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牛副流感病毒3型血清学调查及其单克隆抗体的制备与应用

发布时间:2021-08-09 13:27
  牛副流感病毒3型(Bovine parainfluenza virus type3, BPIV3)是牛引起牛呼吸道疾病的的一种重要病原。BPIV3是单股负链RNA病毒,属于单分子负链RNA目、副黏病毒科、副黏病毒亚科、呼吸道病毒属的成员,也常被称为“运输热”病毒。BPIV3可引起犊牛肺炎和非典型间质性肺炎,BPIV3可与BVDV、IBRV和BRSV等病毒性病原及巴氏杆菌等细菌性病原共同引起牛的呼吸道疾病综合症(Bovine respiratory disease complex. BRDC),每年都会给世界养牛业造成巨大的经济损失。BPIV3的血清学调查表明,BPIV3在我国的感染和分布是非常广泛的。目前国内对BPIV3的研究处于起步阶段,尚没有商品化的诊断试剂和疫苗存在,严重制约着国内对BPIV3的防控和养牛业的健康发展。为调查BPIV3在我国的血清学流行情况,本研究从黑龙江、辽宁、新疆、云南、贵州、广西、河北、山东、河南、江西、湖南和福建等12个省区采集牛血液样品,经离心分离血清后选取2489份样品,采用血清中和试验检测血清中的BPIV3抗体,结果显示除江西省血清样品阳性率为27.... 

【文章来源】:中国农业科学院北京市

【文章页数】:70 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

牛副流感病毒3型血清学调查及其单克隆抗体的制备与应用


BPIV3接种MDBK细胞的病变(400X)

省份,江西,牛血清,贵州


图2.2 BPIV3全国分布图Fig. 2.2 Distribution of BPIV3 in China在对牛感染BPrV3的诊断中,由于BPIV3的高变异性而使得血清中抗BPIV3抗体的检测在BPrV3感染的检测中具有了非常重要的意义(Allen etal.,1992)。国外很多国家对BPIV3的流行病学调査显示BPIV3的感染率很高,牛血清样品中的BPIV3抗体水平也很高。我国对BPIV3的报道比较晚,2001年童泽恩等根据内蒙地区接牛和幼牛的临床症状判断和病理变化判断为BPIV3的感染(童泽恩,2008),这是国内首次关于BPIV3的报道。BPrV3的传播在很大程度上是由于牛只的长途转运。霍志云等对我国吉林、内蒙和山西3个省区的BPIV3进行血清学调查,结果显示三个省份的BPIV3感染非常严重(霍志云等,2011)。本次调查的12个省份中,除了江西等个别省份外,其他省份的牛血清BPIV3阳性率很高,这表明BPIV3在我国的流行也是非常普遍且很严重的。江西等省的BPIV3抗体阳性率相对较低,究其原因:第一,有些省份养牛业不发达,且以家用水牛居多有关,比如江西省;第二,地理环境影响,某些省份与外部的交流较少,也是制约BPIV3传播的一个重要因素,比如贵州、江西等省份;第三如河南和贵州等省经济欠发达,和其他地区的牲畜贸易交流较少也可以明显减少BPIV3的传播。霍志云等的BPIV3 Jil清学调査结果证明在养殖业发达的省份BPIV3感染是非常值得关注的。2.3.2我国BPIV3区域性分布差异分析

杂交瘤细胞


— + — + — + —0.186 1.233 0.127 0.819 0.102 0.583 0.0800.205 1.426 0.132 0.870 0.124 0.520 0.0920.198 1.525 0.134 1.031 0.132 0.627 0.0940.214 1.669 0.150 1.358 0.136 0.757 0.1010.238 1.777 0.150 1.585 0.145 0.914 0.1120.252 1.934 0.165 1.627 0.163 1.188 0.1200.301 2.108 0.197 1.889 0.183 1.335 0.1340.287 2.142 0.211 1.832 0.198 1.413 0.143“+”代表阳性血清。蹄选、细胞融合和阳性细胞株蹄选过程,蹄选出抗BPIV3株再经3次的克隆化蹄选,以建立好的间接ELISA方分泌性良好的杂交瘤细胞克隆,分别为13D10和19泌单抗,经检测,细胞的冻存、复苏和生长状况也

【参考文献】:
期刊论文
[1]北方三省(区)牛副流感病毒3型的血清学调查[J]. 霍志云,童钦,胡嘉欣,王炜.  动物医学进展. 2012(09)
[2]牛副流感病毒3型NP单抗的制备及初步应用[J]. 吕闯,朱远茂,董秀梅,蔡红,于作,高欲燃,薛飞.  中国预防兽医学报. 2011(12)
[3]牛副流感病毒3型的分离鉴定及感染牛抗体消长规律的研究[J]. 周玉龙,吴海涛,任亚超,耿静,王密,谢金鑫,朴范泽.  中国人兽共患病学报. 2011(01)
[4]牛副流感病毒3型的分离鉴定[J]. 刘鹏,侯喜林,周玉龙,朴范泽.  微生物学通报. 2009(09)
[5]一起疑似牛副流感的诊断和治疗报告[J]. 童泽恩,王索柱,郭殿仁,陈劲涛,李学庆.  中国动物检疫. 2002(08)

博士论文
[1]牛副流感病毒3型山东分离株致病性研究及荧光定量RT-PCR的建立[D]. 董秀梅.中国农业科学院 2012

硕士论文
[1]牛副流感病毒3型NP单抗制备及固相阻断ELISA的建立和应用[D]. 吕闯.中国农业科学院 2012
[2]牛呼吸道病毒病血清学调查及其多重RT-PCR诊断方法的建立与初步应用[D]. 童钦.吉林农业大学 2012
[3]牛副流感病毒3型山东分离株核衣壳蛋白表达鉴定、多抗制备及应用[D]. 史鸿飞.中国农业科学院 2010
[4]牛副流感病毒3型的分离鉴定和间接ELISA方法建立及初步应用[D]. 刘鹏.黑龙江八一农垦大学 2010
[5]牛副流感病毒3型的分离鉴定和间接ELISA方法建立及初步应用[D]. 吴海涛.黑龙江八一农垦大学 2010



本文编号:3332151

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