猪OLR1基因对肌内前脂肪细胞分化的影响
发布时间：2021-08-23 17:43
研究氧化型低密度脂蛋白受体1（oxidized low-density lipoprotein receptor1,OLR1）基因在猪前脂肪细胞分化过程中的作用,为深入研究OLR1基因在脂肪沉积中的功能奠定基础。根据GenBank中猪OLR1基因序列（登录号:NM213805）,构建OLR1基因过表达载体OLR1-pcDNA3.1,同时合成干扰OLR1表达的siRNA。从恩施黑猪背最长肌中分离前脂肪细胞,分别将OLR1-pcDNA3.1和OLR1-siRNA转染前脂肪细胞,并对细胞进行诱导分化,至第6天,通过油红O染色、甘油三酯含量测定和荧光定量PCR检测OLR1基因对前脂肪细胞分化的影响。结果显示,OLR1过表达组脂滴明显多于对照组,甘油三酯含量显著（P<0.05）增加,成脂分化标志基因PPARγ的表达量极显著（P<0.01）升高、C/EBPα和FAS的表达量显著（P<0.05）升高;干扰OLR1后,细胞内脂滴减少,甘油三酯含量显著（P<0.05）下降,成脂分化标志基因PPARγ的表达量极显著（P<0.01）下降,C/EBPα和FA...
【文章来源】：浙江农业学报. 2020,32(12)北大核心CSCD
【文章页数】：7 页
【部分图文】：
OLR1基因扩增产物电泳结果
图1 OLR1基因扩增产物电泳结果收集转染OLR1-siRNA和对照NC 24 h后的细胞,用Trizol法提取总RNA。按照Takara公司试剂盒PrimeScriptTM RT说明进行反转录,用引物pOLQF和pOLQR(表1)检测各处理中OLR1基因的表达量。结果显示,siRNA1的干扰效果最好,其OLR1基因表达量下降了86%(P<0.01)(图3)。因此,选择siRNA1用于后续试验。
荧光定量PCR检测结果表明:过表达组(OLR1-pcDNA3.1)中OLR1、PPARγ、C/EBPα和FAS基因的mRNA表达量显著(P<0.05)或者极显著(P<0.01)高于对照组(pcDNA3.1)(图4-A)。干扰组(OLR1-siRNA)与对照组(NC)相比,OLR1、PPARγ、C/EBPα和FAS基因的mRNA表达量显著(P<0.05)或者极显著(P<0.01)下降(图4-B)。2.4 油红O染色和甘油三酯含量
【参考文献】：
期刊论文
[1]屯昌猪PDK4基因克隆及其组织表达分析[J]. 孙瑞萍,王峰,晁哲,刘海隆,邢漫萍,刘圈炜,黄丽丽,郑心力,魏立民. 浙江农业学报. 2020(06)
[2]Leptin过表达对猪前脂肪细胞脂滴形成的研究[J]. 胡濒月,胡杨,成文敏,赵素梅,赵红业,魏红江. 生物技术通报. 2020(08)
[3]氧化型低密度脂蛋白受体1（OLR1）基因在家畜经济性状中的研究进展[J]. 李托,李陇平. 榆林学院学报. 2020(02)
[4]影响猪脂肪沉积主要候选基因的研究进展[J]. 瞿秋红,黄叶,蒋钦杨,黄艳娜. 动物营养学报. 2019(07)
[5]Krüppel-Like Factor 3（KLF3）基因对牛脂肪沉积的作用[J]. 郭红芳,宁越,成功,昝林森. 中国农业科学. 2019(07)
[6]牛ACOX1基因过表达载体构建及对脂肪沉积的初步研究[J]. 张凤,曾倩晖,陶虎,熊琪,张年,刘洋,蒋思文,陈明新. 中国畜牧杂志. 2017(11)
[7]猪OLR1基因克隆及其与生产性状的关联、表达分析[J]. 郭咪咪,乔木,吴俊静,李良华,梅书棋,李助南. 华中农业大学学报. 2015(03)
[8]脂肪酸对小鼠前体脂肪细胞增殖分化及OLR1基因转录表达的作用[J]. 孙超,刘春伟. 西北农林科技大学学报(自然科学版). 2009(03)
