PKA-CREB介导食欲素A调节绵羊卵巢黄体化颗粒细胞分泌孕酮的研究

发布时间：2021-08-16 11:00

　　食欲素A（Orexin A）是近年来发现的—种由下丘脑分泌的神经肽,参与机体生殖、神经内分泌、能量代谢、摄食及内脏等生命活动中。目前已证实外加OrexinA可以影响绵羊卵巢黄体化颗粒细胞分泌孕酮,且这种影响是通过上调细胞内cAMP浓度达到的,但是否经由PKA-CREB信号通路则未见报道,因此本试验应用ELISA、Western blot、免疫荧光、免疫组化的方法对OrexinA影响绵羊卵巢黄体化颗粒细胞分泌孕酮的过程是否经由PKA-CREB信号通路进行研究,以期为Orexin A调节绵羊生殖功能提供理论参考。参照本实验室已经建立的绵羊卵巢颗粒细胞培养体系培养细胞,对细胞进行吉姆萨染色及颗粒细胞特有的卵泡刺激素（FSHR）免疫荧光鉴定;CREB特异性抗体免疫组化染色确定及定位CREB;联合添加卵泡刺激素（FSH）、促黄体素（LH）、雌二醇（E2）使颗粒细胞黄体化,并进行鉴定;黄体化颗粒细胞和外加Orexin A的黄体化颗粒细胞经不同浓度（100 nmol/L、1 μLmol/L、10 μLmol/L）CREB 抑制剂（666-15）（HY-101120）处理后ELISA测定其孕酮分泌量,... 

【文章来源】：内蒙古农业大学内蒙古自治区

【文章页数】：50 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１绵羊卵巢颗粒细胞??Ｆｉｇｕｒｅ．?１?Ｏｖｉａｎ?ｇｒａｎ＾ｉＬｏｓａ?ｃｅｌｌｓ??

图３绵羊卵巢黄体化颗粒细胞鉴定??Ｆｉｇｕｒｅ．?３?Ｉｄｅｎｌｉｆｉｃａｌｉｏｎ?ｏｆｌｕｔｃｉｎｉ／．ａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｏｖａｒｉａｎ?ｇｒａｎ｜．ｉＬｏｓａ?ｃｅｌｌｓ?ｉｎ?ｓｈｅｅｐ??

图５不同浓度６６６－１５对黄体化绵羊卵巢颗粒细胞分泌孕酮的影响??

【参考文献】：
期刊论文
[1]颗粒细胞在卵母细胞发育成熟中的作用[J]. 吴玉萍,赵茴茴,周玉霞,汪丽萍.  国际生殖健康/计划生育杂志. 2017(06)
[2]OrexinA、OrexinB和AMH受体在性腺轴的分布及其生殖生物学意义的研究[J]. 海米提·阿布都力木,李艳,郭琼,荣小灵,李甜,阿地力江·伊明.  中国男科学杂志. 2016(11)
[3]FSH和LH的作用[J]. 朱桂金,聂睿.  生殖医学杂志. 2010 (04)
[4]大鼠睾丸间质细胞中促性腺激素释放激素激动剂调控睾酮合成的机制[J]. 柳海燕,陶晓倩,时姗姗,张艳梅,卢坤刚,韩雪峰,崔英霞,戈一峰,黄宇烽,李晓军,姚兵.  南京医科大学学报(自然科学版). 2009(10)
[5]CREB蛋白与羊卵巢上皮细胞生长和凋亡关系的探讨[J]. 郭伟,荣风年,张友忠.  泰山医学院学报. 2004(03)
[6]哺乳动物卵母细胞体外培养体系的研究进展[J]. 王海滨,夏国良,李美玲,吕忠显,张建超,邵育静.  农业生物技术学报. 2000(03)

博士论文
[1]LH诱导类表皮生长因子表达及卵母细胞成熟的分子机制[D]. 王雅坤.中国农业大学 2017
[2]牛磺酸调节cAMP-PKA-CREB信号通路活性促进生长受限胎鼠神经干细胞增殖的体内外实验研究[D]. 王燕.南方医科大学 2017
[3]溶酶体参与LDL促牛颗粒细胞StAR基因表达和孕酮合成的研究[D]. 张金友.东北农业大学 2015
[4]脱氢表雄酮对肉鸡肝脏脂肪代谢的影响及其细胞分子生物学机理研究[D]. 唐雪.南京农业大学 2009
[5]Orexin A对苏钟母猪下丘脑—垂体—性腺轴作用机理的研究[D]. 宁红梅.南京农业大学 2007

硕士论文
[1]冬凌草甲素对卵巢颗粒细胞雌激素及抗氧化功能的影响[D]. 杨莹.北京农学院 2017
[2]维生素D对精子活力的影响及其机制研究[D]. 彭龙平.南方医科大学 2017
[3]尼罗罗非鱼类固醇激素合成关键基因3β-HSD和StAR的相关研究[D]. 于祥国.西南大学 2013
[4]绵羊食欲素基因cDNA片段的克隆及生物信息学分析[D]. 田秀珍.内蒙古农业大学 2009



本文编号：3345551