干扰素刺激基因12（ISG12）抑制新城疫病毒复制的机制研究

发布时间：2021-08-24 10:22

　　新城疫（Newcastle disease,ND）是由新城疫病毒（Newcastle disease virus,NDV）引起的危害最严重的禽类传染病之一,具有高热、呼吸困难、接触性传播、败血经过等特点,给我国及世界养禽业造成了严重的经济损失。目前,免疫接种是预防和控制新城疫的主要途径,但有些时候得不到理想的效果,因此需要探索新的防制策略。本实验室前期通过RNA-Seq技术,筛选出NDV感染机体后与免疫相关的多个差异表达基因,从中挑选出干扰素刺激基因12（1）和12（2）（ISG12（1）/（2））进行抗病毒研究。本论文的主要研究结果如下:（1）NDV感染可诱导ISG12（1）和ISG12（2）表达。在NDV F48E9感染的10日龄SPF鸡胚和4周龄SPF鸡的法氏囊中,利用RT-qPCR对前期转录组数据进行验证,结果表明ISG12（1）/（2）表达显著上调。在不同毒力NDV感染的CEF和DF-1细胞中,也显示ISG12（1）上调,在NDV F48E9感染的DF-1细胞中,ISG12（2）表达也上调。提示ISG12可能在NDV感染中发挥一定的作用。（2）ISG12（1）和ISG12（2... 

【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：70 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

NDV粒子结构模式图(Ganaretal.2014)

所用一抗为 1:500 稀释 H&L (Alexa Fluor 488)。行至少 3 次生物学重复后得出计分析，P < 0.05 代表差异表差异极显著（***）。行扩增，得到 300bp 的 ISG1到 pCA-ISG12(1)-Flag（ISG1切鉴定正确的质粒送擎科生明载体构建成功。将其转染，通过 Western blot（图 2-3况，结果显示转染 ISG12(1)质

图 2-2 ISG12(1)克隆载体的双酶切鉴 D2000 plus；1.重组质粒 pCA-ISG12A-ISG12(1)-Flag 双酶切（EcoRI, Bgnzyme-digested identification of ISG1NAMaker D2000 plus; 1. Negative c digestion of pCA-ISG12(1)-Flag (Eco

【参考文献】：
博士论文
[1]新城疫病毒感染鸡胚miRNAs和mRNAs表达谱分析与抗病毒基因的筛选[D]. 贾燕青.西北农林科技大学 2018
[2]不同宿主来源新城疫病毒全基因组特征及其V蛋白对DF-1细胞IFN-β生成的影响[D]. 陈胜利.西北农林科技大学 2013

硕士论文
[1]新城疫病毒Yulin株V蛋白对Ⅰ型IFN信号通路相关因子的影响及Yulin株全长cDNA的构建[D]. 王燕平.西北农林科技大学 2015
[2]雏鸭感染Ⅰ型鸭肝炎病毒相关基因的筛选[D]. 王红.华中农业大学 2008



本文编号：3359809