[9]猪肌内脂肪前体细胞与皮下脂肪前体细胞分化过程中基因差异表达分析[J]. 张罕星,朱晓彤,束刚,周桂炫,高萍,高淑静,张常明,江青艳,陈瑶生. 中国农业科学. 2008(11)
博士论文
[1]猪骨骼肌和脂肪组织microRNA调控元件鉴定及成肌细胞诱导成脂机理研究[D]. 候晔.华中农业大学 2019
[2]脂肪细胞分化相关因子基因表达在猪生长过程中的变化规律研究[D]. 姜俊芳.浙江大学 2006
本文编号：3358312
【文章来源】：浙江农业学报. 2020,32(12)北大核心CSCD
【文章页数】：7 页
【部分图文】：
OLR1基因扩增产物电泳结果
图1 OLR1基因扩增产物电泳结果收集转染OLR1-siRNA和对照NC 24 h后的细胞,用Trizol法提取总RNA。按照Takara公司试剂盒PrimeScriptTM RT说明进行反转录,用引物pOLQF和pOLQR(表1)检测各处理中OLR1基因的表达量。结果显示,siRNA1的干扰效果最好,其OLR1基因表达量下降了86%(P<0.01)(图3)。因此,选择siRNA1用于后续试验。
荧光定量PCR检测结果表明:过表达组(OLR1-pcDNA3.1)中OLR1、PPARγ、C/EBPα和FAS基因的mRNA表达量显著(P<0.05)或者极显著(P<0.01)高于对照组(pcDNA3.1)(图4-A)。干扰组(OLR1-siRNA)与对照组(NC)相比,OLR1、PPARγ、C/EBPα和FAS基因的mRNA表达量显著(P<0.05)或者极显著(P<0.01)下降(图4-B)。2.4 油红O染色和甘油三酯含量
【参考文献】：
期刊论文
[1]屯昌猪PDK4基因克隆及其组织表达分析[J]. 孙瑞萍,王峰,晁哲,刘海隆,邢漫萍,刘圈炜,黄丽丽,郑心力,魏立民. 浙江农业学报. 2020(06)
[2]Leptin过表达对猪前脂肪细胞脂滴形成的研究[J]. 胡濒月,胡杨,成文敏,赵素梅,赵红业,魏红江. 生物技术通报. 2020(08)
[3]氧化型低密度脂蛋白受体1（OLR1）基因在家畜经济性状中的研究进展[J]. 李托,李陇平. 榆林学院学报. 2020(02)
[4]影响猪脂肪沉积主要候选基因的研究进展[J]. 瞿秋红,黄叶,蒋钦杨,黄艳娜. 动物营养学报. 2019(07)
[5]Krüppel-Like Factor 3（KLF3）基因对牛脂肪沉积的作用[J]. 郭红芳,宁越,成功,昝林森. 中国农业科学. 2019(07)
[6]牛ACOX1基因过表达载体构建及对脂肪沉积的初步研究[J]. 张凤,曾倩晖,陶虎,熊琪,张年,刘洋,蒋思文,陈明新. 中国畜牧杂志. 2017(11)
[7]猪OLR1基因克隆及其与生产性状的关联、表达分析[J]. 郭咪咪,乔木,吴俊静,李良华,梅书棋,李助南. 华中农业大学学报. 2015(03)
[8]脂肪酸对小鼠前体脂肪细胞增殖分化及OLR1基因转录表达的作用[J]. 孙超,刘春伟. 西北农林科技大学学报(自然科学版). 2009(03)
[9]猪肌内脂肪前体细胞与皮下脂肪前体细胞分化过程中基因差异表达分析[J]. 张罕星,朱晓彤,束刚,周桂炫,高萍,高淑静,张常明,江青艳,陈瑶生. 中国农业科学. 2008(11)
博士论文
[1]猪骨骼肌和脂肪组织microRNA调控元件鉴定及成肌细胞诱导成脂机理研究[D]. 候晔.华中农业大学 2019
[2]脂肪细胞分化相关因子基因表达在猪生长过程中的变化规律研究[D]. 姜俊芳.浙江大学 2006
本文编号：3358312
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