鸭疫里默氏菌对氟喹诺酮类药物耐药机制的研究

发布时间：2021-08-13 06:36

　　鸭疫里默氏菌病，又名鸭传染性浆膜炎，是危害水禽养殖业最重要细菌性传染病，临床上常用氟喹诺酮类药物治疗该病，然而随着氟喹诺酮类药物不合理使用，鸭疫里默氏菌（Riemerella anatipesifer，RA）对氟喹诺酮类药物产生耐药，甚至表现为多重耐药。目前关于RA对喹诺酮耐药机制的文献很少，本研究旨在调查RA对氟喹诺酮类药物的耐药状况，并从RA的主动外排系统、药物作用靶位基因突变两方面研究RA对氟喹诺酮类药物的耐药机制，为控制RA耐药性的产生提供科学依据。本研究采用K-B纸片法分别测定了31株RA对诺氟沙星、恩诺沙星、环丙沙星、氧氟沙星、左氧氟沙星五种氟喹诺酮类药的敏感性，结果其耐药率分别70.97%、64.52%、61.29%、48.39%和25.81%，其中对诺氟沙星耐药率最高、对左氧氟沙星最为敏感，有8株RA同时对五种氟喹诺酮类药物均耐药，有18株RA表现为同时耐受两种及以上药物，多重耐药率达到58.06%。可见，RA对氟喹诺酮类药物的多重耐药性较为普遍。为研究RA对以上五种氟喹诺酮类药物的主动外排机制，测定了25株RA对氟喹诺酮类药物的最小抑菌浓度（MIC），同时测定加入主动... 

【文章来源】：江西农业大学江西省

【文章页数】：52 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
英文缩略语表
1 前言
    1.1 鸭疫里默氏菌简介
        1.1.1 病原
        1.1.2 形态特点、培养特性
    1.2 细菌产生耐药的机制
    1.3 细菌对喹诺酮类药物耐药机制的研究进展
        1.3.1 喹诺酮类药物的发展
        1.3.2 喹诺酮类药物的作用机制
        1.3.3 细菌对喹诺酮类药物的耐药机制
        1.3.4 结语
    1.4 本研究的目的与意义
2 鸭疫里默氏菌对氟喹诺酮类药物的耐药性检测分析
    2.1 材料
        2.1.1 菌株
        2.1.2 主要试剂和仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 菌株的分离、鉴定
        2.2.2 生化鉴定
        2.2.3 鸭疫里默氏菌的保存及复苏
        2.2.4 Kirby-Baure纸片法药敏试验
        2.2.5 药敏实验结果判定标准见表1-1
    2.3 结果
        2.3.1 菌株的分离鉴定结果
        2.3.2 RA对5种氟喹诺酮类药物的纸片药敏实验结果
    2.4 讨论
    2.5 小结
3 鸭疫里默氏菌对氟喹诺酮类药物外排作用的研究
    3.1 材料与方法
        3.1.1 菌株及培养方法
        3.1.2 氟喹诺酮类药物的配制
        3.1.3 实验仪器
        3.1.4 喹诺酮类药物对鸭疫里默氏菌的最低抑菌浓度（MIC）的测定
        3.1.5 CCCP对鸭疫里默氏菌的抑制作用
        3.1.6 CCCP联合喹诺酮类药物对鸭疫里默氏菌的MIC的测定
    3.2 结果
        3.2.1 鸭疫里默氏菌对喹诺酮类药物的敏感性
        3.2.2 外排泵抑制剂对鸭疫里默氏菌生长的抑制试验
        3.2.3 喹诺酮类药物加入外排泵抑制剂后的体外药物敏感试验
    3.3 讨论
    3.4 小结
4 鸭疫里默氏菌DNA促旋酶和拓扑异构酶IV基因的分析
    4.1 材料
        4.1.1 菌株
        4.1.2 主要试剂和仪器
    4.2 方法
        4.2.1 细菌的复苏
        4.2.2 RA模板DNA的提取
        4.2.3 目的片段的PCR扩增
        4.2.4 PCR产物的胶回收
        4.2.5 纯化回收的产物的连接和转化
        4.2.6 阳性重组质粒的筛选
        4.2.7 目的片段的测序和分析
    4.3 结果
        4.3.1 氟喹诺酮耐药基因的扩增结果
        4.3.2 gyrA、gyrB、parC、parE测序结果与分析
    4.4 讨论
    4.5 小结
全文总结
参考文献
致谢
附录


【参考文献】：
期刊论文
[1]鸭疫里默氏菌的血清型及药物敏感性分析[J]. 程龙飞,陈红梅,施少华,傅光华,万春和,傅秋玲,黄瑜,林建生.  中国动物传染病学报. 2013(04)
[2]4种外排泵抑制剂对鲍曼不动杆菌耐药性的抑制影响[J]. 周云,凌保东.  中国抗生素杂志. 2013(06)
[3]苏中地区鸭疫里氏杆菌血清型鉴定和药敏试验[J]. 刘运镇,陈高,徐婷婷,桂文龙.  江苏农业科学. 2013(02)
[4]荆州地区鸭疫里默氏杆菌的药敏试验及其临床应用[J]. 陈振华,罗碧毅.  养殖与饲料. 2013(01)
[5]珠三角及邻地鸭疫里默氏杆菌主要生物学特性的研究[J]. 张济培,张小峰,陈建红,罗满林,司兴奎.  中国预防兽医学报. 2012(02)
[6]桂林市鸭疫里默氏杆菌的血清型鉴定及耐药性研究[J]. 阳艳洁,蒋福信,王星,曾维军,秦斌,唐前勇,何广,周丽珍.  养禽与禽病防治. 2011(11)
[7]细菌对氟喹诺酮类药物耐药机制的研究进展[J]. 方可华,于锋英.  上海医药. 2011(05)
[8]鸭疫里默氏杆菌的分离鉴定及耐药性研究[J]. 谢永平,陈泽祥,许力干,胡帅,徐光霞,禤雄标,杨威.  广西农业科学. 2010(07)
[9]肠球菌对氟喹诺酮药物的敏感性及利血平的影响[J]. 吴英,杨祚升.  现代预防医学. 2010(08)
[10]鸭疫里默氏菌2型分离鉴定及药敏试验[J]. 张再辉,刘吉山,沈志强,王艳,苗立中,管宇.  山东农业科学. 2009(10)

博士论文
[1]鸭疫里默氏杆菌基因分型及耐药机理的研究[D]. 仲崇岳.四川农业大学 2009

硕士论文
[1]鸭疫里默氏杆菌氨基糖苷类和喹诺酮类耐药基因的检测与序列分析[D]. 杨芳芳.山东农业大学 2013
[2]多重耐药鲍曼不动杆菌主动外排系统耐药基因的研究[D]. 尹文君.南华大学 2012



本文编号：3339953