猪不同器官组织猪圆环病毒3型载量的实时荧光定量PCR检测

发布时间：2021-08-09 12:46

　　为实现PCV3快速定量检测的需求,参考GenBank中已登录的PCV3 rep基因序列设计引物,建立了PCV3 TaqMan探针法实时荧光PCR检测方法,并进一步构建标准曲线,采用绝对定量法对猪的心、肝、脾、肺、肾、淋巴结组织进行PCV3病毒载量的检测。结果显示,所建立的PCV3实时荧光定量PCR检测方法具有良好的敏感性和特异性,敏感性可达16.3 copies/μL质粒DNA。病毒载量检测结果显示,在肺和淋巴结中检测到了PCV3,且淋巴结中的病毒含量明显高于肺中的病毒含量,这表明不同组织器官中PCV3的病毒含量存在较大差异。 

【文章来源】：动物医学进展. 2020,41(11)北大核心

【文章页数】：4 页

【部分图文】：

PCV3荧光PCR检测质粒的结果

经敏感性试验检测(图2),该方法的检测灵敏度可达16.3 copies质粒DNA,其对应的Ct值为37.65。2.3 PCV3实时荧光定量PCR检测方法的特异性检测结果

经检测,得到PCV3实时荧光定量PCR方法的标准曲线(图4),方程式为:y=-3.431 8x+41.666,其扩增效率为95.6%,反应相关系数为0.998 8,符合荧光定量的要求,可以用于PCV3病毒的绝对定量分析。对病猪的心、肝、脾、肺、肾、淋巴结进行PCV3实时荧光定量PCR检测,反应结束后,分别记录Ct值,计算出平均Ct值,根据绝对定量方法计算不同组织器官中PCV3的病毒载量。结果显示(表1),仅在肺和淋巴结中检测到了PCV3,而且淋巴结中的病毒载量是肺中的70.8倍。图4 PCV3荧光定量PCR检测方法的标准曲线

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3332092