抗ALV-J MF59/TLR7/8-Agonist佐剂重组Gp85蛋白疫苗的研制及对鸡的免疫效果研究
发布时间：2021-08-13 12:57
J亚群禽白血病病毒（Subgroup J Avian leukosis Virus,ALV-J）是上世纪90年代从肉用型鸡群中分离的一种由反转录病毒引起的高度传染性的新型禽白血病病毒,主要引起骨髓细胞瘤。1999年我国首次从白羽肉鸡中分离出该病毒。目前已出现大量在我国地方品系鸡群以及蛋鸡中关于ALV-J感染的报道?ALV-J的广泛传播,已给我国养禽业造成了不可估量的潜在风险和经济损失。为控制和预防ALV-J的流行,保护优良地方品系鸡,国家开始对地方种鸡实施种群净化的战略决策?但由于我国种鸡品系和种群数量大、饲养不规范和饲养密集等特点,需要继续加强对ALV-J的研究,并探索更有效的防治措施以降低各鸡群的ALV-J感染率和发病率?疫苗预防对于动物性传染病的控制,一直是一种行之有效的方法,但针对ALV-J,至今仍无有效的疫苗可在生产中加以应用。因此,ALV-J疫苗的研制显得尤为迫切。本研究根据已发表的ALV-J囊膜蛋白gp85基因序列,设计一对特异性引物。从分离自我国肉鸡样品的ALV-J NX0101毒株cDNA中扩增得到目的基因,并通过PCR及测序鉴定。将gp85目的基因连接至Pet28a...
【文章来源】：山东农业大学山东省
【文章页数】：57 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
Abstract
1 前言
1.1 J亚群禽白血病病毒概述
1.1.1 ALV-J的一般生物学特性
1.1.2 ALV-J的分子生物学特征
1.1.3 ALV-J的诊断研究与防治现状
1.2 疫苗佐剂概述
1.2.1 MF59佐剂研究进展
1.2.2 R848研究进展
1.2.3 MF59与R848的制备方法
1.3 本研究目的意义
2 材料与方法
2.1 材料
2.1.1 主要实验仪器
2.1.2 实验材料
2.1.3 实验动物
2.1.4 培养基的配制
2.1.5 其他相关溶液的配制
2.2 方法
2.2.1 重组表达载体Pet28a-gp85的构建
2.2.2 ALV-J gp85蛋白的制备
2.2.3 ALV-J gp85蛋白佐剂疫苗的制备
2.2.4 佐剂疫苗免疫效果研究
2.3 数据处理
3 结果与分析
3.1 重组表达载体Pet28a-gp85的鉴定
3.2 gp85蛋白的制备
3.2.1 gp85蛋白的诱导表达、纯化及免疫原性分析结果
3.2.2 蛋白浓度的测定结果
3.3 重组gp85蛋白MF59/R848佐剂疫苗的制备
3.3.1 MF59/R848佐剂疫苗稳定性的测定结果
3.3.2 MF59/R848佐剂疫苗安全性的检验结果
3.4 ALV-J gp85重组蛋白与免疫佐剂联合接种诱导免疫保护的研究
3.4.1 血清中ALV-J特异性抗体的检测
3.4.2 病毒血症的检测
4 讨论
4.1 J亚群禽白血病病毒的流行现状
4.2 重组gp85蛋白MF59/R848佐剂疫苗的质量检验
4.3 重组gp85蛋白MF59/R848佐剂疫苗的免疫效果
4.4 两种佐剂疫苗效果对比研究
5 结论
参考文献
致谢
攻读学位期间发表论文情况及著作
【参考文献】：
期刊论文
[1]ALV-Jgp85重组蛋白与免疫佐剂联合接种雏鸡诱导免疫保护的研究[J]. 窦文文,李宏梅,成子强,刘建柱,刘海港,井维芳,崔治中,郭慧君. 中国预防兽医学报. 2013(03)
[2]禽白血病病毒研究的过去、现在和将来[J]. 崔治中. 生命科学. 2012(04)
[3]兽用疫苗佐剂的研究及应用现状[J]. 任锐,吕雪峰,孟宪奎. 吉林畜牧兽医. 2011(05)
[4]诱发血管瘤型J亚群禽白血病病毒gp85基因的克隆与表达[J]. 邱波,刘功振,王晓伟,王峰,陈洪博,成子强. 病毒学报. 2011(02)
[5]我国近10年鸡白血病流行病学报道与研究分析[J]. 王洪进,张青禅,赵冬敏,柴家前,常维山,崔治中,郭慧君. 中国兽医学报. 2011(02)
[6]J亚群禽白血病毒gp85基因表达及初步应用[J]. 张伟伟,杨宗伟,陈宗艳,王超,李传峰,刘光清. 中国动物传染病学报. 2011(01)
[7]亚单位疫苗佐剂的研究进展[J]. 蒋涛,阮力,王文玲. 中华实验和临床病毒学杂志. 2010 (02)
[8]禽白血病的实验室诊断技术[J]. 焦静波,王建军,杨建文. 畜牧与饲料科学. 2009(Z2)
[9]ALV-J人工感染鸡病毒血症和抗体反应动态[J]. 孙贝贝,崔治中,张青婵,娄本红. 中国农业科学. 2009(11)
