黄牛冷冻精液体外获能及PGF2α受体基因在卵巢中表达的研究
发布时间：2021-08-22 02:18
为进一步提高黄牛冷冻精液的体外获能率以及探究前列腺素在动物生殖生理方面的作用机制。本实验以黄牛冷冻精液、发情期黄牛的卵巢、黄体为研究对象。分别选择了与体外获能有关的BO液、percoll液、咖啡因、肝素以及与动物生殖密切相关的前列腺素（PGF2α）受体为研究对象。采用了不同的获能方式对的冷冻精液的体外获能进行了研究；并运用分子克隆技术克隆了黄牛黄体、卵巢PGF2α受体基因的部分序列；免疫组化技术定位了该受体在黄牛卵巢、黄体的分布情况；生物信息学方法预测和分析了该基因及其编码的蛋白质的基本理化性质、疏水性、结构域、二级结构、三级结构等方面。以期建立起一套冷冻精液体外获能的最佳条件；并为进一步探讨前列腺素在动物生殖生理方面的作用机制提供一定的基础资料。主要的研究结果如下：1.用BO液、percoll液两种不同的洗精液处理精子，结果发现BO液的效果要优于percoll液。2.咖啡因在受精液中的加入时间为洗涤后的精液在受精液中孵育10～15min后，加入浓度为1%。3.冷冻精液体外获能的最佳条件为肝素浓度80μg/ml，培养时间20min；发生顶体反应的最佳条件分别为肝素浓度20μg/ml，培...
【文章来源】：甘肃农业大学甘肃省
【文章页数】：48 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
获能后的精子
图 1 获能后的精子 图 2 发生顶体反应后的精子（200×）Fig1. Sperm capacitation afte（r200X） Fig2. Sperm acrosome reaction afte（r200X）1.3 不同的处理方法对冷冻精液体外获能的研究1.3.1 精液的不同处理方法对体外获能的影响 洗精液：BO 液受精液：BO 液+20mg/mlBSA+1%双抗（青霉素 1000IU/ml,链霉素 1000IU/ml)+3.38mg/ml 咖啡因（1）BO 上浮法：取预先平衡在 37℃培养箱中的洗精液 1mL，置于 1.5mL 的尖底离心管中。取出牛冻精 1 支,在 40℃水浴锅中解冻 5s，将解冻后的精液移入
图 3.黄体、卵巢 RNA 的提取结果.1：黄体 RNA；2：卵巢 RNAFig3. RNA extraction of cattle corpus luteum and1:RNA of corpus luteum;2:RNA of ovary基因的 PCR 扩增火温度(54.3℃)扩增黄体、卵巢的 PGF2αR 基泳检测，可见一条介于 500-750bp 之间的 DN大小一致（图 4）
本文编号：3356801
【文章来源】：甘肃农业大学甘肃省
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【学位级别】：硕士
【部分图文】：
获能后的精子
图 1 获能后的精子 图 2 发生顶体反应后的精子（200×）Fig1. Sperm capacitation afte（r200X） Fig2. Sperm acrosome reaction afte（r200X）1.3 不同的处理方法对冷冻精液体外获能的研究1.3.1 精液的不同处理方法对体外获能的影响 洗精液：BO 液受精液：BO 液+20mg/mlBSA+1%双抗（青霉素 1000IU/ml,链霉素 1000IU/ml)+3.38mg/ml 咖啡因（1）BO 上浮法：取预先平衡在 37℃培养箱中的洗精液 1mL，置于 1.5mL 的尖底离心管中。取出牛冻精 1 支,在 40℃水浴锅中解冻 5s，将解冻后的精液移入
图 3.黄体、卵巢 RNA 的提取结果.1：黄体 RNA；2：卵巢 RNAFig3. RNA extraction of cattle corpus luteum and1:RNA of corpus luteum;2:RNA of ovary基因的 PCR 扩增火温度(54.3℃)扩增黄体、卵巢的 PGF2αR 基泳检测，可见一条介于 500-750bp 之间的 DN大小一致（图 4）
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