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宿主因子HDAC3及TBL1XR1促进VSV复制的机制研究

发布时间:2021-08-11 04:56
  水疱性口炎(VS)是由水疱性口炎病毒(VSV)感染而引起的一类急性、高度接触性传染病。水疱性口炎病毒作为弹状病毒科、水疱病毒属成员之一,能够感染牛、马、猪等家畜,同时也可以感染啮齿类动物。VSV感染后可以在口唇等部位形成水泡。该病本身虽然很少直接导致患畜死亡,但由此引发的继发性感染会给畜牧经济带来严重的损失。此外,水疱性口炎也是一类人兽共患性传染病,VSV可在人群中传播,患者一般具有流感样症状。鉴于水疱性口炎的公共卫生学意义而开展对VSV致病机制的研究将有助于该疫病的防控与治疗。筛选与VSV侵染进程相关的宿主因子是探索VSV致病机理的重要研究方向。组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylases,HDACs)是一类表观修饰酶,主要参与细胞内染色体的结构修饰和基因的表达调控等进程。HDAC3的主要功能是催化组蛋白发生去乙酰化,维持细胞的表观遗传修饰谱;也可以修饰非组蛋白,调控细胞内的炎性信号通路。本研究发现,以小分子抑制剂RGFP966对HDAC3进行功能性阻断可抑制VSV的复制增殖,通过小RNA干扰的方法对Hdac3进行基因沉默亦可限制病毒复制增殖。不仅如此,在细胞内过表达H... 

【文章来源】:吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:72 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

宿主因子HDAC3及TBL1XR1促进VSV复制的机制研究


RGFP966处理细胞TCID50结果

细胞,荧光,过表达,细胞系


RGFP966处理细胞荧光定量 PCR结果

过表达,细胞系,荧光,慢病毒


根据1.2.4所述方法成功构建Hdac3过表达重组质粒,测序正确后提取质粒进行慢病毒包装。以慢病毒感染细胞72h后用3μg/mL嘌呤霉素进行筛选收获抗性细胞。提取RNA、反转录成cDNA,进行荧光定量PCR检测。以空穿梭质粒包装的病毒所感染、筛选的细胞作为对照组细胞系。结果显示与对照组相比,Hdac3的mRNA水平显著上调(图1.3)。同时收取细胞制备蛋白样品进行Western Blotting检测,发现与对照组比较HDAC3蛋白水平上调(图1.4)。以上结果证实成功获得Hdac3基因过表达细胞系。(* p < 0.05)图1.4 Hdac3过表达细胞系Western Blotting结果

【参考文献】:
期刊论文
[1]国内三维动画技能培训现状分析——以Q动画公司三维动画技能培训现状为例[J]. 何敏.  科技信息. 2010(17)



本文编号:3335498

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