α-倒捻子素抑制TAK1/NF-κB信号通路缓解LPS诱导的IEC-6细胞炎性损伤
发布时间：2021-08-15 13:14
α-倒捻子素是一种天然中药成分,具有抗氧化、抗炎和抗肿瘤的作用。脂多糖（LPS）作为革兰氏阴性菌细胞壁的主要成分可以引起多种炎症。本论文中用LPS刺激大鼠肠上皮细胞（IEC-6细胞）构建炎症模型,探讨了α-倒捻子素的抗炎作用及其潜在的分子机制。试验一:利用LPS作为刺激物建立IEC-6细胞炎症模型,通过CCK-8法检测细胞活力、倒置显微镜观察细胞形态、流式细胞术检测细胞凋亡状况。结果表明:LPS刺激IEC-6细胞引起损伤的最佳作用剂量和时间为10μg/mL,24 h,在此模型条件下,细胞活力降低、细胞形态改变、细胞凋亡率升高（P<0.05）。试验二:采用CCK-8法筛选α-倒捻子素的作用浓度、倒置显微镜下观察细胞形态学变化、流式细胞术检测细胞凋亡状况。结果表明:低、中、高浓度分别为2.5、5、10μM的α-倒捻子素预处理细胞,能够显著降低LPS诱导的细胞损伤程度、降低细胞凋亡率（P<0.05）。试验三:ELISA检测细胞上清中PGE2、IL-6、TNF-α和IL-1β的含量,格里斯（Griess）试剂检测NO分泌,qPCR检测炎症因子iNOS、COX-2、IL-6、TNF-...
【文章来源】：北京农学院北京市
【文章页数】：64 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
CCK-8检测不同浓度的LPS和α-倒捻子素处理后IEC-6细胞活力注：数据是三个独立样本的平均值±标准差，不同字母代表差异显著P<0.05
北京农学院硕士学位论文 实验研究3.3 α-倒捻子素对 LPS 引起的 IEC-6 细胞形态的影响为了检测 LPS 对 IEC-6 细胞的损伤作用，以及 α-倒捻子素对细胞的保护作用，观察了10 μg/ml 的 LPS 刺激 24 h 和不同浓度的 α-倒捻子素（2.5、5、10 μM）预处理 1 h 后 IEC-6细胞的形态变化。结果显示，对照组细胞形态有规则、贴壁生长、呈铺路石状，几乎没有变圆脱壁死亡的细胞（图 2 A）；10 μg/ml 的 LPS 刺激 24 h 后，IEC-6 细胞排列杂乱无章，有大量的细胞变圆、皱缩、死亡细胞数明显增加（图 2 B）；而不同浓度的 α-倒捻子素（2.5、5、10 μM）预处理后，可以看出 2.5 μM 的 α-倒捻子素即可明显改善细胞形态，细胞排列明显有规则，皱缩和变圆死亡的细胞数目明显减少，5 和 10 μM 的 α-倒捻子素对 LPS 刺激引起的 IEC-6 细胞形态改变的影响更为明显，并且随着 α-倒捻子素浓度的增加，变形死亡的细胞数目越来越少（图 2 C、D、E）。
北京农学院硕士学位论文 实验研究同浓度的 α-倒捻子素（2.5、5、10 μM）预处理后，与 LPS 组相比早期凋亡和晚期凋亡的细胞数目明显减少（P < 0.05），与对照组没有显著差异（P > 0.05），随着的 α-倒捻子素浓度的增加，细胞凋亡总数逐渐降低（图 3 C、D、E），但是不同浓度的 α-倒捻子素预处理后引起的细胞凋亡的总数之间也没有显著差异（P > 0.05）（图 3F）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]青赤散灌肠对溃疡性结肠炎大鼠血清LPS、TNF-α及结肠上皮细胞凋亡的影响[J]. 冀建斌,周正华,李翀,吴正卿,丁伟. 中国中西医结合消化杂志. 2017(12)
