多杀性巴氏杆菌OmpH与溶血性曼氏杆菌lktA蛋白的融合表达与免疫原性研究
发布时间：2021-08-14 22:55
牛呼吸道疾病综合症（Bovine respiratory disease complex，BRDC）是牛的一种急性呼吸道疾病，目前国内外学者普遍认为它是由于环境的突然变化、应激、运输等多种因素引发的，每年给养牛业带来巨大损失。多杀性巴氏杆菌（Pasteurella multocida）和溶血性曼氏杆菌（Mannheimia haemolytica）是引起牛呼吸道疾病综合症（BRDC）的重要病原，还可引起牛的出血性败血症（Haemorrhagic Septicaemia）和纤维素性肺炎（Fibrinouspneumonia），给养牛业带来巨大损失。临床抗生素的滥用使得耐药菌株不断的出现，给临床治疗带来巨大困难。因此，疫苗接种有望成为预防和控制这两种病原感染的主要措施。研究表明OmpH是多杀性巴氏杆菌最主要的免疫原，可以刺激机体产生保护性抗体，能抵抗病原菌的挑战，白细胞毒素（LKT）是溶血性曼氏杆菌最重要的毒力因子，LKT的多克隆抗体能够对同源的其他血清型提供交叉保护。本研究拟通过大肠杆菌表达系统表达出具有生物学活性的M.haemolytica白细胞毒素蛋白（lktA）及lktA与P.mu...
【文章来源】：黑龙江八一农垦大学黑龙江省
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
lktA的PCR产物的电泳分析
图 2-1 lktA 的 PCR 产物的电泳分析A 的 PCR 产物，744bp；2：阴性对照；M：DNA Marker Fig. 2-1 Agarose gel electrophoresis of the PCR product of lkt product of lktA, 744 bp; 2: Negative control; M: DNA Marker质粒为模板，对重组克隆 lktA -pMD1片段大小相符的条带；将 lktA-pMD凝胶电泳，出现大小分别为 2662 bp2-2 所示：
ktA-pET-28a 表达载体重组质粒的酶切鉴定和 PCRpET-28a 重组质粒酶切结果；2：lktA-pET-28a 重组质粒 PC of lktA-pET-28a plasmid by nucleate endonuclease dtA-pET-28a plasmids digested; 2: lktA-pET-28a PCR product, 7表达及纯化结果 的样品处理后进行 SDS-PAGE，结果纯化后的蛋白在约 34 kDa 处有表达
【参考文献】：
期刊论文
[1]细菌性牛呼吸道疾病的研究进展[J]. 韩猛立,康立超,钟发刚,黄新,谭鹏飞. 中国畜牧兽医. 2013(05)
[2]牛呼吸道疾病综合征的主要病原[J]. 刘志鹏,董秀梅,师东方,王宇. 畜牧兽医科技信息. 2012(12)
[3]溶血性曼氏杆菌致病机制的研究进展[J]. 陈艳红,颜忠,查振林,姚晶,盖新娜. 中国畜牧兽医. 2010(12)
[4]多杀性巴氏杆菌毒力因子、免疫原及重要基因研究进展[J]. 王帅涛,宫强,秦翠丽. 中国畜牧兽医. 2010(03)
[5]溶血性曼氏杆菌PCR检测试剂盒的研制及初步应用[J]. 徐慧,韦莉,佟瑞平,龚玉梅,王宏俊,孙惠玲,张培君. 动物医学进展. 2009(01)
[6]曼氏杆菌病（Mannheimiosis）[J]. 王萍萍,高锐,张伟,黄艳. 畜牧兽医科技信息. 2007(10)
[7]溶血性曼氏杆菌毒素的作用及其分子致病机理[J]. 张永久,王萍萍,武广文. 黑龙江畜牧兽医. 2007(07)
硕士论文
[1]App菌影装载多杀性巴氏杆菌OmpH外膜蛋白DNA疫苗的研究[D]. 孙颖.天津农学院 2011
[2]绵羊溶血性曼氏杆菌灭活疫苗的制作及其免疫效力的检测[D]. 毛东风.西北民族大学 2007
本文编号：3343328
【文章来源】：黑龙江八一农垦大学黑龙江省
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
lktA的PCR产物的电泳分析
图 2-1 lktA 的 PCR 产物的电泳分析A 的 PCR 产物，744bp；2：阴性对照；M：DNA Marker Fig. 2-1 Agarose gel electrophoresis of the PCR product of lkt product of lktA, 744 bp; 2: Negative control; M: DNA Marker质粒为模板，对重组克隆 lktA -pMD1片段大小相符的条带；将 lktA-pMD凝胶电泳，出现大小分别为 2662 bp2-2 所示：
ktA-pET-28a 表达载体重组质粒的酶切鉴定和 PCRpET-28a 重组质粒酶切结果；2：lktA-pET-28a 重组质粒 PC of lktA-pET-28a plasmid by nucleate endonuclease dtA-pET-28a plasmids digested; 2: lktA-pET-28a PCR product, 7表达及纯化结果 的样品处理后进行 SDS-PAGE，结果纯化后的蛋白在约 34 kDa 处有表达
【参考文献】：
期刊论文
[1]细菌性牛呼吸道疾病的研究进展[J]. 韩猛立,康立超,钟发刚,黄新,谭鹏飞. 中国畜牧兽医. 2013(05)
[2]牛呼吸道疾病综合征的主要病原[J]. 刘志鹏,董秀梅,师东方,王宇. 畜牧兽医科技信息. 2012(12)
[3]溶血性曼氏杆菌致病机制的研究进展[J]. 陈艳红,颜忠,查振林,姚晶,盖新娜. 中国畜牧兽医. 2010(12)
[4]多杀性巴氏杆菌毒力因子、免疫原及重要基因研究进展[J]. 王帅涛,宫强,秦翠丽. 中国畜牧兽医. 2010(03)
[5]溶血性曼氏杆菌PCR检测试剂盒的研制及初步应用[J]. 徐慧,韦莉,佟瑞平,龚玉梅,王宏俊,孙惠玲,张培君. 动物医学进展. 2009(01)
[6]曼氏杆菌病（Mannheimiosis）[J]. 王萍萍,高锐,张伟,黄艳. 畜牧兽医科技信息. 2007(10)
[7]溶血性曼氏杆菌毒素的作用及其分子致病机理[J]. 张永久,王萍萍,武广文. 黑龙江畜牧兽医. 2007(07)
硕士论文
[1]App菌影装载多杀性巴氏杆菌OmpH外膜蛋白DNA疫苗的研究[D]. 孙颖.天津农学院 2011
[2]绵羊溶血性曼氏杆菌灭活疫苗的制作及其免疫效力的检测[D]. 毛东风.西北民族大学 2007
本文编号：3343328
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/dongwuyixue/3343328.html
