猪附红细胞体灭活疫苗的制备和免疫原性的研究
发布时间：2021-08-10 12:12
猪附红细胞体（M.suis）引起猪附红细胞体病,临床上表现为发热、贫血、黄疸等症状,给我国养猪业带来较为严重的隐患与危害。近年来,报道了一些临床上猪附红细胞体与猪传染性胸膜肺炎、猪圆环病毒、巴氏杆菌等混合感染的病例,这大大增加了该病的治疗难度。为了减少因该病的发生和流行给养猪业带来的损失,应加强对该病的预防。本研究对猪附红细胞体免疫原性进行了初步研究,制备出了猪附红细胞体白油佐剂疫苗和蜂胶佐剂疫苗,对猪附红细胞体病的预防有一定应用价值。本研究分为3个部分,1)：本实验室保存的猪附红细胞体抗原通过姬姆萨染色方法和分子生物学的方法进行检测,根据猪附红细胞体特异序列（AJ504999）设计引物,PCR扩增,在靠近780bp的位置出现一条片段,与设计的引物所在片段大小一致,而阴性对照未出现条带,经测序分析,与AJ504999序列的同源性达99.4%。2)猪附红细胞体疫苗制备与检测。通过灭活时间、灭活剂甲醛的浓度、灭活的温度等方面进行猪附红细胞体灭活条件的摸索,选择出最好的灭活时间和温度分别为24h、37℃,甲醛的浓度为0.4%,采用乳化法分别添加白油和蜂胶佐剂获得猪附红细胞体灭活疫苗,检测了白...
【文章来源】：湖南农业大学湖南省
【文章页数】：65 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 绪论
1.1 猪附红细胞体
1.1.1 猪附红细胞体的分类
1.1.2 猪附红细胞体致病机理
1.1.3 附红细胞体病的流行病学
1.1.4 猪附红细胞体诊断
1.1.5 附红细胞体的预防和治疗
1.1.6 国内外研究现状
1.2 附红细胞体免疫原性研究
1.2.1 佐剂和疫苗
1.2.2 附红细胞体免疫学研究
1.3 研究的目的和意义
第二章 猪附红细胞体抗原检测
2.1 试剂和材料
2.1.1 试剂
2.1.2 材料
2.1.3 主要仪器设备
2.1.4 试验用溶液及其配制
2.2 试验方法
2.2.1 猪附红细胞体体外培养与纯化
2.2.2 猪附红细胞体显微镜检查
2.2.3 猪附红细胞体PCR检测
2.3 试验结果
2.3.1 猪附红细胞体显微镜检查结果
2.3.2 猪附红细胞体PCR产物
2.4 分析与讨论
第三章 猪附红细胞体灭活疫苗的制备与检测
3.1 实验材料
3.1.1 试剂
3.1.2 材料
3.1.3 试验仪器
3.1.4 主要试剂的配制
3.2 实验方法
3.2.1 猪附红细胞体灭活
3.2.2 佐剂的制备
3.2.3 灭活疫苗的检验
3.3 实验结果
3.3.1 灭活条件
3.3.2 佐剂的性状
3.3.3 白油佐剂灭活疫苗检测
3.3.4 疫苗无菌检测
3.3.5 疫苗的安全性
3.4 分析与讨论
第四章 猪附红细胞体灭活疫苗免疫以及免疫原性检测
4.1 实验材料
4.1.1 试剂
4.1.2 材料
4.1.3 试验仪器
4.1.4 主要试剂的配制
4.2 实验方法
4.2.1 猪附红细胞体免疫原性研究
4.2.2 动物免疫
4.2.3 实验室检测
4.2.4 数据处理
4.3 实验结果
4.3.1 猪附红细胞体免疫后体温变化
4.3.2 间接ELISA最佳抗原和血清稀释倍数
4.3.3 抗体水平消长
4.3.4 小鼠脾脏和胸腺指数
4.3.5 淋巴细胞的分离
4.3.6 淋巴细胞转化实验
4.3.7 猪血清的抗体水平
4.3.8 血清中生化指标
4.3.9 血清中的SOD活性和MDA检测结果
4.4 讨论
第五章 结论与展望
5.1 结论
5.1.1 猪附红细胞体抗原检测
5.1.2 猪附红细胞体灭活的疫苗制备与检测
5.1.3 猪附红细胞体灭活疫苗免疫以及免疫原性检测
5.2 展望
参考文献
缩略词(Abbreaviation)
致谢
作者简历
本文编号：3334040
【文章来源】：湖南农业大学湖南省
【文章页数】：65 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 绪论
1.1 猪附红细胞体
1.1.1 猪附红细胞体的分类
1.1.2 猪附红细胞体致病机理
1.1.3 附红细胞体病的流行病学
1.1.4 猪附红细胞体诊断
1.1.5 附红细胞体的预防和治疗
1.1.6 国内外研究现状
1.2 附红细胞体免疫原性研究
1.2.1 佐剂和疫苗
1.2.2 附红细胞体免疫学研究
1.3 研究的目的和意义
第二章 猪附红细胞体抗原检测
2.1 试剂和材料
2.1.1 试剂
2.1.2 材料
2.1.3 主要仪器设备
2.1.4 试验用溶液及其配制
2.2 试验方法
2.2.1 猪附红细胞体体外培养与纯化
2.2.2 猪附红细胞体显微镜检查
2.2.3 猪附红细胞体PCR检测
2.3 试验结果
2.3.1 猪附红细胞体显微镜检查结果
2.3.2 猪附红细胞体PCR产物
2.4 分析与讨论
第三章 猪附红细胞体灭活疫苗的制备与检测
3.1 实验材料
3.1.1 试剂
3.1.2 材料
3.1.3 试验仪器
3.1.4 主要试剂的配制
3.2 实验方法
3.2.1 猪附红细胞体灭活
3.2.2 佐剂的制备
3.2.3 灭活疫苗的检验
3.3 实验结果
3.3.1 灭活条件
3.3.2 佐剂的性状
3.3.3 白油佐剂灭活疫苗检测
3.3.4 疫苗无菌检测
3.3.5 疫苗的安全性
3.4 分析与讨论
第四章 猪附红细胞体灭活疫苗免疫以及免疫原性检测
4.1 实验材料
4.1.1 试剂
4.1.2 材料
4.1.3 试验仪器
4.1.4 主要试剂的配制
4.2 实验方法
4.2.1 猪附红细胞体免疫原性研究
4.2.2 动物免疫
4.2.3 实验室检测
4.2.4 数据处理
4.3 实验结果
4.3.1 猪附红细胞体免疫后体温变化
4.3.2 间接ELISA最佳抗原和血清稀释倍数
4.3.3 抗体水平消长
4.3.4 小鼠脾脏和胸腺指数
4.3.5 淋巴细胞的分离
4.3.6 淋巴细胞转化实验
4.3.7 猪血清的抗体水平
4.3.8 血清中生化指标
4.3.9 血清中的SOD活性和MDA检测结果
4.4 讨论
第五章 结论与展望
5.1 结论
5.1.1 猪附红细胞体抗原检测
5.1.2 猪附红细胞体灭活的疫苗制备与检测
5.1.3 猪附红细胞体灭活疫苗免疫以及免疫原性检测
5.2 展望
参考文献
缩略词(Abbreaviation)
致谢
作者简历
本文编号：3334040
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