[2]栀子苷对乳腺炎小鼠乳腺组织及乳腺上皮细胞中IL-6,TNF-α和IL-1β表达的影响[J]. 赵慧朵,程旭锋,楚爱景. 中国老年学杂志. 2017(19)
[3]复方蛹虫草对小肠炎症和IEC-6存活率的干预作用[J]. 徐惠林,陈梦秋,潘苏华,李昊. 免疫学杂志. 2017(09)
[4]犊牛岛饲养条件下酸化奶对哺乳犊牛生长性能和饲喂效益的影响[J]. 李珺,侯文乾,刘桂瑞,徐明. 中国奶牛. 2017(07)
[5]猪大肠杆菌病防治方法[J]. 周飞. 乡村科技. 2016(20)
[6]α-倒捻子素对MKN45胃癌细胞增殖、迁移、侵袭和血管生成的影响及其作用机制[J]. 马林伟,徐红涛,戴小丽,韩中保. 重庆医科大学学报. 2017(11)
[7]TLR4在LPS诱导的结肠炎症恢复中的作用[J]. 李旺林,刘梦鳌,曹杰,杨平,郑晓彬,董博业,卢嘉宝. 中国病理生理杂志. 2017(02)
[8]枸杞多糖对小鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其抑制NF-κB,TNF-α,IL-6和IL-1β表达的机制[J]. 葛建彬,卢红建,宋新建,李梅,陈丹丹,吴锋. 中国中药杂志. 2017(02)
[9]阿魏酸抗LPS诱导的奶牛子宫内膜上皮细胞炎性作用[J]. 张志聪,吕安,宫平,张彤,刘艺林,李德琰,姜晓茜,刘蓓桦,刘凤华. 北京农学院学报. 2016(04)
[10]苦参碱抑制LPS诱导巨噬细胞IL-1β、TNF-α分泌及机制研究[J]. 杨雪梅,吴刚. 中国免疫学杂志. 2016(06)
博士论文
[1]Notch1与Wnt/β-catenin信号通路对乙肝病毒X蛋白致肝细胞癌发生的作用及机制研究[D]. 孙倩.华中科技大学 2014
[2]AOG抑制LPS诱导的TLR-4/MD-2/NF-κB信号通路活化的机制研究[D]. 秦文星.第二军医大学 2013
硕士论文
[1]山竹果壳的化学成分和药理作用研究[D]. 徐涛.东华大学 2016
[2]肠道菌群及肠道炎症在OLETF大鼠糖尿病发病中的动态变化[D]. 杨笑云.天津医科大学 2015
[3]褪黑素对脂多糖诱发妊娠期母鼠胎鼠TNF-α及IL-10释放的干预研究[D]. 刘彩美.苏州大学 2009
本文编号：3344620
【文章来源】：北京农学院北京市
【文章页数】：64 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
CCK-8检测不同浓度的LPS和α-倒捻子素处理后IEC-6细胞活力注：数据是三个独立样本的平均值±标准差，不同字母代表差异显著P<0.05
北京农学院硕士学位论文 实验研究3.3 α-倒捻子素对 LPS 引起的 IEC-6 细胞形态的影响为了检测 LPS 对 IEC-6 细胞的损伤作用，以及 α-倒捻子素对细胞的保护作用，观察了10 μg/ml 的 LPS 刺激 24 h 和不同浓度的 α-倒捻子素（2.5、5、10 μM）预处理 1 h 后 IEC-6细胞的形态变化。结果显示，对照组细胞形态有规则、贴壁生长、呈铺路石状，几乎没有变圆脱壁死亡的细胞（图 2 A）；10 μg/ml 的 LPS 刺激 24 h 后，IEC-6 细胞排列杂乱无章，有大量的细胞变圆、皱缩、死亡细胞数明显增加（图 2 B）；而不同浓度的 α-倒捻子素（2.5、5、10 μM）预处理后，可以看出 2.5 μM 的 α-倒捻子素即可明显改善细胞形态，细胞排列明显有规则，皱缩和变圆死亡的细胞数目明显减少，5 和 10 μM 的 α-倒捻子素对 LPS 刺激引起的 IEC-6 细胞形态改变的影响更为明显，并且随着 α-倒捻子素浓度的增加，变形死亡的细胞数目越来越少（图 2 C、D、E）。
