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快速鉴别诊断不同亚型鸭肝炎病毒的多重RT-PCR检测方法的建立和应用

发布时间:2021-08-09 13:43
  鸭病毒性肝炎(duck viral hepatitis, DVH)是由鸭病毒性肝炎病毒(duck hepatitis virus,DHV)引起雏鸭的一种发病急、死亡快、死亡率高的疾病,主要感染3周龄以内的雏鸭剖检病变主要存在于肝脏。根据2009年的国际病毒分类委员第十次分类报告,将DHV分为鸭甲肝病毒(DHAV),鸭星状病毒1型(DAstV-1),鸭星状病毒2型(DAstV-1)三个血清型。同时,DHAV又包括三个基因亚型或血清亚型,分别称为DHAV-1、DHAV-2和DHAV-3。鸭肝炎病毒的三个血清型及鸭甲肝病毒三个亚型之间均没有明显的抗原交叉保护,给鸭肝炎病毒的防治带来了很大的困难。DHAV-1一直是我国流行的优势血清型,但近年来DHAV-3在我国广泛流行,甚至一些地区出现DHAV-1和DHAV-3共流行的现象,DAstV-1在我国的出现由进一步增加了鸭病毒性肝炎的防治难度。本研究建立了可以快速鉴别诊断不同亚型鸭肝炎病毒单纯或混合感染的多重RT-PCR方法,并对2011年从山东,四川,河南,广东四省随机采集的病料以及2012年从山东省不同鸭场采集的病料进行了鉴别诊断。本研究共分为... 

【文章来源】:山东农业大学山东省

【文章页数】:76 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

快速鉴别诊断不同亚型鸭肝炎病毒的多重RT-PCR检测方法的建立和应用


鸭胚和雏鸭接种DAstV-1临床症状及剖检变化

凝胶电泳,产物,组序,核苷酸同源性


合 结 构 AAAAAAC , 紧 接 着 在 3736 到 3742 位 置 有 一 个 二 级 颈CTGAAACATCATGGCCCC。ORF1b和ORF2也不在同一个开放阅读框重叠区(图3-3)。WF1201株的全基因组序列与GeneBank中登录的5株因组序列用DNASTAR.Lasergene.v7.1中的Clustal W方法进行同源新1株的全基因组序列与GeneBank中登录的C-NGB株(江苏地区分离株)高,为98.7%,与其他四株(DA06株、DA07株为河北地区分离株;DA08株京地区分离株)全基因组序列的核苷酸同源性为92.2%~93.3%(图3-4)

基因组结构,核苷酸同源性,北京地区,凝胶电泳


株为北京地区分离株)全基因组序列的核苷酸同源性为92.2%~93.3%(图3-4)。图3-2 PCR产物凝胶电泳图Fig. 3-2 amplification fragments of the DAstV-1 WF1201 strainM: DL5000 plus DNA Marker; 1-10: 10 PCR amplification fragments uing primers of 1F/R-10F/R. 11: PCRamplification fragment using primer 3′ Race

【参考文献】:
期刊论文
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[3]鸭肝炎病毒分子流行病学分析[J]. 袁率珍,范书才,李虹,姜畔,张兵.  中国预防兽医学报. 2010(11)
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[6]鸭病毒性肝炎卵黄抗体防治鸭肝炎研究[J]. 王岳,薛乐全,张壮志.  山东畜牧兽医. 2008(11)
[7]一株Ⅹ型鸭疫里默氏杆菌GN52稳定性的研究[J]. 孙亚妮,赵钦,姜世金,张兴晓,孔义波,魏秀丽.  微生物学通报. 2008(07)
[8]鸭病毒性肝炎的病原分离和鉴定[J]. 陈海军,程安春,汪铭书,朱德康,杨苗,周毅,陈孝跃.  中国家禽. 2007(12)
[9]一例鸭病毒性肝炎病原的分离鉴定[J]. 吴忆春,苗立中,郭时金.  中国家禽. 2007(07)
[10]Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒RT-PCR检测方法的建立[J]. 马秀丽,宋敏训,黄兵,廖明,辛朝安.  家禽科学. 2006(11)

硕士论文
[1]Ⅰ型鸭肝炎病毒LY0801株的分离鉴定及致病性研究[D]. 高继明.山东农业大学 2009



本文编号:3332175

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