qiagen公司生产的质粒中提试剂盒大量制备注射用核酸制剂，通过建立一整套安全性评价方案，并按照方案设计的周期采样，通过试剂盒提取注射过该核酸制剂的洛岛红鸡的各个相关组织的基因组，包括肌肉（注射组织）、肠道、卵巢、肝脏、胃、心脏、输卵管、脾脏、肾脏等九个组织，每次采样三只鸡即三个重复，采样时间分别为0天、3天、7天，以后每隔一周定期采样。并设计相应引物进行PCR扩增，检测核酸制剂在不同组织中持续存在的时间。对该制剂的安全性进行的初步分析表明该制剂在洛岛红蛋鸡体内最长有效发挥作用的时间大约为21天。显然时间较短,为此,本研究在原制剂的基础上对其进行改造，添加了SV40大T抗原表达结构和SV40复制起始位点，通过这一改造使其有效发挥作用的时...
【文章来源】：河北农业大学河北省
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
JG5-SV40质粒的酶切鉴定注：1.JG5-SV40质粒克隆1；2.JG5-SV40质粒克隆2
图 7 各组织基因组电泳图注：1-21 电泳道样品顺序是： 1 肌肉、2 肌肉、3 肌肉、1 肠、2 肠、3 肠、1 卵巢、2 卵巢、3 卵巢、1 肝脏、2 肝脏、3 肝脏、1 胃、2 胃、3 胃、1 心脏、2 心脏、3 心脏、1 输卵管、2 输卵管、3 输卵管Figure 7The organisations electrophoregram of the genomeNote : Sample order of lanes1-21: 1Muscle, 2 Muscle, 3 Muscle,1 Intestines, 2 Intestines,3Intestines,1 Ovaries,2Ovaries, 3Ovaries, 1Liver, 2Liver,3Liver,1Stomach, 2Stomach,3Stomach, 1Heart,2Heart,3Heart, 1Fallopian tube, 2Fallopian tube, 3Fallopian tube,M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 D1 D2 D3
图 7 各组织基因组电泳图注：1-21 电泳道样品顺序是： 1 肌肉、2 肌肉、3 肌肉、1 肠、2 肠、3 肠、1 卵3 卵巢、1 肝脏、2 肝脏、3 肝脏、1 胃、2 胃、3 胃、1 心脏、2 心脏、3 心脏、1 输卵管、2 输卵管、3 输卵管Figure 7The organisations electrophoregram of the genomeNote : Sample order of lanes1-21: 1Muscle, 2 Muscle, 3 Muscle,1 Intestines, 2 Intestines,3Intestines,1 Ovaries,2Ovaries, 3Ovaries, 13Liver,1Stomach, 2Stomach,3Stomach, 1Heart,2Heart,3Heart, 1Fallopian tube, 2Fallopian tube, 3Fallopian tube,M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 D1 D2 D3
【参考文献】：
期刊论文
[1]一种快速简便高通量筛选重组克隆的方法[J]. 董冰雪,李玉英,叶壮清,耿三春,李运会,宋雅菲,刘伟. 江苏农业科学. 2012(06)
[2]河北柴鸡与罗曼蛋鸡的屠宰性能比较[J]. 杨树玲,李祥龙,魏中华,周荣艳,李兰会,王学静. 贵州农业科学. 2012(04)
[3]乌鸡的价值及养殖前景分析[J]. 邹小金,施从福,施小生,邱小荣. 养殖与饲料. 2011(07)
[4]基因治疗20年[J]. 毛建平. 中国生物工程杂志. 2010(09)
[5]一种快捷可靠的大肠杆菌重组质粒筛选方法[J]. 田丽春,黄光瑞,陈亮,刘荧,张桂敏,马立新. 湖北大学学报(自然科学版). 2008(02)
[6]怎样提高规模化柴鸡场柴鸡蛋的品质[J]. 李春来,李文海,王爱清. 中国畜禽种业. 2008(08)
[7]携带HCV核心蛋白原核表达质粒与真核表达质粒的减毒伤寒沙门菌诱导小鼠免疫应答之比较[J]. 陈志辉,赵平,吴淑梅,曹洁,张斌,万谟彬,柯金山,戚中田. 生物工程学报. 2007(05)
[8]一种简便快速筛选重组子的方法[J]. 崔锦,李林珂,马向东. 生物技术. 2005(06)
