羊口疮病毒威海株和昆明株的分离鉴定及毒力致弱研究

发布时间：2021-08-11 19:47

　　羊口疮（Contagious ecthyma），又名羊接触传染性脓疱。羊口疮是由羊口疮病毒引起，羊口疮病毒属于痘病毒科副痘病毒属。通常病毒不会出现由发病点系统性的传播，相反，是由结痂病料引起环境污染来传播病毒。此病的发病率高，死亡率低，通常情况下，羔羊的死亡率较高。本研究通过采集山东威海地区与云南昆明地区奶山羊养殖场病羊发病部位结痂，进行分离鉴定两株羊口疮病毒。并将羊口疮病毒威海株与昆明株强毒株分别传代，制备其弱毒株，将弱毒株进行了动物安全性试验和动物抗体效价的测定。研究内容和结果如下：1.羊口疮病毒威海株与昆明株的分离鉴定在培养的犊牛睾丸原代细胞上对山东威海市和云南昆明市某奶山羊养殖场疑似羊口疮（Orf）奶山羊病料进行分离，通过观察细胞病变形态、测定病毒滴度和聚合酶链式反应（PCR）等方法对分离的毒株进行鉴定。结果表明，研磨处理后的病毒液接种于犊牛睾丸原代细胞后盲传至第5代出现病变；测得威海株与昆明株第6代分离株病毒滴度分别为106.5TCID50/mL和106.7TCID50/mL；扩增出羊口疮病毒特异性B2L基因。2.羊口疮病毒威海株与昆明株的弱毒株的制备将已鉴定的羊口疮病毒威海... 

【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

威海某奶山羊养殖场疑似患羊口疮羔羊口唇部结痂

Fig 2-1 Scab of Suspected ORF lamb lipsin a farm of Weihai图2-2 昆明某奶山羊养殖场疑似患羊口疮羔羊口唇部结痂Fig 2-2 Scab of Suspected of ORFlamb lips in a farm of Weihai14

2.3.2 细胞培养与病毒增殖结果将采集的结痂病料研磨处理得到的病毒液接种于犊牛睾丸原代细胞上，前 4 代无明显病变，每隔 72h 收集病毒液，盲传至第 5 代时，产生病变，病变主要特点表现为：产生空泡，细胞变圆，聚缩破裂，脱落。如图 2-3 和图 2-4；而正常犊牛睾丸原代细胞培养72h 时，细胞铺满 80%左右，细胞形态呈梭型平铺于细胞瓶底部，如图 2-5。

【参考文献】：
期刊论文
[1]羊口疮病毒灭活疫苗的制备及免疫效果观察[J]. 田婷婷,李杰,姚运亮,李前瑞,许君艳,赵燕青,陈德坤.  动物医学进展. 2013(06)
[2]中西医结合治疗羊传染性脓疮皮炎[J]. 何宏英,田永平.  畜牧兽医杂志. 2012(06)
[3]羊口疮的研究[J]. 沈正达,靳诚,沈斌元,王锡祯,罗德英,卢洪英,潘光炎,滕振文,陈燕军,宋勇,白吉荣,左玉婷,胡永浩,王蒲,汪清,常泽生.  甘肃农大学报. 1989(01)



本文编号：3336782