牛微小隐孢子虫感染ELISA和胶体金层析试纸条检测方法的建立
发布时间:2021-08-20 19:15
隐孢子虫病是一种呈全球分布的人兽共患寄生虫病,牛可感染多种类型隐孢子虫,主要包括安氏隐孢子虫、微小隐孢子虫、牛隐孢子虫和瑞氏隐孢子虫等,其中微小隐孢子虫感染最为广泛,犊牛感染后出现腹泻、营养不良等症状,且对人类健康危害最为严重。近年来随着养牛业的迅速发展,牛成为人患微小隐孢子虫病的主要来源,且目前尚无微小隐孢子虫的特效药物和疫苗,所以建立快速准确的牛微小隐孢子虫诊断方法,对畜牧业的发展和人类健康安全意义重大。近年来发现在微小隐孢子虫的卵囊中存在一种病毒,即为微小隐孢子虫病毒(Cryptosporidium parvum virus,CSpV1),其在卵囊中存在稳定,且数量较多,可作为牛感染微小隐孢子虫的重要检测指标。本研究选用实验室制备保存的微小隐孢子虫病毒单克隆抗体作为捕获抗体,本实验制备的兔抗微小隐孢子虫病毒衣壳蛋白多克隆抗体作为检测抗体,建立三种检测牛粪便样品的微小隐孢子虫感染免疫学诊断方法并进行对比分析,为今后牛微小隐孢子虫的动态监测提供参考。双抗夹心ELISA检测方法的建立:首先表达微小隐孢子虫病毒衣壳蛋白,制备并纯化出兔抗微小隐孢子虫病毒衣壳蛋白多克隆抗体,以微小隐孢子虫病...
【文章来源】:吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】:77 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
CSpV1PCR产物Fig.1.1PCRproductionofCSpV1
1.2 pMD18-T-CSpV1 双酶onuclease digestion identifiL15000);1:pMD18-T-CSSalⅠ)L15000);1:Identification ofBamHⅠand SalⅠdigestio子虫病毒衣壳蛋白表达载%琼脂糖凝胶电泳分析,建成功,如图 1.3。
3 pET-28a-CSpV1-S 双酶clease digestion identificat0);1:pET-28a-CSpV1-S 双2:pET-28a-CSpV1-S2000);1:Identification of p SalⅠdigestion;2:pET-28a备诱导、未诱导、空载析,可见诱导的菌液样表达,且呈沉淀形式表
【参考文献】:
期刊论文
[1]金坛市农村集中式供水隐孢子虫污染及儿童感染现状[J]. 乐海华. 江苏预防医学. 2016(02)
[2]基于微小隐孢子虫重组CP15/60蛋白的间接ELISA检测方法的建立及上海市猪隐孢子虫感染情况调查[J]. 刘宇轩,米荣升,黄燕,于慧珠,胡盼,詹婷婷,周金林,陈兆国. 中国动物传染病学报. 2015(04)
[3]免疫层析纳米金试纸研究方法进展[J]. 华川,府伟灵. 国际检验医学杂志. 2013(17)
[4]寄生虫性腹泻[J]. 许炽熛. 传染病信息. 2007(04)
硕士论文
[1]猫弓形虫感染ELISA和胶体金试纸检测方法建立与初步应用[D]. 刘维建.吉林大学 2017
[2]犬细粒棘球绦虫感染Dot-ELISA和胶体金试纸条检测方法建立[D]. 高珺珊.吉林大学 2016
[3]微小隐孢子虫cDNA文库的构建、筛选与间接ELISA检测方法的建立[D]. 高依然.吉林大学 2014
[4]郑州和开封病人胃肠道主要寄生虫感染情况调查及蔬菜表面隐孢子虫卵囊洗脱方法的建立[D]. 李廷文.河南农业大学 2013
[5]野生动物隐孢子虫的鉴定及隐孢子虫钙调蛋白基因的扩增[D]. 王小龙.安徽农业大学 2010
[6]小球隐孢子虫病毒的鉴定及其特性研究[D]. 陈建宝.中国人民解放军军需大学 2001
本文编号:3354077
【文章来源】:吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】:77 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
CSpV1PCR产物Fig.1.1PCRproductionofCSpV1
1.2 pMD18-T-CSpV1 双酶onuclease digestion identifiL15000);1:pMD18-T-CSSalⅠ)L15000);1:Identification ofBamHⅠand SalⅠdigestio子虫病毒衣壳蛋白表达载%琼脂糖凝胶电泳分析,建成功,如图 1.3。
3 pET-28a-CSpV1-S 双酶clease digestion identificat0);1:pET-28a-CSpV1-S 双2:pET-28a-CSpV1-S2000);1:Identification of p SalⅠdigestion;2:pET-28a备诱导、未诱导、空载析,可见诱导的菌液样表达,且呈沉淀形式表
【参考文献】:
期刊论文
[1]金坛市农村集中式供水隐孢子虫污染及儿童感染现状[J]. 乐海华. 江苏预防医学. 2016(02)
[2]基于微小隐孢子虫重组CP15/60蛋白的间接ELISA检测方法的建立及上海市猪隐孢子虫感染情况调查[J]. 刘宇轩,米荣升,黄燕,于慧珠,胡盼,詹婷婷,周金林,陈兆国. 中国动物传染病学报. 2015(04)
[3]免疫层析纳米金试纸研究方法进展[J]. 华川,府伟灵. 国际检验医学杂志. 2013(17)
[4]寄生虫性腹泻[J]. 许炽熛. 传染病信息. 2007(04)
硕士论文
[1]猫弓形虫感染ELISA和胶体金试纸检测方法建立与初步应用[D]. 刘维建.吉林大学 2017
[2]犬细粒棘球绦虫感染Dot-ELISA和胶体金试纸条检测方法建立[D]. 高珺珊.吉林大学 2016
[3]微小隐孢子虫cDNA文库的构建、筛选与间接ELISA检测方法的建立[D]. 高依然.吉林大学 2014
[4]郑州和开封病人胃肠道主要寄生虫感染情况调查及蔬菜表面隐孢子虫卵囊洗脱方法的建立[D]. 李廷文.河南农业大学 2013
[5]野生动物隐孢子虫的鉴定及隐孢子虫钙调蛋白基因的扩增[D]. 王小龙.安徽农业大学 2010
[6]小球隐孢子虫病毒的鉴定及其特性研究[D]. 陈建宝.中国人民解放军军需大学 2001
本文编号:3354077
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