[10]商品蛋鸡成髓细胞瘤、血管瘤型J亚群白血病病毒特性的研究[J]. 孟祥凯,刘青,王海伦,张洪海,邱波,刘功振,成子强. 畜牧兽医学报. 2008(11)
博士论文
[1]J亚群禽白血病病毒Env蛋白分子生物学特性研究[D]. 叶建强.扬州大学 2005
硕士论文
[1]中国株J亚群禽白血病病毒全基因组序列的测定与分析[D]. 吴永平.山东农业大学 2004
[2]鸡新城疫基因工程亚单位疫苗的研究[D]. 刘长梅.山东师范大学 2001
本文编号：3340471
【文章来源】：山东农业大学山东省
【文章页数】：57 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
Abstract
1 前言
1.1 J亚群禽白血病病毒概述
1.1.1 ALV-J的一般生物学特性
1.1.2 ALV-J的分子生物学特征
1.1.3 ALV-J的诊断研究与防治现状
1.2 疫苗佐剂概述
1.2.1 MF59佐剂研究进展
1.2.2 R848研究进展
1.2.3 MF59与R848的制备方法
1.3 本研究目的意义
2 材料与方法
2.1 材料
2.1.1 主要实验仪器
2.1.2 实验材料
2.1.3 实验动物
2.1.4 培养基的配制
2.1.5 其他相关溶液的配制
2.2 方法
2.2.1 重组表达载体Pet28a-gp85的构建
2.2.2 ALV-J gp85蛋白的制备
2.2.3 ALV-J gp85蛋白佐剂疫苗的制备
2.2.4 佐剂疫苗免疫效果研究
2.3 数据处理
3 结果与分析
3.1 重组表达载体Pet28a-gp85的鉴定
3.2 gp85蛋白的制备
3.2.1 gp85蛋白的诱导表达、纯化及免疫原性分析结果
3.2.2 蛋白浓度的测定结果
3.3 重组gp85蛋白MF59/R848佐剂疫苗的制备
3.3.1 MF59/R848佐剂疫苗稳定性的测定结果
3.3.2 MF59/R848佐剂疫苗安全性的检验结果
3.4 ALV-J gp85重组蛋白与免疫佐剂联合接种诱导免疫保护的研究
3.4.1 血清中ALV-J特异性抗体的检测
3.4.2 病毒血症的检测
4 讨论
4.1 J亚群禽白血病病毒的流行现状
4.2 重组gp85蛋白MF59/R848佐剂疫苗的质量检验
4.3 重组gp85蛋白MF59/R848佐剂疫苗的免疫效果
4.4 两种佐剂疫苗效果对比研究
5 结论
参考文献
致谢
攻读学位期间发表论文情况及著作
【参考文献】：
期刊论文
[1]ALV-Jgp85重组蛋白与免疫佐剂联合接种雏鸡诱导免疫保护的研究[J]. 窦文文,李宏梅,成子强,刘建柱,刘海港,井维芳,崔治中,郭慧君. 中国预防兽医学报. 2013(03)
[2]禽白血病病毒研究的过去、现在和将来[J]. 崔治中. 生命科学. 2012(04)
[3]兽用疫苗佐剂的研究及应用现状[J]. 任锐,吕雪峰,孟宪奎. 吉林畜牧兽医. 2011(05)
[4]诱发血管瘤型J亚群禽白血病病毒gp85基因的克隆与表达[J]. 邱波,刘功振,王晓伟,王峰,陈洪博,成子强. 病毒学报. 2011(02)
[5]我国近10年鸡白血病流行病学报道与研究分析[J]. 王洪进,张青禅,赵冬敏,柴家前,常维山,崔治中,郭慧君. 中国兽医学报. 2011(02)
[6]J亚群禽白血病毒gp85基因表达及初步应用[J]. 张伟伟,杨宗伟,陈宗艳,王超,李传峰,刘光清. 中国动物传染病学报. 2011(01)
[7]亚单位疫苗佐剂的研究进展[J]. 蒋涛,阮力,王文玲. 中华实验和临床病毒学杂志. 2010 (02)
[8]禽白血病的实验室诊断技术[J]. 焦静波,王建军,杨建文. 畜牧与饲料科学. 2009(Z2)
[9]ALV-J人工感染鸡病毒血症和抗体反应动态[J]. 孙贝贝,崔治中,张青婵,娄本红. 中国农业科学. 2009(11)
[10]商品蛋鸡成髓细胞瘤、血管瘤型J亚群白血病病毒特性的研究[J]. 孟祥凯,刘青,王海伦,张洪海,邱波,刘功振,成子强. 畜牧兽医学报. 2008(11)
博士论文
[1]J亚群禽白血病病毒Env蛋白分子生物学特性研究[D]. 叶建强.扬州大学 2005
硕士论文
[1]中国株J亚群禽白血病病毒全基因组序列的测定与分析[D]. 吴永平.山东农业大学 2004
[2]鸡新城疫基因工程亚单位疫苗的研究[D]. 刘长梅.山东师范大学 2001
本文编号：3340471
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