十二指肠贾第虫γ和δ贾第素DNA疫苗免疫保护力评价
发布时间：2021-08-20 23:18
十二指肠贾第虫（Giardia duodenalis,简称贾第虫）是一种常见的厌氧原生动物病原体,广泛引起多种哺乳动物产生胃肠道疾病。贾第虫能够导致腹泻、胀气、消瘦、大便油腻恶臭等症状,并且可能引发慢性疾病和肠道外并发症。随着现代生物技术的不断的创新发展,贾第虫的基因疫苗（DNA疫苗）作为一种可能应用于防治贾第虫病的重要方式,其相关研究也受到了越来越多人的关注。DNA疫苗目前在动物模型上能够成功地预防和治疗各种疾病,具有稳定,方便和安全的特点,并且能够引发机体产生细胞和体液免疫应答反应,能够完善婴儿的抗体应答。pcDNA3.1质粒是一种哺乳动物细胞表达载体,在真核表达载体构建中已被广泛应用,适用于DNA疫苗的开发。CpG序列可诱导强烈的Th1样应答,可作为疫苗的佐剂,抵抗各种目标,包括感染性物质,肿瘤抗原,过敏原等。贾第素（giardin）是组成贾第虫细胞骨架蛋白的重要元素,目前确定的贾第素为α、β、γ和δ-giardin。有关研究表明α和β-giardin分子均具有较高的免疫原性,γ-giardin为38 kDa的蛋白质,也许是微丝带的成分之一。δ-giardin在分子水平上的研究取...
【文章来源】：东北农业大学黑龙江省 211工程院校
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
贾第虫生活史[48]
arker D1000；1：γ-giardin 基因 PCR 产物；2：δ-giar1000; 1: The PCR product of γ-giardin gene; 2: The PC3-1 γ-giardin 和δ-giardin 基因 PCR 扩增产物电phoretic profile of PCR products of γ-giardin an粒的酶切鉴定结果GM-T-γ-giardin、pGM-T-δ-giardin1 和 pGM-T-giardin 基因大小为 429 bp，δ-giardin1 和δ-giar（见图 3-2）。证明 pGM-T-γ-giardin、pGM-T成功。
图 3-4 γ-giardin 和δ-giardin 在 Vero 细胞内表达的间接免疫荧光检测Fig. 3-4 Indirect immunofluorescence analysis for expression of γ-giardin and δ-giardin in Vero为了进一步确认重组质粒的体外表达情况，本研究还取转染后的 Vero 细胞裂解液的上液进行 Western Blot，并得到相应的条带，截短后的γ-giardin、δ-giardin 和γ-δ-giardin 表达分子量大小理论值分别是 16 kDa、15 kDa 和 32 kDa，实验结果（见图 3-5）和预期理论值符。
【参考文献】：
期刊论文
[1]隐孢子虫和蓝氏贾第鞭毛虫分子流行病学研究进展[J]. 徐宁,尹建海,沈玉娟,刘华,曹建平. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2018(06)
[2]十二指肠贾第虫α-6贾第素的原核表达及纯化[J]. 李显赫,梁金龙,吴娜,宫鹏涛,李建华,杨举,李赫,张西臣. 中国生物制品学杂志. 2018(05)
[3]我国人体贾第虫病流行病学及基因分型的研究进展[J]. 刘晴,邹扬,杨文彬,朱兴全,李海龙. 中国病原生物学杂志. 2018(01)
[4]Extra-intestinal and long term consequences of Giardia duodenalis infections[J]. Marie CM Halliez,André G Buret. World Journal of Gastroenterology. 2013(47)
本文编号：3354399
【文章来源】：东北农业大学黑龙江省 211工程院校
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
贾第虫生活史[48]
arker D1000；1：γ-giardin 基因 PCR 产物；2：δ-giar1000; 1: The PCR product of γ-giardin gene; 2: The PC3-1 γ-giardin 和δ-giardin 基因 PCR 扩增产物电phoretic profile of PCR products of γ-giardin an粒的酶切鉴定结果GM-T-γ-giardin、pGM-T-δ-giardin1 和 pGM-T-giardin 基因大小为 429 bp，δ-giardin1 和δ-giar（见图 3-2）。证明 pGM-T-γ-giardin、pGM-T成功。
图 3-4 γ-giardin 和δ-giardin 在 Vero 细胞内表达的间接免疫荧光检测Fig. 3-4 Indirect immunofluorescence analysis for expression of γ-giardin and δ-giardin in Vero为了进一步确认重组质粒的体外表达情况，本研究还取转染后的 Vero 细胞裂解液的上液进行 Western Blot，并得到相应的条带，截短后的γ-giardin、δ-giardin 和γ-δ-giardin 表达分子量大小理论值分别是 16 kDa、15 kDa 和 32 kDa，实验结果（见图 3-5）和预期理论值符。
【参考文献】：
期刊论文
[1]隐孢子虫和蓝氏贾第鞭毛虫分子流行病学研究进展[J]. 徐宁,尹建海,沈玉娟,刘华,曹建平. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2018(06)
[2]十二指肠贾第虫α-6贾第素的原核表达及纯化[J]. 李显赫,梁金龙,吴娜,宫鹏涛,李建华,杨举,李赫,张西臣. 中国生物制品学杂志. 2018(05)
[3]我国人体贾第虫病流行病学及基因分型的研究进展[J]. 刘晴,邹扬,杨文彬,朱兴全,李海龙. 中国病原生物学杂志. 2018(01)
[4]Extra-intestinal and long term consequences of Giardia duodenalis infections[J]. Marie CM Halliez,André G Buret. World Journal of Gastroenterology. 2013(47)
本文编号：3354399
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