[9]一种简便快速筛选重组子的方法[J]. 张桂敏,刘振,李春华,马立新. 湖北大学学报(自然科学版). 2005(03)
[10]激生1号疫苗免疫怀孕母猪的试验初探[J]. 朱君,许家勇,李峰. 当代畜牧. 2004(12)
本文编号：3330989
【文章来源】：河北农业大学河北省
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
JG5-SV40质粒的酶切鉴定注：1.JG5-SV40质粒克隆1；2.JG5-SV40质粒克隆2
图 7 各组织基因组电泳图注：1-21 电泳道样品顺序是： 1 肌肉、2 肌肉、3 肌肉、1 肠、2 肠、3 肠、1 卵巢、2 卵巢、3 卵巢、1 肝脏、2 肝脏、3 肝脏、1 胃、2 胃、3 胃、1 心脏、2 心脏、3 心脏、1 输卵管、2 输卵管、3 输卵管Figure 7The organisations electrophoregram of the genomeNote : Sample order of lanes1-21: 1Muscle, 2 Muscle, 3 Muscle,1 Intestines, 2 Intestines,3Intestines,1 Ovaries,2Ovaries, 3Ovaries, 1Liver, 2Liver,3Liver,1Stomach, 2Stomach,3Stomach, 1Heart,2Heart,3Heart, 1Fallopian tube, 2Fallopian tube, 3Fallopian tube,M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 D1 D2 D3
图 7 各组织基因组电泳图注：1-21 电泳道样品顺序是： 1 肌肉、2 肌肉、3 肌肉、1 肠、2 肠、3 肠、1 卵3 卵巢、1 肝脏、2 肝脏、3 肝脏、1 胃、2 胃、3 胃、1 心脏、2 心脏、3 心脏、1 输卵管、2 输卵管、3 输卵管Figure 7The organisations electrophoregram of the genomeNote : Sample order of lanes1-21: 1Muscle, 2 Muscle, 3 Muscle,1 Intestines, 2 Intestines,3Intestines,1 Ovaries,2Ovaries, 3Ovaries, 13Liver,1Stomach, 2Stomach,3Stomach, 1Heart,2Heart,3Heart, 1Fallopian tube, 2Fallopian tube, 3Fallopian tube,M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 D1 D2 D3
【参考文献】：
期刊论文
[1]一种快速简便高通量筛选重组克隆的方法[J]. 董冰雪,李玉英,叶壮清,耿三春,李运会,宋雅菲,刘伟. 江苏农业科学. 2012(06)
[2]河北柴鸡与罗曼蛋鸡的屠宰性能比较[J]. 杨树玲,李祥龙,魏中华,周荣艳,李兰会,王学静. 贵州农业科学. 2012(04)
[3]乌鸡的价值及养殖前景分析[J]. 邹小金,施从福,施小生,邱小荣. 养殖与饲料. 2011(07)
[4]基因治疗20年[J]. 毛建平. 中国生物工程杂志. 2010(09)
[5]一种快捷可靠的大肠杆菌重组质粒筛选方法[J]. 田丽春,黄光瑞,陈亮,刘荧,张桂敏,马立新. 湖北大学学报(自然科学版). 2008(02)
[6]怎样提高规模化柴鸡场柴鸡蛋的品质[J]. 李春来,李文海,王爱清. 中国畜禽种业. 2008(08)
[7]携带HCV核心蛋白原核表达质粒与真核表达质粒的减毒伤寒沙门菌诱导小鼠免疫应答之比较[J]. 陈志辉,赵平,吴淑梅,曹洁,张斌,万谟彬,柯金山,戚中田. 生物工程学报. 2007(05)
[8]一种简便快速筛选重组子的方法[J]. 崔锦,李林珂,马向东. 生物技术. 2005(06)
[9]一种简便快速筛选重组子的方法[J]. 张桂敏,刘振,李春华,马立新. 湖北大学学报(自然科学版). 2005(03)
[10]激生1号疫苗免疫怀孕母猪的试验初探[J]. 朱君,许家勇,李峰. 当代畜牧. 2004(12)
本文编号：3330989
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