猪萎缩性鼻炎基因重组疫苗的比较研究

发布时间：2021-08-29 17:23

　　猪传染性萎缩性鼻炎（Swine infectious atrophic rhinitis, AR）是一种猪的主要呼吸道传染病,主要由D型产毒素多杀性巴氏杆菌（Toxigenic Pasteurella multocida, T+Pm）和支气管败血波氏杆菌（Bordetella bronchiseptica, Bb）单独或共同感染引起,可造成猪的慢性鼻炎、鼻甲骨萎缩甚至消失,降低猪只生产性能,严重者甚至死亡,给养殖业造成了严重的经济损失。Bb的丝状血凝素FHA和百日咳杆菌粘附素PRN被认为是该菌重要的粘附因子和抗原成分；而T+Pm toxA基因编码的皮肤坏死毒素（DNT）是其主要致病毒力因子,研究表明ToxA基因C端和N端编码的氨基酸结构分别是DNT的催化位点和粘附位点,两者都具有良好的免疫原性。本实验室分别以减毒沙门氏菌和减毒波氏杆菌为载体,已构建了表达支气管败血波氏杆菌FHA和PRN融合基因的重组沙门氏菌C501（PYA-F1P2）.表达多杀性巴氏杆菌toxA基因的重组沙门氏菌C501（PYA-toxA）、分别表达多杀性巴氏杆菌toxA基因C端和N端的重组支气管败血波氏杆菌QH081... 

【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：62 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略词表(Abbreviation)
1 文献综述
    1.1 猪萎缩性鼻炎
        1.1.1 病原学
        1.1.2 流行病学
        1.1.3 综合防控
    1.2 产毒素多杀性巴氏杆菌主要毒力因子的研究进展
        1.2.1 PMT毒素的特性研究
        1.2.2 PMT毒素的免疫原性片段研究
    1.3 支气管败血波氏杆菌主要毒力因子研究进展
        1.3.1 毒力因子的特性研究
        1.3.2 Bb免疫原性片段研究
    1.4 猪萎缩性鼻炎疫苗研究进展
        1.4.1 灭活苗
        1.4.2 弱毒苗、亚单位疫苗与基因工程苗
2 研究目的与意义
3 材料与方法
    3.1 材料
        3.1.1 菌株
        3.1.2 试验动物
        3.1.3 酶和试剂
        3.1.4 主要培养基及其配制
        3.1.5 缓冲液及试剂配制
        3.1.6 引物
    3.2 方法
        3.2.1 疫苗的制备
        3.2.2 抗体间接ELISA检测方法的建立
        3.2.3 仔猪Bb和T~+Pm母源抗体消长规律的测定
        3.2.4 重组疫苗的安全性测定
        3.2.5 重组疫苗菌株最佳免疫剂量的测定
        3.2.6 重组疫苗间及与其它疫苗的免疫效果对比
4 结果与分析
    4.1 疫苗的制备
        4.1.1 重组疫苗菌株的鉴定
        4.1.2 重组疫苗冻干条件的优化
        4.1.3 疫苗的制备
    4.2 T~+Pm、Bb抗体间接ELISA检测方法的建立
    4.3 试验猪场仔猪免疫方案和母源抗体消长规律研究
    4.4 重组疫苗对猪的安全性
        4.4.1 重组疫苗对仔猪的安全性
        4.4.2 重组疫苗对环境的安全性
    4.5 重组疫苗对仔猪的最佳免疫剂量
        4.5.1 断奶仔猪的抗体水平检测结果
        4.5.2 免疫猪只健康状况及体温监测
    4.6 重组疫苗间及与其它疫苗的效果对比试验
        4.6.1 不同疫苗对仔猪的免疫效力
        4.6.2 仔猪免疫后观察情况
        4.6.3 仔猪生长情况
5 讨论
6 结论
参考文献
附录
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]广东地区猪传染性萎缩性鼻炎流行病学调查[J]. 白挨泉,刘为民,徐苏标,袁冲,王晓清.  中国预防兽医学报. 2012(06)
[2]国内兽用冻干疫苗的发展现状[J]. 邓彦莉,李艳华,陈俭清.  畜牧兽医科技信息. 2011(03)
[3]氟苯尼考对猪传染性萎缩性鼻炎治疗效果观察[J]. 杨渊,和万本,和本勤,和冠.  云南畜牧兽医. 2010(02)
[4]重组产毒多杀性巴氏杆菌毒素PMT的N-端和C-端蛋白的生物学活性及免疫原性[J]. 汤细彪,吴斌,赵战勤,邓永,何华,何启盖,陈焕春.  微生物学报. 2008(02)
[5]猪萎缩性鼻炎的防治对策[J]. 范玉霞.  动物医学进展. 2006(05)
[6]猪多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及生物学特性研究[J]. 唐先春,吴斌,索绪峰,王大林,陈焕春,尹争艳.  畜牧兽医学报. 2005(06)
[7]猪多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及毒素检测[J]. 索绪峰,王建新,姚德标,王大林,张嗣华,李碧思,王美燕.  中国兽医杂志. 2005(06)
[8]多重PCR在猪传染性萎缩性鼻炎诊断中的应用[J]. 鲁承,金鑫,杨咏洁.  中国兽医杂志. 2003(12)
[9]中草药防治猪传染性萎缩性鼻炎[J]. 黄平.  中兽医医药杂志. 2001(06)
[10]我国部分地区猪传染性萎缩性鼻炎病原的调查[J]. 齐铁英,张亚华,苑士祥,杨留战,张树成,杨旭夫,刘杰.  中国兽医科技. 1995(04)

博士论文
[1]支气管败血波氏杆菌的重组沙门氏菌基因工程疫苗研究[D]. 赵战勤.华中农业大学 2008

硕士论文
[1]湖北规模化猪场猪萎缩性鼻炎流行病学调查与净化研究[D]. 余腾.华中农业大学 2011
[2]猪多杀性巴氏杆菌分离鉴定及其PMT毒素免疫原性研究[D]. 张军虎.华中农业大学 2011
[3]产毒素多杀性巴氏杆菌重组沙门氏菌基因工程疫苗的研究[D]. 段龙川.华中农业大学 2010
[4]多杀性巴氏杆菌毒素单克隆抗体的制备及初步应用[D]. 卢顺.华中农业大学 2008
[5]广西猪萎缩性鼻炎流行病学调查及猪多杀性巴氏杆菌OMPH基因的克隆与序列分析[D]. 钟勤.广西大学 2007
[6]贵州省猪萎缩性鼻炎病原的分离与鉴定[D]. 徐景峨.贵州大学 2007
[7]猪传染性萎缩性鼻炎综合防制的研究[D]. 申刚.湖南农业大学 2003



本文编号：3371064