NS5B和整合素β3在猪瘟病毒复制增殖中的作用和分子机制研究
发布时间：2021-08-15 01:20
猪瘟（CSF）是一种具有高度传染性和致死性的传染病，给养猪业造成了巨大的经济损失。目前我国控制猪瘟的方法主要是疫苗预防和扑杀患病动物，虽然收到了明显的防疫效果，但慢性猪瘟和非典型猪瘟在我国仍不断发生，给猪瘟的防疫带来了困难和新的问题。因此，探究猪瘟病毒复制增殖机制及其与宿主细胞的相互作用关系，将会为揭示猪瘟病毒的致病机制和探索有效防控方法提供理论依据。本研究围绕猪瘟病毒的非结构蛋白NS5B（依赖RNA的RNA聚合酶）和膜受体蛋白整合素β3展开研究，主要探究两者在猪瘟病毒感染及增殖中的作用及其调控机制，获得了以下几结果：1.猪瘟病毒NS5B在人293T细胞中表达并表现出RNA聚合酶活性。在没有其他猪瘟病毒蛋白和猪瘟病毒基因组存在的前提下，利用宿主细胞的模板RNA合成了RNA，该RNA可被RIG-I识别并致使细胞产生内源性免疫反应。体外表达的NS5B蛋白可以利用人工合成的异源RNA模板从头起始合成RNA。根据预测的猪瘟病毒NS5B的二级和三级结构，设计了8个猪瘟病毒活性区域的突变体，体外RNA合成试验证明，突变体K282R的RNA聚合酶活性增强，其他突变体K283R、R285K、I287V...
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：119 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
整合素的结构模式图
B CA 合成所用的模板 RNA；（B）CSFV NS5B 与 HCV1b 株 NS5B 活CSFV NS5B^24 的聚合酶活性梯度鉴定late RNAused in the in vitro RNAsynthesis assay; （B）The compariB from HCV and CSFV; （C） CSFV NS5B^24 titration to find the apconcentration for in vitro RNA synthesis assay图 2-8 体外 RNA 合成试验检测猪瘟病毒 NS5B^24 的聚合酶活性-8 In vitro RNA synthesis to detect the polymerase activity of CSFV NS
C（A）先转染猪瘟病毒 NS5B 后加入药物和先加入药物再转染 NS5B 质粒对 CSFV NS5B 功能的影响检测；（B）vx222 梯度稀释后检测对猪瘟病毒 NS5B 的抑制效果；（C）HCV796 梯度稀释后检测对猪瘟病毒 NS5B 的抑制效果（A）the difference of the inhibition to CSFV NS5B activity when first transfect the plasmids or first addthe drugs;（B）Titration of vx222 in inhibiting CSFV NS5B;（C）Titration of HCV796 in inhibiting CSFNS5B图 2-10 抑制猪瘟病毒 NS5B 的药物筛选Fig. 2-10 Screen for the inhibitors of CSFV NS5B26
【参考文献】：
期刊论文
[1]αV integrin:A new gastrin target in human pancreatic cancer cells[J]. Celine Cayrol,Claudine Bertrand,Aline Kowalski-Chauvel,Laurence Daulhac,Elizabeth Cohen-Jonathan-Moyal,Audrey Ferrand,Catherine Seva. World Journal of Gastroenterology. 2011(40)
本文编号：3343554
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：119 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
整合素的结构模式图
B CA 合成所用的模板 RNA；（B）CSFV NS5B 与 HCV1b 株 NS5B 活CSFV NS5B^24 的聚合酶活性梯度鉴定late RNAused in the in vitro RNAsynthesis assay; （B）The compariB from HCV and CSFV; （C） CSFV NS5B^24 titration to find the apconcentration for in vitro RNA synthesis assay图 2-8 体外 RNA 合成试验检测猪瘟病毒 NS5B^24 的聚合酶活性-8 In vitro RNA synthesis to detect the polymerase activity of CSFV NS
C（A）先转染猪瘟病毒 NS5B 后加入药物和先加入药物再转染 NS5B 质粒对 CSFV NS5B 功能的影响检测；（B）vx222 梯度稀释后检测对猪瘟病毒 NS5B 的抑制效果；（C）HCV796 梯度稀释后检测对猪瘟病毒 NS5B 的抑制效果（A）the difference of the inhibition to CSFV NS5B activity when first transfect the plasmids or first addthe drugs;（B）Titration of vx222 in inhibiting CSFV NS5B;（C）Titration of HCV796 in inhibiting CSFNS5B图 2-10 抑制猪瘟病毒 NS5B 的药物筛选Fig. 2-10 Screen for the inhibitors of CSFV NS5B26
【参考文献】：
期刊论文
[1]αV integrin:A new gastrin target in human pancreatic cancer cells[J]. Celine Cayrol,Claudine Bertrand,Aline Kowalski-Chauvel,Laurence Daulhac,Elizabeth Cohen-Jonathan-Moyal,Audrey Ferrand,Catherine Seva. World Journal of Gastroenterology. 2011(40)
本文编号：3343554
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/dongwuyixue/3343554.html
