脑心肌炎病毒感染Hela细胞的内吞途径

发布时间：2021-08-17 07:45

　　旨在探究脑心肌炎病毒（Encephalomyocarditis virus,EMCV）是否通过内吞途径以及通过何种内吞途径感染细胞,分别采用内吞途径抑制剂、网格蛋白抑制剂、巨胞饮途径抑制剂和肌动蛋白抑制剂作用于Hela细胞后接种EMCV,通过TCID₅₀、qRT-PCR和Western blot等方法检测病毒感染是否受影响。结果显示,内吞途径抑制剂和肌动蛋白抑制剂作用于Hela细胞后,TCID₅₀、qRT-PCR和Western blot等检测结果提示EMCV的感染受到抑制。表明EMCV可通过肌动蛋白参与的内吞途径感染Hela细胞。 

【文章来源】：西北农业学报. 2020,29(02)北大核心CSCD

【文章页数】：9 页

【部分图文】：

抑制剂浓度筛选

用适宜浓度的内吞途径抑制剂NH4Cl和Bafilomycin A1分别作用于Hela细胞后接毒,收集感染后24 h的上清检测病毒滴度和病毒拷贝数,收集细胞检测VP1含量,以未加抑制剂的细胞接毒作为对照组。如图 2所示,经20 mmol/L NH4Cl作用后,VP1相对蛋白含量和病毒滴度下降不显著(P>0.05),但病毒拷贝数显著降低 (P<0.05);经40 mmol/L NH4Cl作用后,VP1相对蛋白含量、病毒滴度和病毒拷贝数显著下降(P<0.01,P<0.001)。经10 nmol/L Bafilomycin A1作用后,VP1相对蛋白含量、病毒滴度和病毒拷贝数均显著下降(P<0.05,P<0.01);经20 nmol/L Bafilomycin A1作用后,VP1相对蛋白含量、病毒滴度和病毒拷贝数下降更加明显(P<0.001)。从总体趋势来看,内吞途径抑制剂NH4Cl和Bafilomycin A1可以抑制EMCV感染Hela细胞。2.3 EMCV感染Hela细胞网格蛋白依赖型内吞途径检测

使用适合浓度巨胞饮途径抑制剂IPA-3和Wortmannin作用于Hela细胞后接种EMCV,收集上清检测病毒滴度和病毒拷贝数。如图4所示,经过IPA-3和Wortmannin作用后病毒滴度和病毒拷贝数下降不显著(P>0.05),提示巨胞饮途径抑制剂IPA-3和Wortmannin不影响EMCV感染Hela细胞。图4 巨胞饮途径抑制剂作用于Hela细胞对EMCV感染细胞的影响

【参考文献】：
期刊论文
[1]口蹄疫病毒可视化RT-LAMP检测方法的建立[J]. 王韦华,刘桂梅,吴奇强,黄鹏波,白鸽,王国超.  西北农业学报. 2018(12)
[2]细胞内吞的研究进展[J]. 范真真,陈虹,黄秉仁.  生命的化学. 2014(04)



本文编号：3347368