北京农学院硕士学位论文 实验研究同浓度的 α-倒捻子素（2.5、5、10 μM）预处理后，与 LPS 组相比早期凋亡和晚期凋亡的细胞数目明显减少（P < 0.05），与对照组没有显著差异（P > 0.05），随着的 α-倒捻子素浓度的增加，细胞凋亡总数逐渐降低（图 3 C、D、E），但是不同浓度的 α-倒捻子素预处理后引起的细胞凋亡的总数之间也没有显著差异（P > 0.05）（图 3F）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]青赤散灌肠对溃疡性结肠炎大鼠血清LPS、TNF-α及结肠上皮细胞凋亡的影响[J]. 冀建斌,周正华,李翀,吴正卿,丁伟. 中国中西医结合消化杂志. 2017(12)
[2]栀子苷对乳腺炎小鼠乳腺组织及乳腺上皮细胞中IL-6,TNF-α和IL-1β表达的影响[J]. 赵慧朵,程旭锋,楚爱景. 中国老年学杂志. 2017(19)
[3]复方蛹虫草对小肠炎症和IEC-6存活率的干预作用[J]. 徐惠林,陈梦秋,潘苏华,李昊. 免疫学杂志. 2017(09)
[4]犊牛岛饲养条件下酸化奶对哺乳犊牛生长性能和饲喂效益的影响[J]. 李珺,侯文乾,刘桂瑞,徐明. 中国奶牛. 2017(07)
[5]猪大肠杆菌病防治方法[J]. 周飞. 乡村科技. 2016(20)
[6]α-倒捻子素对MKN45胃癌细胞增殖、迁移、侵袭和血管生成的影响及其作用机制[J]. 马林伟,徐红涛,戴小丽,韩中保. 重庆医科大学学报. 2017(11)
[7]TLR4在LPS诱导的结肠炎症恢复中的作用[J]. 李旺林,刘梦鳌,曹杰,杨平,郑晓彬,董博业,卢嘉宝. 中国病理生理杂志. 2017(02)
[8]枸杞多糖对小鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其抑制NF-κB,TNF-α,IL-6和IL-1β表达的机制[J]. 葛建彬,卢红建,宋新建,李梅,陈丹丹,吴锋. 中国中药杂志. 2017(02)
[9]阿魏酸抗LPS诱导的奶牛子宫内膜上皮细胞炎性作用[J]. 张志聪,吕安,宫平,张彤,刘艺林,李德琰,姜晓茜,刘蓓桦,刘凤华. 北京农学院学报. 2016(04)
[10]苦参碱抑制LPS诱导巨噬细胞IL-1β、TNF-α分泌及机制研究[J]. 杨雪梅,吴刚. 中国免疫学杂志. 2016(06)
博士论文
[1]Notch1与Wnt/β-catenin信号通路对乙肝病毒X蛋白致肝细胞癌发生的作用及机制研究[D]. 孙倩.华中科技大学 2014
[2]AOG抑制LPS诱导的TLR-4/MD-2/NF-κB信号通路活化的机制研究[D]. 秦文星.第二军医大学 2013
硕士论文
[1]山竹果壳的化学成分和药理作用研究[D]. 徐涛.东华大学 2016
[2]肠道菌群及肠道炎症在OLETF大鼠糖尿病发病中的动态变化[D]. 杨笑云.天津医科大学 2015
[3]褪黑素对脂多糖诱发妊娠期母鼠胎鼠TNF-α及IL-10释放的干预研究[D]. 刘彩美.苏州大学 2009
本文编号：3344620
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/dongwuyixue/3344620.html
