塞内卡病毒A和脑心肌炎病毒双重TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立与应用
发布时间:2021-08-17 11:23
为建立同时快速鉴别检测塞内卡病毒A(SVA)和脑心肌炎病毒(EMCV)的方法,根据SVA和EMCV高度保守的3D基因区域,分别设计了2对特异性引物和带2种不同发光基团标记的TaqMan探针,建立同时检测这2种病毒核酸的双重TaqMan荧光定量PCR方法,并对反应条件进行优化。结果显示,该检测方法对SVA和EMCV的最低检测量分别为760 copies/μL和98 copies/μL,并且能够特异性检测出SVA和EMCV,而对猪繁殖和呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪瘟病毒(CSFV)等检测结果均为阴性。本方法中所建立的标准曲线呈现良好的线性关系,重复性试验组内和组间变异系数均低于5%,说明该检测方法重复性高。本研究所建立的双重荧光定量PCR具有方便、快速、特异性好、灵敏度高、重复性好等优点,能够用于SVA和EMCV的同时检测。
【文章来源】:中国兽医科学. 2020,50(07)北大核心CSCD
【文章页数】:8 页
【部分图文】:
SVA与EMCV重组质粒的标准曲线
图2 双重荧光定量PCR方法的特异性试验
【参考文献】:
期刊论文
[1]猪繁殖与呼吸综合征病毒SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法的建立与应用[J]. 张杰,刘雪威,白娟,宋中宝,姜平. 中国兽医科学. 2019(12)
[2]塞尼卡谷病毒重组酶聚合酶扩增-侧流层析试纸条检测方法的建立[J]. 樊晓旭,宋翥远,赵永刚,赵明,董雅琴,张永强,李园丽,迟田英,刘春菊,戈胜强,张志诚,吴晓东,王树双,王志亮. 中国预防兽医学报. 2018(05)
[3]塞尼卡谷病毒重组酶聚合酶扩增技术(RPA)实时荧光检测方法的建立[J]. 樊晓旭,哈登楚日亚,王英丽,王姣,刘春菊,迟田英,赵永刚,张志诚,吴晓东,王志亮. 中国动物检疫. 2017(08)
[4]塞尼卡谷病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立[J]. 樊晓旭,赵永刚,迟田英,哈登楚日亚,吴晓东,王志亮. 中国预防兽医学报. 2016(12)
[5]猪脑心肌炎病毒抗体间接ELISA检测方法的建立及应用[J]. 陆文俊,施开创,屈素洁,莫胜兰,李向涛,钟诚. 动物医学进展. 2011(12)
[6]猪脑心肌炎病毒RT-PCR检测方法的建立[J]. 冯若飞,韦鹏建,李向茸,樊得英,乔自林,李明生,马忠仁. 黑龙江畜牧兽医. 2011(15)
[7]猪脑心肌炎病毒NJ08株基因组序列测定与分析[J]. 白娟,蒋康富,李玉峰,王先炜,姜平. 中国预防兽医学报. 2011(05)
[8]猪脑心肌炎病毒的分离与鉴定[J]. 盖新娜,杨汉春,郭鑫,吕艳丽,王芳,陈艳红,查振林. 畜牧兽医学报. 2007(01)
本文编号:3347671
【文章来源】:中国兽医科学. 2020,50(07)北大核心CSCD
【文章页数】:8 页
【部分图文】:
SVA与EMCV重组质粒的标准曲线
图2 双重荧光定量PCR方法的特异性试验
【参考文献】:
期刊论文
[1]猪繁殖与呼吸综合征病毒SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法的建立与应用[J]. 张杰,刘雪威,白娟,宋中宝,姜平. 中国兽医科学. 2019(12)
[2]塞尼卡谷病毒重组酶聚合酶扩增-侧流层析试纸条检测方法的建立[J]. 樊晓旭,宋翥远,赵永刚,赵明,董雅琴,张永强,李园丽,迟田英,刘春菊,戈胜强,张志诚,吴晓东,王树双,王志亮. 中国预防兽医学报. 2018(05)
[3]塞尼卡谷病毒重组酶聚合酶扩增技术(RPA)实时荧光检测方法的建立[J]. 樊晓旭,哈登楚日亚,王英丽,王姣,刘春菊,迟田英,赵永刚,张志诚,吴晓东,王志亮. 中国动物检疫. 2017(08)
[4]塞尼卡谷病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立[J]. 樊晓旭,赵永刚,迟田英,哈登楚日亚,吴晓东,王志亮. 中国预防兽医学报. 2016(12)
[5]猪脑心肌炎病毒抗体间接ELISA检测方法的建立及应用[J]. 陆文俊,施开创,屈素洁,莫胜兰,李向涛,钟诚. 动物医学进展. 2011(12)
[6]猪脑心肌炎病毒RT-PCR检测方法的建立[J]. 冯若飞,韦鹏建,李向茸,樊得英,乔自林,李明生,马忠仁. 黑龙江畜牧兽医. 2011(15)
[7]猪脑心肌炎病毒NJ08株基因组序列测定与分析[J]. 白娟,蒋康富,李玉峰,王先炜,姜平. 中国预防兽医学报. 2011(05)
[8]猪脑心肌炎病毒的分离与鉴定[J]. 盖新娜,杨汉春,郭鑫,吕艳丽,王芳,陈艳红,查振林. 畜牧兽医学报. 2007(01)
本文编号:3347671
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