抗幽门螺杆菌特异性卵黄抗体IgY制备和效果评价

发布时间：2021-08-23 17:23

　　幽门螺旋杆菌（Helicobacter pylori, H. pylori）是引起胃相关疾病的重要因素,世界卫生组织将其列为I类致癌因子。目前“三联”或“四联”疗法是临床治疗H. pylori相关疾病的主要手段,但是耐药菌株的出现导致该方法的治愈率越来越低,因此开发高效、安全、经济且不会产生耐药性的药物显得尤为迫切和重要。卵黄抗体（Specific egg yolk immunoglobulin） IgY，是禽类主要的血清免疫球蛋白,国内外研究表明幽门螺杆菌全菌或某类致病因子的重组蛋白制备的抗H. pylori特异性IgY也可以达到治疗感染H. pylori的效果。H. pylori在胃部低pH（<2）情况下利用尿素酶水解从血液中扩散出的尿素为氨水和二氧化碳,在菌体周围形成“氨云”中和胃酸。有利于H. pylori穿过胃黏液层,定植于胃上皮细胞表面。H. pylori尿素酶B亚单位是主要的功能单位,包含尿素酶的活性中心。尿素酶膜通道蛋白UreI对幽门螺杆菌在人和动物体内生存起关键作用。本实验在前期对H. pylori的urel和ureB基因的生物学作用进行研究的基础上,成功的制备... 

【文章来源】：四川农业大学四川省 211工程院校

【文章页数】：51 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
第一章 综述
    1 幽门螺杆菌
    2 幽门螺杆菌感染
        2.1 流行病学概况
        2.2 中国区域幽门螺杆菌感染流行病学状况及趋势
        2.3 我国各年龄阶段幽门螺杆菌感染情况
    3 幽门螺杆菌的治疗方法
    4 卵黄抗体
        4.1 卵黄抗体的优势
        4.2 不同类型的抗幽门螺杆菌特异性IgY的研究现状
            4.2.1 幽门螺杆菌全菌
            4.2.2 尿素酶
            4.2.3 空泡毒素VacA
            4.2.4 粘附素HpaA
            4.2.5 中性粒细胞激活蛋白Nap
            4.2.6 其他抗原
        4.3 商品化IgY
第二章 特异性IgY的制备
    1 材料与方法
        1.1 材料
        1.2 方法
            1.2.1 抗原制备
            1.2.2 蛋鸡免疫
            1.2.3 分离纯化IgY
            1.2.4 IgY浓度与效价检测
            1.2.5 IgY的纯度检测
    2 结果
        2.1 免疫后抗体IgY效价的变化
        2.2 抗H. pylori特异性IgY的浓度和纯度
    3 讨论
第三章 特异性IgY体外抑菌效果评价
    1 材料与方法
        1.1 材料
        1.2 方法
            1.2.1 IgY体外抑菌涂板
            1.2.2 快速脲酶试验
    2 结果
        2.1 IgY体外抑菌涂板
        2.2 快速尿酶试验
    3. 讨论
第四章 特异性IgY动物实验效果评价
    1 材料与方法
        1.1 材料
        1.2 方法
            1.2.1 建立幽门螺杆菌感染BALB/c小鼠模型
            1.2.2 抗幽门螺杆菌特异性IgY对小鼠的治疗
            1.2.3 革兰氏染色镜检
            1.2.4 普通PCR检测
            1.2.5 尿素酶试验检测
    2 结果
        2.1 建立幽门螺杆菌感染BALB/c小鼠模型
        2.2 抗幽门螺杆菌特异性IgY对小鼠的治疗
            2.2.1 革兰氏染色镜检
            2.2.2 普通PCR检测
            2.2.3 快速脲酶试验
    3 讨论
结论
参考文献
附录
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]幽门螺杆菌BIB原核表达工程菌的构建及微生物学特性分析[J]. 潘兴,肖继红,杨靖,王保宁,李健春,周法庭,祝捷,周永君,李婉宜,李明远.  西部医学. 2013(10)
[2]幽门螺杆菌新国际共识解读[J]. 刘文忠,萧树东.  胃肠病学. 2012(01)
[3]抗CtUBE IgY的制备及其抗幽门螺杆菌感染研究[J]. 段琳,丁建坤,赵文锋,吴梧桐,刘景晶.  药物生物技术. 2011(04)
[4]硫糖铝对幽门螺杆菌VacA IgY的保护作用的动物实验评价[J]. 郭丽媛,吴金英,黄伟,杨致邦,吴敏,马小京.  中国微生态学杂志. 2010(11)
[5]H.pylori抗体鸡蛋制品对H.pylori感染BALB/c小鼠的实验研究[J]. 韩伟平,王朝晖,李玉中.  中国微生态学杂志. 2010(10)
[6]ureI和ctB-ureI真核质粒构建及表达分析[J]. 王保宁,杨远,邝玉,曹康,李明远,李婉宜.  细胞与分子免疫学杂志. 2010(08)
[7]卵黄抗体开发现状及应用进展[J]. 段琳,赵文锋,丁建坤,吴梧桐,刘景晶.  中国生化药物杂志. 2010(03)
[8]单克隆卵黄抗体技术研究进展[J]. 陈红秀,张小莺,陈琛,赵建乐,韩水仲,李引乾,刘晓强.  生物化学与生物物理进展. 2010(04)
[9]HpaA IgY抑制小鼠胃内幽门螺杆菌的定植[J]. 黄进,秦思栋,杨致邦,黄伟,邓颖,叶翠莲.  免疫学杂志. 2008(05)
[10]百贝宁治疗婴幼儿轮状病毒性肠炎疗效观察[J]. 王永明.  中国实用医药. 2008(19)



本文编号：3358285