PEDV细胞适应株全基因组序列测定与分析和抗N蛋白高免血清的制备
发布时间：2021-08-11 00:48
猪流行性腹泻是由猪流行性腹泻病毒引起的猪肠道急性传染性疾病,以哺乳仔猪的高致病性和高死亡率为特征。近年来,猪流行性腹泻的大面积流行给中国乃至世界的养猪业带来了巨大的损失,引起了各国研究人员的关注。为了解现今流行的PEDV毒株的分子生物学特征以及利用原核表达PEDV N蛋白并制备高免血清,本文进行了以下方面的研究:1、PEDV Vero细胞适应株全基因组测序和分析:利用33对含有重叠区域的特异性引物扩增、克隆、测序了由本实验室分离保存的PEDV野毒CH/JX/01株第50代（CH/JX/01/P50）的全基因组序列,结果表明该病毒基因组全长为28,054nt,基因结构顺序与CV777一致,为5’UTR-ORF1a/b-S-ORF3-E-M-N-3’UTR;与CH/JX/01/P0、CH/JX/01/P5和CH/JX/01/P30比对发现其核苷酸并没有发生插入或者缺失的现象,但存在多个核苷酸位点的突变,突变位置主要集中在ORF1a/b、S、E和M基因,且S基因突变个数与低代次毒株相比呈现增加趋势。通过对CH/JX/01/P50的全基因组、S和N基因的遗传进化分析发现CH/JX/01的四代都...
【文章来源】：江西农业大学江西省
【文章页数】：61 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
PEDV模式图和基因结构
图 2.1 猪流行性腹泻病毒 CH/JX/01/P50 株全基因组扩增结果1-33：为 33 段 PEDV 重叠片段的电泳结果；34：为 5’RACE 电泳结果；35：为 3’RACE 电果；M：为 2000bp DNAmarkerFig. 2.1 Amplification result of full-length genome sequence of CH/JX/01/P50Lane 1-33: 33 overlapping fragment of CH/JX/01/P50, Lane 34: 5’RACE products of CH/JX/01
3.1 目的基因扩增结物；2：阴性对照；Mplification result of PEgene；Lane 2：negati增，得到一条与预 2 3 4 5 组克隆质粒的 PCR 鉴CR 产物；M：DNA
本文编号：3335104
【文章来源】：江西农业大学江西省
【文章页数】：61 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
PEDV模式图和基因结构
图 2.1 猪流行性腹泻病毒 CH/JX/01/P50 株全基因组扩增结果1-33：为 33 段 PEDV 重叠片段的电泳结果；34：为 5’RACE 电泳结果；35：为 3’RACE 电果；M：为 2000bp DNAmarkerFig. 2.1 Amplification result of full-length genome sequence of CH/JX/01/P50Lane 1-33: 33 overlapping fragment of CH/JX/01/P50, Lane 34: 5’RACE products of CH/JX/01
3.1 目的基因扩增结物；2：阴性对照；Mplification result of PEgene；Lane 2：negati增，得到一条与预 2 3 4 5 组克隆质粒的 PCR 鉴CR 产物；M：DNA
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