EV71与干扰素相互作用的机理研究

发布时间：2021-08-28 18:38

　　EV71（Enterovirus71）引发的手足口病在近年来的发病率仍然很高。截止目前，对于EV71感染，尚没有有效的疫苗和治疗办法。干扰素作为广谱抗病毒药物，已成功用于多种病毒感染疾病的治疗，研究显示干扰素可抑制EV71的复制，但EV71病毒也可在一定程度上逃避干扰素的抑制作用。本实验旨在探索EV71拮抗干扰素抗病毒作用的机制。本实验获取五株EV71病毒：安徽株（Anhui2007）一株，VR1432和VR1775（购自ATCC，American Type Culture Collection，美国模式菌种保藏库），GDV103和GDV102（购自CCTCC，China Center for Type Culture Collection，中国典型培养物保藏中心）。根据GenBank中EV71的全基因组序列设计了6对引物，分段扩增了覆盖EV71（安徽株，VR1432，GDV103）基因组全长序列的6个重叠片段，并进行序列测定和分析。三株EV71全基因组核苷酸序列已被GenBank数据库收录，Anhui2007（安徽株）、VR1432和GDV103的登陆编号分别为KC954662、KC... 

【文章来源】：中国人民解放军军事科学院北京市

【文章页数】：81 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

EV71基因组结构

S RTase Mix ward erse R 程序如下：95℃ 10s；扩增反应 95℃ 5s，55℃-95℃ 做融解曲线。测定 的滴度如下：Anhui2007：8×106 PFU/ml；VR14326 PFU/ml；GDV103：60×106 PFU/ml；GDV102：

图 1.2 EV71 全序列 nt 遗传进化分析2.3 结晶紫染色结果结晶紫染色的方法能够直观反应细胞病变。病毒感染细胞后，随着感染时间的延长，细胞病变而死亡脱落。结晶紫作为一种活细胞染料，只能对活细胞着色。而预先进行不同浓度的干扰素保护后，病毒的复制会受到不同程度的抑制，则根据活细胞数的不同，结晶紫的着色深浅会与干扰素浓度呈现一致性。从结晶紫染色分析的结果看，在 Vero E6 细胞中，IFN-ω 比 IFN-α2b 的保护效果要好（见图1.3）。从图 1.3 看，IFN-ω 保护 VR1432、Anhui、GDV103 和 GDV102 四株病毒感染细胞的 EC50 分别为 1810.7 IU/ml、931.5 IU/ml、385.8 IU/ml、40.6 IU/ml；IFN-α2b 保护 GDV102 感染细胞的 EC50 为 846.9 IU/ml，当 IFN-α2b 的浓度达到50000 IU/ml 时，对 VR1432、Anhui、GDV103 三株病毒感染的细胞仍没有达到100%的保护效果。2.4 定量 PCR 法检测干扰素对 EV71 复制的影响

【参考文献】：
期刊论文
[1]The interferon inducing pathways and the hepatitis C virus[J]. Eliane F Meurs,Adrien Breiman.  World Journal of Gastroenterology. 2007(17)



本文编号：3369040